蒙药齿缘草的薄层色谱鉴别研究△

常霄巍 巴俊杰

(内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010100)

蒙药齿缘草的薄层色谱鉴别研究△

常霄巍 巴俊杰*

(内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010100)

目的：建立蒙药齿缘草的薄层色谱鉴别方法。方法：薄层色谱法。结果：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点。结论：建立了蒙药齿缘草的薄层色谱鉴别方法，为提高该蒙药的质量标准提供了薄层色谱鉴别方法。

蒙药；齿缘草；薄层色谱鉴别

齿缘草，蒙药名额布森-瓦德，为紫草科植物石生齿缘草Eritrichium rupestre (Pall.)Bunge 的干燥地上部分，分布于我国的东北、华北和西北的东部，西伯利亚和蒙古也有分布，主产于内蒙古的中西部和甘肃、宁夏等地[1-3]。该药材收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》蒙药分册，有杀“粘”、清热、解毒之功能，用于治疗瘟热流感，“协日”人脉症，“协日”热，炭疽等[4]，为常用蒙药。鉴于目前尚未见蒙药齿缘草薄层色谱鉴别方面的系统研究，本文填补了这方面的研究空白，建立了该蒙药的薄层色谱鉴别方法，这对提高该蒙药的质量标准和质量控制水平具有重要意义。

1 仪器、试剂与材料

SLD-1 型薄层色谱摄像仪(天津思利达色谱技术开发公司)，TD-Ⅱ型全自动薄层铺板器(上海科哲生化科技有限公司)，ZDZ-6型三用紫外分析仪(上海安亭电子仪器厂)，薄层展开槽(上海信谊仪器厂)，薄层色谱点样管(kimble，3μL、5μL)，预制硅胶G薄层板1(烟台市化学工业研究所，批号140514，规格200mm×50mm，200mm×100mm，200mm×200mm)，预制硅胶G薄层板2(青岛硕远化工有限责任公司，批号140210，规格200mm×100mm，200mm×200mm)，自制硅胶G薄层板(硅胶为青岛海洋化工集团公司，规格200mm×100mm，200mm×200mm)；甲苯、环己烷、乙酸乙酯、甲酸、甲醇、三氯化铝均为分析纯。

对照药材齿缘草采自内蒙古呼和浩特市武川县大青山(该产地齿缘草作为对照药材正在中国食品药品检定研究院审批中)。实验用样品药材齿缘草分别采自内蒙古呼和浩特市和林格尔县、内蒙古包头市赵长城地区、内蒙古包头市固阳县、内蒙古乌海市海南区、内蒙古赤峰市克什克腾旗和宁夏银川市贺兰山地区。所采集的药材均经内蒙古医科大学药用植物学教授鞠爱华和蒙药学教授那生桑鉴定为石生齿缘草。

2 方法与结果

2.1 薄层色谱鉴别方法 :取本品粉末2g，加60%甲醇50mL，加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水30mL使溶解，用石油醚(30～60℃)振摇提取2次，每次20mL，弃去石油醚液，水液加盐酸5mL，加热回流1h，冷却后用乙醚振摇提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗涤，弃去水洗液，乙醚液挥干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取齿缘草对照药材同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2015版通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3 %三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点。

2.2 方法学考察

2.2.1 重复性试验: 取同一批次的对照药材，按2.1项下薄层色谱鉴别方法操作，重复做3次，结果显示效果良好，见图1。

2.2.2 不同年份对照药材试验: 分别取不同年份的对照药材，按2.1项下薄层色谱鉴别方法操作，结果显示不同年份的样品薄层结果一致，见图2。

2.2.3 样品鉴别试验: 取对照药材和不同产地的样品，按2.1项下薄层色谱鉴别方法操作，结果显示不同产地的样品薄层结果与对照药材一致，见图3。

2.2.4 不同厂家薄层板的薄层色谱试验:取对照药材、不同产地的样品和3种不同厂家的薄层板，按2.1项下薄层色谱鉴别方法操作，考察不同厂家薄层板的薄层色谱。试验表明，不同厂家的薄层板对实验结果无影响，结果见图4。

2.2.5 不同温度的薄层色谱试验:取对照药材和不同产地的样品，在室温25℃和10℃下，按2.1项下薄层色谱鉴别方法操作，考察不同温度的薄层色谱，结果表明温度对实验结果无显著影响，见图5。

2.2.6 不同湿度的薄层色谱试验:取对照药材和不同产地的样品，在湿度75%和湿度20%下，按2.1项下薄层色谱鉴别方法操作，考察不同湿度的薄层色谱，结果表明湿度对实验结果无显著影响，见图6。

3 讨论

3.1 供试品溶液制备方法的选择: 方法1，取对照药材粉末2g，加60%甲醇50mL，加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水30mL使溶解，用石油醚(30～60℃)振摇提取2次，每次20mL，弃去石油醚液，水液加盐酸5mL，加热回流1h，冷却后用乙醚振摇提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗涤，弃去水洗液，乙醚液挥干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。

方法2，取对照药材粉末2g，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)适量，加热回流至提取液无色，弃去石油醚液，药渣挥干石油醚，加甲醇-水-盐酸((12∶7∶1))混合溶液50mL，回流1h，滤过，滤液蒸至近干，加水30mL使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗涤，弃去水洗液，乙醚液挥干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。

方法3，取对照药材粉末2g，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)适量，加热回流至提取液无色，弃去石油醚液，药渣挥干石油醚，加甲醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液浓缩至约1mL，作为供试品溶液。

吸取上述供试品溶液各5μL，点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3 %三氯化铝乙醇溶液，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果见图7，方法1为最佳，故采用该法为供试品溶液制备方法。

3.2 展开系统的选择:取对照药材粉末2g，按2.1项下薄层色谱鉴别方法制备供试品溶液和对照药材溶液，参考《中国药典》2010年版一部木贼、地棉草、翻白草项下薄层鉴别展开系统[5]，选用3种展开系统展开，分别为展开系统1：环己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)、展开系统2：甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2∶1)、展开系统3：甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)，结果见图8，经比较展开系统2较好。

考虑到2的最低荧光点的Rf值较小，不在规定的0.2～0.8 之间，故将展开系统调整为甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)，取得了较好的结果，结果见图9，故最后选择的展开系统为甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)。

[1]内蒙古植物志编辑委员会. 内蒙古植物志(第二版)[M]. 第四卷.呼和浩特: 内蒙古人民出版社, 2000,170.

[2] 朱亚民. 内蒙古植物药志(第二卷)[M]. 呼和浩特: 内蒙古人民出版社, 2000,417.

[3] 白清云. 中国医学百科全书蒙医学[M]. 上海:上海科学技术出版社, 1992,212.

[4] 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中华人民共和国卫生部药品标准(蒙药分册)[S]. 1998,29.

[5] 中华人民共和国卫生部药典委员会. 中国药典[S].一部. 中国中医药科技出版社，2010，63, 127, 383.

2015年11月14日收稿

TLC Identification of Mongolian Medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge

Chang xiaowei Ba junjie

School of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010110, China

Objective: To establish the method for TLC identification of mongolian medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge. Methods: Thin layer chromatography (TLC). Results: The same color fluorescent spots are displayed in chromatography of test products and the control product. Conclusion: The method for TLC identification of mongolian medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge has been established in order to improve the quality standard of the Mongolian medicine.

Mongolia medicine; Eritrichium rupestre (Pall.) Bungeo; TLC identification

△国家药典委员会药品标准提高项目( 453)

常霄巍(1990 -)，男，汉族，辽宁沈阳人，硕士研究生，主要从事有机药物合成研究。

R291.2

B

1006-6810(2016)10-0051-04

*通讯作者：巴俊杰(1957 -)，男，蒙古族，内蒙古通辽人，教授，硕士研究生导师，主要从事蒙药质量控制和有机药物合成研究。