大株红景天化学成分的研究

赵娜，赵国华，王仁久，曹明光，吴海波，柴雅晴，唐生安，段宏泉，3

（1.天津医科大学药学院，天津市临床药物关键技术重点实验室，天津300070;2.通化玉圣药业股份有限公司，通化134000；3.天津医科大学基础医学研究中心，天津 300070）

论著

大株红景天化学成分的研究

赵娜1，赵国华2，王仁久2，曹明光2，吴海波2，柴雅晴1，唐生安1，段宏泉1，3

（1.天津医科大学药学院，天津市临床药物关键技术重点实验室，天津300070;2.通化玉圣药业股份有限公司，通化134000；3.天津医科大学基础医学研究中心，天津 300070）

目的：对四川产大株红景天的化学成分进行分离鉴定。方法：采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和HPLC制备色谱等方法分离纯化得到单体化合物，采用有机波谱方法鉴定化合物结构。结果：从大株红景天萃取物中分离得到10个化合物，分别鉴定为lotaustralin（1）、仲丁基葡萄糖苷（2）、没食子酸（3）、3-甲氧基没食子酸（4）、没食子酸甲酯（5）、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸（6）、苯甲醇（7）、阿魏酸（8）、对羟基肉桂酸（9）、棉黄素-7-O-（3″-O-β-D-葡萄糖基）-α-L-鼠李糖苷（10）。结论：化合物2、6为首次从该属植物中分离得到，化合物1、5、8、9、10为首次从该种植物中分离得到。

红景天属；大株红景天；化学成分；结构鉴定

大株红景天（Rhodiola wallichiana）为景天科红景天属植物，全名大株粗茎红景天[1]，2000多年前的《神农本草经》和唐代的《千金翼方》及明代的《本草纲目》均有记载。大株红景天分布于西藏、四川及云南等地。红景天享有“高原人参”、“北极玫瑰”之美称，具有适应原作用，包括保护心脏、神经，抗疲劳，抗衰老，抗辐射，调节生理机能，延长寿命，被广泛应用于医疗、保健品、化妆品等领域[2-4]。红景天中含糖苷类、香豆素类、黄酮类、挥发油、生物碱、甾体、苯酚类化合物以及有机酸（没食子酸、草酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸）和微量无机元素等[5-6]。本文以天然药物化学研究手段，对大株红景天进行了提取分离，采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和制备型HPLC等色谱方法分离纯化得到单体化合物，采用1D NMR、2D NMR、MS等有机波谱方法以及与文献报道数据进行对比鉴定化合物结构。

1 仪器与方法

1.1 仪器、试剂及材料 核磁共振仪：Bruker AV 400 instrument（TMS内标）；液质联用色谱仪：Alliance2695，Quattro Micro TM ESI(Waters)；半制备高效液相色谱仪：日本分光公司(JASCO)，PU-2089（泵），RI-2031和UV-2075（检测器）；制备HPLC色谱柱：C-18反相柱：YMC-Pack ODS-A SH-343-5（20 mm×250 mm），GPC（凝胶渗透色谱柱）：Shodex, Asahipak GS-20G（20 mm×500 mm×2）；凝胶柱色谱：Toyopearl HW-40C(Tosoh)；氘代试剂（ALDRICH公司）；柱色谱和薄层色谱用硅胶均系青岛海洋化工厂生产，所用试剂均系分析纯。

本文所用药材大株红景天[Rhodiola wallichiana（HK）S H Fu var Cholaensis（Praeg）S H Fu]于2012年9月采自四川省阿坝州，由天津医科大学药学院生药学教研室周晔教授鉴定，标本（D20130610）存放于天津医科大学药学院。

1.2 提取分离 取自然干燥的大株红景天根茎14 kg，粉碎后用75%的乙醇回流提取3次，每次2 h。提取液减压浓缩，得浸膏1 530.3 g，浸膏加水混悬后，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.5 L，合并萃取液，减压浓缩得石油醚提取物26.5 g，乙酸乙酯提取物175.7 g，正丁醇提取物281.5 g。

取乙酸乙酯萃取物（175.7 g）经硅胶柱色谱（800 g,300～400目）分离，石油醚-乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱（石油醚-乙酸乙酯，6∶1，4∶1，3∶1，2∶1，含5%甲醇的乙酸乙酯，10%甲醇的乙酸乙酯，20%甲醇的乙酸乙酯，甲醇），TLC检测合并类似部分，得到8个组分（Fr.1～8）。Fr.4经凝胶Toyopearl HW-40C柱色谱（35×1 200 mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，2∶1）洗脱分离，得到5个组分（Fr.4.1～4.5），组分Fr.4.5经制备HPLC（ODS-A，5 μm，20×250 mm，甲醇-水，v/v，7:3)纯化得到化合物4(33.6 mg)。Fr.5经硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-甲醇梯度洗脱（v/v,97:3，95∶5，9∶1，85∶15+1‰冰醋酸）得到6个组分（Fr.5.1～5.6），其中 Fr.5.3经凝胶 Toyopearl HW-40C柱色谱（35×1 200 mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，2∶1）洗脱分离，得到5个组分（Fr.5.3.1～5.3.5）。Fr.5.3.3进一步以制备HPLC（ODS-A，5 μm，20×250 mm，甲醇-水，v/v，6∶4）纯化得到化合物6（49.5 mg）和化合物8（158.5 mg）。Fr.5.3.4经凝胶渗透HPLC（GPC，20×500 mm×2，甲醇）纯化，得到化合物9（24.2mg）。Fr.6经凝胶ToyopearlHW-40C柱色谱（35×1200mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，2∶1）洗脱分离，得到3个组分（Fr.6.1～6.3），组分Fr.6.1进一步以凝胶渗透HPLC（GPC，20×500 mm×2，甲醇）纯化，得到化合物2（30.4mg）。组分Fr.6.3经制备HPLC（ODS-A,5 μm, 20×250 mm，甲醇-水，v/v，7∶3）纯化得到化合物7（27.2 mg）。组分Fr.7经硅胶柱色谱分离，二氯甲烷-甲醇（v/v，9∶1，85∶15，7∶3，6∶4）梯度洗脱，分离得到7个组分（Fr.7.1～7.7），其中Fr.7.3经凝胶Toyopearl HW-40C柱色谱（35×1200mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，1∶1）分离得到7个组分（Fr.7.3.1～7.3.7）。Fr.7.3.3进一步以制备HPLC（ODS-A，5 μm，20×250 mm，甲醇-水，v/v，3∶7）分离得化合物1（27.8 mg）。Fr. 7.3.6进一步经凝胶 Toyopearl HW-40C柱色谱（35×1 200 mm，二氯甲烷-甲醇，v/v，1∶1）分离得到化合物3（150.5 mg）。

取正丁醇萃取物（281.5 g）经硅胶柱色谱（800 g，300～400目）分离，二氯甲烷-甲醇梯度洗脱（95∶5， 9∶1，85∶15，8∶2），二氯甲烷-甲醇-水（75∶25∶0.2，65∶35∶0.3）和甲醇梯度洗脱，所得组分经聚酰胺色谱柱，凝胶渗透柱色谱Toyopeal HW-40及制备高效液相色谱柱分离纯化，分别得到化合物5（20.5mg）和10（25.5mg）。

2 结果

从大株红景天R.wallichiana提取物中分离得到10个化合物，见图1。

图1 从大株红景天中分离得到的化合物Fig 1 Compounds 1～10 isolated from R.wallichiana

2.1 化合物1 lotaustralin，为白色固体粉末。ESIMS m/z:262[M+H]+。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：1.90（1H，m，H-3a），1.81（1H，m，H-3b），0.98（3H，t，J=7.6 Hz，H-4），1.55（3H，s，J=7.6 Hz，H-5），4.77（1H，J=7.8 Hz，H-1′），2.9-3.7（6H，糖）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：120.6（C-1），75.5（C-2），32.8（C-3），8.4（C-4），23.9（C-5），99.3（C-1′），73.1（C-2′），76.9（C-3′），69.7（C-4′），76.9（C-5′），60.8（C-6′）。

2.2 化合物2 仲丁基葡萄糖苷，为白色固体粉末。ESI-MS m/z：237［M+H］+。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：0.87（3H，J=7.4Hz，H-4），1.13（3H，J=6.0 Hz，H-1），1.44（2H，m，H-3），3.65（1H，H-2），4.16（1H，J=7.6 Hz，H-1′）。13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：21.0（C-1），9.3（C-4），28.5（C-3），75.8（C-2），102.3（C-1′），70.1（C-2′），76.8（C-3′），73.6（C-4′），76.6（C-5′），61.1（C-6′）。

2.3 化合物3 没食子酸，为白色固体粉末。ESIMS m/z:171[M+H］+。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：7.05（2H，s，H-2，6）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：123.6（C-1），110.3（C-2，6），146.3（C－3，5），139．0（C－4），71．6（－COOH）。

2.4 化合物4 3-甲氧基没食子酸，为白色固体粉末。ESI－MS m/z：185［M＋H］＋。1H－NMR（DMSO－d6，400 MHz）δ：7．02（1H，d，J＝2．4 Hz），7．07（1H，d，J＝2．4 Hz），3．7（3H，s，－OCH3）；13C－NMR（CD3OD，100 MHz）δ：123．7（C－1），104．8（C－2），147．7（C－3），138．3（C－4），145．2（C－5），111．1（C－6），55．7（－OCH3），168．9（－COOH）。

2.5 化合物5 没食子酸甲酯，为白色固体粉末。ESI-MS m/z:185[M+H]+。1H-NMR（DMSO－d6，400 MHz）δ：6．95（2H，s，H－2，6），3．75（3H，s，－OCH3）；13C－NMR（DMSO－d6，100 MHz）δ：119．2（C－1），108．5（C－2，6），145．5（C－3，5），138．4（C－4），166．3（－COOH）。

2.6 化合物6 3-羟基-4-甲氧基苯甲酸,为白色固体粉末。ESI－MS m/z：169［M＋H］＋。1H－NMR（DMSO－d6，400 MHz）δ：7．45（1H，dd，J＝8．4，2．0 Hz，H－6），7．44（1H，d，J＝2．0 Hz，H－2），6．85（1H，d，J＝8．4 Hz，H－5），3．81（3H，s，OCH3）；13C－NMR（DMSO－d6，100 MHz）δ：121．6（C－1），115．0（C－2），147．2（C－3），151．0（C－4），112．6（C－5），123．4（C－6），55．5（－OCH3），167．2（－COOH）。

2.7 化合物7 苯甲醇，为白色固体粉末。ESI－MS m/z：109［M＋H］＋。1H－NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7．33（2H，d，J＝8．4 Hz，H－2，6），7．30（2H，d，J＝8．4 Hz，H－3，5），7．22（1H，m，H－4），4．59（2H，s）；13C－NMR（CD3OD，100 MHz）δ：142．7（C－1），129．4（C－2，6），128．0（C－3，5），128．3（C－4），65．2（C－7）。

2.8 化合物8 阿魏酸，为白色固体粉末。ESI－MS m/z 195［M＋H］＋，1H-NMR（DMSO－d6，400 MHz），7．49（1H，d，J＝16．0 Hz，H－7），7．28（1H，br s，H－2），7．08（1H，br d，J＝8．4 Hz，H－6），6．79（1H，d，J＝8．4 Hz，H－5），6．37（1H，d，J＝16．0 Hz，H－8），3．82（3H，s，OCH3）；13C－NMR（DMSO－d6，100 MHz）δ：115．6（C－1），111．1（C－2），147．9（C－3），149．0（C－4），125．7（C－5），122．8（C－6），144．5（C－7），115．5（C－8），55．6（－OCH3），168．0（－COOH）。

2.9 化合物9 对羟基肉桂酸，为白色固体粉末。ESI－MS m/z 165［M＋H］＋，1H-NMR（DMSO－d6，400 MHz），7．44（2H，d，J＝8．8 Hz，H－2，6），7．36（1H，d，J＝16．0 Hz，H－7），6．78（2H，d，J＝8．8 Hz，H－3，5），6．27（1H，d，J＝16．0 Hz，H－8）；13C－NMR（DMSO－d6，100MHz）δ：125．7（C－1），129．5（C－2，6），118．5（C－3，5），159．2（C－4），141．7（C－7），115．7（C－8），169．0（C－9）。

2.10 化合物10 棉黄素－7－O－（3″－O－β－D－葡萄糖基）－α－L－鼠李糖苷，为黄色固体粉末。ESI－MSm/z：625[M－H]－。1H－NMR（DMSO－d6，400 MHz）δ：6．53（1H，s，H－6），6．85（1H，d，J＝8．8 Hz，H－3′），7．72（1H，d，J＝2．0 Hz，H－6′），4．44（1H，d，J＝7．6 Hz，葡萄糖端基氢），5．47（1H，br s，鼠李糖端基氢），1．07（3H，d，J＝7．6 Hz，鼠李糖甲基），3．56－4．12（4H，鼠李糖），3．03－3．60（6H，葡萄糖）；13C－NMR（DMSO－d6，100 MHz）δ：147．4（C－2），135．9（C－3），176．3（C－4），151．5（C－5），98．3（C－6），149．5（C－7），127．2（C－8），144．4（C－9），104．7（C－10），122．1（C－1′），120．3（C－2′），115．5（C－3′），147．9（C－4′），145．0（C－5′），115．5（C－6′），99．2（C－1″），68．9（C－2″），80．8（C－3″），70．4（C－4″），69．4（C－5″），17．8（C－6″），104．4（C－1‴），74．0（C－2‴），76．8（C－3‴），69．8（C－4‴），76．2（C－5‴），60．9（C－6‴）。

3 讨论

本文运用硅胶、凝胶柱色谱及半制备液相色谱等方法，对四川产地的大株红景天进行化学成分提取、分离和纯化，并通过核磁共振波谱、质谱等方法，鉴定化合物的结构。结果表明，从大株红景天中分离得到10个化合物，1H-NMR和13C-NMR数据与文献报道一致，依次鉴定为lotaustralin（1）[7]、丁基葡萄糖苷（2）[8]、没食子酸（3）[9]、3-甲氧基没食子酸（4）[10]、没食子酸甲酯（5）[11]、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸（6）[12]、苯甲醇（7）[13]、阿魏酸（8）[14]、对羟基肉桂酸（9）[15]、棉黄素-7-O-（3″-O-β-D-葡萄糖基)-α-L-鼠李糖苷（10）[16]。其中化合物2、6为首次从该属植物中分离得到，化合物1、5、8、9、10为首次从该种植物中分离得到。目前国内外对红景天的化学成分、药理及临床的研究都有一定进展，研究发现红景天其有效成分在抗肿瘤、抗缺氧、增强记忆力、抗衰老、抗辐射等方面有作用，且疗效显著、不良反应少，具有很大的药用价值。该研究进一步丰富了红景天的化学成分研究内容，其药理作用还有待深入研究。

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（2015－09－15收稿）

Studies on chemical constituents from Rhodiola wallichiana

ZHAO Na1,ZHAO Guo-hua2,WANG Ren-jiu2,CAO Ming-guang2,WU Hai-bo2,CHAI Ya-qing1,TANG Sheng-an1,DUAN Hong-quan1
（1.School of Pharmacy,Tianjin Medical University,Tianjin Key Laboratory on Technologies Enabling Development of Clinical Therapeutics and Diagnostics(Theranostics),Tianjin 300070,China;2.Tonghua Yusheng Medicine Co.,Ltd.Tonghua 134000,China; 3.Research Center of Basic Medical Sciences,Tianjin Medical University,Tianjin 300070,China）

Objective：To study the chemical constituents from Rhodiola wallichiana.Methods：Chemical constituents were isolated and purified by repeated column chromatography(silica gel,Toyopearl HW-40C and preparative HPLC).Their structures were elucidated on the basis of spectral data analysis.Results：Ten compounds(1-10)were isolated and their structures were identified by comparing their spectral data with literature values as follows:lotaustralin(1),sec-butyl-O-β-D-glycosidase(2),trihydroxybenzoic acid(3),3-methoxytrihydroxybenzoic acid(4),methyl gallate(5),3-hydroxy-4-methoxy-benzoic acid(6),benzyl alcohol(7),ferulic acid(8),4-Hydroxycinnamic acid(9),gossypetin-7-O-(3″-O-β-D-glucosyl)-α-L-rhamnoside(10).Conclusion：Compound 2 and 6 are isolated from the genus Rhodiola for the first time,compound 1,5,8,9 and 10 are isolated from this plant for the first time.

Rhodiola;Rhodiola wallichiana;chemical constituents;structure identification

R9

A

1006－8147（2016）02-0119-03

赵娜(1990-)，女，硕士在读，研究方向：天然活性化学成分研究；通信作者：段宏泉，E-mail:duanhq@tijmu.edu.cn。