试析脑安片含量测定方法的改进

杨丽红

哈药集团三精制药四厂有限公司

试析脑安片含量测定方法的改进

杨丽红

哈药集团三精制药四厂有限公司

目的：实验人员对暖安片中所含有的人参皂苷Re的含量测定方式。方法：提取适量的样品，通过高效液相色谱法来对人参皂苷Re所具有的含量进行测定，流动相主要采取乙睛以及水的形式进行梯度洗脱，流速大概保持在1ml/min的范围内，柱温控制在35℃左右，所检测的波长为203nm。结果：在脑安片中所含有的人参皂苷Re的范围在96.96¯484.8ng/μl左右，保持良好的线性形势，所得到的方程式是Y=3.72651X+0.73355，r=0.99999；所获得的回收率已经达到99.5%（RSD0.72%），所产生的重复性RSD在1.28%的范围。结论：实验人员使用该测量手段有着显著的效果。

脑安片；人参皂苷Re；含量测定

脑安片有着诸多的功效，例如起到活血化瘀的作用，并可以达到益气通络的效果等，对脑血栓的形式、血瘀病人较为适合。该药主要有三七、人参等多种名贵药材构成的，脑安片基本标准使用薄层扫描法来对该药中所含有的人身皂苷Re的含量进行检测。由于该测定方式会在某种程度上受到不同因素所产生的干扰，其所得到的测定结果没有达到精准的目的，而且操作流程具有一定的复杂性，在实验中所使用的溶液会对环境带来影响，与此同时也在某种程度上损害了实验人员的身心健康。所以，实验人员通过使用RP-HPLC来对人身皂苷Re所具有的含量进行检测，通过将该方式进行改造以后，有着显著的效果，为控制产品质量带来益处。

1、仪器和试药

美国 Aislent1200型高效液相色谱仪。Aislent色谱工作站 Rve丑.04.02版。日本岛津Uv-2550型紫外分光光度计。HP一01溶剂过滤器(天津市恒奥科技发展有限公司)。KQ一 500DE超声仪(昆山)。AG285电子分析天平(梅特勒-托利多上海有限公司)。人参皂普Re对照品(中国药品生物制品检定所,批号0754一9810,供含量检测用)。脑安片(哈药集团三精制药四厂,批号:1304001、1304002、1304003)。水为超纯水,乙睛为色谱纯,其它试剂为分析纯。

2、溶液的制备

2.1 对照品溶液的制备

精密称取人参皂普Re对照品12.12mg置25ml棕色容量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每 1ml中含人参皂普Re0.4848mg)。

2.2 供试品溶液的制备

取本品20片,研细,精密称取约3.59,置索氏提取器中,加乙醚适量,回流提取至提取液无色,弃去乙醚液,药渣挥去乙醚后,加甲醇适量,回流提取至提取液无色提取液回收甲醇至干,残渣用水 40ml,分次转移至分液漏斗中,用水饱和的正丁醇振摇提取五次,(30ml、30ml、20ml、20ml、10ml),合并正丁醇液,用氨试液洗涤三次,每次50ml,弃去氨试液,正丁醇层用正丁醇饱和的水30ml洗涤,弃去水液,取正丁醇液,水浴蒸干,残渣加甲醇使溶解,并转移至 5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。

3、测定波长的选择

实验人员依据溶液的需要，提取适量的溶液做好相应的紫外扫描，当人身皂苷Re处于23mm的状态下会呈现出较大的吸收峰，所以选择203nm的作为测定波长。

4、色谱条件

色谱柱:Alltima(4.6mmx250mm,5μm)；流动相:以乙睛为流动相A。以水为流动相B,按表1的规定进行梯度洗脱；流速:1ml·min,;检测波长:203nm;柱温:35℃。

表1 梯度洗脱表

5、线性关系考察

精密称取人参皂普Re对照品适量,加甲醇制成每lml含人参皂普Re05mg的溶液,分别取对照品溶液2川、4川、6川、8川、10川注人液相色谱仪,记录色谱图,测定其峰面积积分值,计算回归方程为Y=3.72651X+073355,仁 o,9999。试验结果表明进样量在 96,6一484.8ngz林l间,与峰面积呈良好的线性关系。(见表2)

表2 不同浓度的峰面积积分值

6、精密度试验

实验人员所适量的溶液10μl，做好连续进样六次，从而对峰面积所得到的相关数值进行测量，可得到RSD=0.89%。

7、稳定实验

实验人员取出一支相同的饰品溶液，并在每隔 3个小时左右的时候进样一次，一共要反复进行五次，所得到的结果为 RSD=2.25%的范围内，并且饰品溶液在大概12小时的时候还具有良好的稳定性能。

8、重复性试验

依据样品中的含量对相关批号的样品进行了详细的检测，一共测定的数目有5份，并且每一份中的含量大概在0.21mg/片，所得到的 RSD=1.28%，从实验结果可以看出实验人员采取该方式能够实现重现性的目的。

9、回收率试验

实验人员取脑安片中所存在人身皂苷Re含量的样品进行认真的研细，并采取精密称量的方式称取3.5g的量，一共要准备5份留作备用。除此之外，实验人员还需要利用精密的手段称取5ml的溶液，采取科学的手段进行提取，然后进行测量，并对该含量中所得到的回收率进行计算，所得到的结果请看表3。

表3 回收率试验结果

10、样品测定

实验人员将对照品以及供试品中的溶液采取精密吸收的方式进行了测量，并规定使用10μl的含量，并添加液相色谱仪进行详细的检测，并进行合理的计算，对这 3批样品做好详细的检测，所得到的结果请看表4。

表4 样品测定结果

11、讨论

实验人员通过将高效液相色谱法以及相应的薄层色谱法进行了对比，有着诸多的优势，如较高的灵敏度、操作方式简单等，不仅可以在某种程度上控制产品的整体质量，而且还能够进一步减少检验时间，从而实现高效率的生产。

总而言之，通过以上内容的论述可以得知：实验人员采取高效液相色谱法有着显著的效果，并进一步将产生的整体生产质量加以提升，大大推动了我国医药事业的进步，为我国的临床提供了重要的参考依据。

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R567.5+1

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1672-5018（2016）12-034-01