商洛不同产地连翘有效成分含量与土壤因子的相关性研究

雷立 任宏力 李惠民 高吉仁 何西珍

摘 要：采用HPLC法测定了商洛五县区14个样方点的连翘药材中连翘苷、连翘酯苷A含量，采用理化分析法进行土壤因子的测定，并研究了连翘有效成分含量与土壤因子的关系。结果显示：有机质、速效钾与连翘苷的含量呈极显著正相关，速效钾与连翘酯苷A的含量呈显著正相关。土壤中丰富的有机质、速效钾供应会促进连翘药材体内连翘苷的形成和积累，但过多的有机质和碱解氮不利于连翘酯苷A的积累。近碱性（平均pH值为7.236）土壤条件会促进连翘药材中连翘苷的积累而抑制连翘酯苷A的积累。因此，无论是选择适宜产地或是实施科学施肥，都应重视和考虑有机质、速效钾、碱解氮及土壤pH值对连翘药材质量的影响。

关键词：连翘苷；连翘酯苷A；HPLC；土壤因子；相关分析

中图分类号：S567.1+9文献标识号：A文章编号：1001-4942（2016）05-0055-04

Abstract The contents of forsythin and forsythiaside A in Fructus Forsythiae from 14 sampling points of five counties in Shangluo were tested using HPLC， additionally， the edaphic factors were analyzed by physical and chemical analysis method to get the relationship between the active ingredient contents of Fructus Forsythiae and edaphic factors. The results indicated that the content of forsythin showed highly significant correlations with organic matter and available potassium， and the content of forsythiaside A was significantly correlated with available potassium. The abundant organic matter and available potassium contents in the soil could promote the formation and accumulation of forsythin in Fructus Forsythiae， while redundant organic matter and available nitrogen contents were not good for the accumulation of forsythiaside A. The nearly alkaline soil condition with the average pH value of 7.236 could promote the accumulation of forsythin but prevent that of forsythiaside A. Therefore， whether selecting suitable habitat or scientific fertilization， we all should pay attentions to the effects of organic matter， available potassium， available nitrogen and soil pH value on the quality of Fructus Forsythiae.

Key words Forsythin； Forsythoside A； HPLC； Soil factors； Correlation analysis

连翘为木犀科连翘属植物连翘[Forsythia suspensa （Thunb.） Vahl]的干燥果实，因其采收季节不同分为青翘和老翘。青翘为秋季果实初熟呈绿色时采收所得，老翘为秋季果实完全成熟后采收而得。连翘为中医最常用的中药材之一，历来被视为疮家要药[1]，性味苦，微寒，归心、肺、脾[2]，具有清热解毒、散结消肿之功效，用于风热感冒、温病初起、温热入营、热淋尿闭[3]、丹毒、斑疹等的治疗[4，5]。连翘有效成分包括：连翘酚、黄酮类、三萜类、连翘酯苷、连翘苷、挥发油类、熊果酸等[6，7]。已有研究发现，不同产地连翘中有效成分含量存在较为明显的差异，这与不同产地所特有的生态条件密切相关[8～10]。

植物生长发育所需营养物质和水分大多是从根系土壤中获得，植物生长与土壤因子关系密切，土壤理化性状可直接影响或决定植物吸收营养物质的种类及数量，进而影响植物的生长发育、生物量、经济产量及次生代谢物的种类、数量等，所以研究药用植物的有效成分含量时有必要研究它们赖以生存的土壤理化性状[11]。目前，关于不同产地连翘有效成分含量比较的研究报道较多，但未涉及土壤理化性状方面的研究。因此，笔者通过研究商洛五县区不同样方点的连翘主要有效成分与土壤因子的关系，以便有效地选择土壤类型来控制连翘质量，为实施连翘药材的质量控制和规范化种植提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

供试材料分别采自商洛市连翘五个主产区（商州区、洛南县、丹凤县、商南县、山阳县）的14个样方点。2012年7月采集药材样品，经西北农林科技大学生科院梁宗锁教授鉴定为正品连翘。将所采连翘果实蒸熟、晒干，得“青翘”备用。

土壤样品采用混合土样采集法，随机多点采集连翘样方地0～20 cm土壤，各点取1 kg土壤样品，带回实验室风干、磨细，供速效养分测定的过18目筛子（<1.00 mm），供有机质、碱解氮测定的过60目筛子（<0.25 mm），备用。

1.2 主要仪器与试剂

VAP-45全自动凯式定氮蒸馏仪（德国Gerhaedf公司）；250 mL硬质凯式管；数显恒温水浴锅（金坛市科析仪器有限公司，HH-4型）；电热恒温鼓风真空干燥箱（上海森信实验仪器有限公司，DGG-9203AD型）；LC-10AT岛津高效液相色谱仪，SPD-10A紫外-可见检测器，浙江大学N2000色谱工作站；高速中药粉碎机（青州市精诚机械有限公司，WK-1000A型）；万分之一电子天平（SARTOO-RIUS公司，AUW220型）；超声波清洗仪器（昆山市超声仪器有限公司，KQ5200B型）；连翘苷、连翘酯苷A标准品（中国药品生物制品鉴定所），甲醇、乙腈等化学试剂均为色谱纯；纯净水。

1.3 方法

1.3.1 测定样品溶液制备 精密称取采自不同样方地的连翘果实干燥粉末（过五号筛）各1.0000 g至50 mL锥形瓶中，加70%甲醇20 mL，浸泡过夜，超声波提取30 min，摇匀，0.45 μm微孔膜滤过，静置，取上清液移入10 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，待测。

1.3.2 土壤理化性状分析 土壤样品理化性状分析方法采用鲍士旦[12]的方法；土壤pH值测定采用电位测定法。所有项目均测定3次，取其平均值作为测定结果。

1.3.3 连翘有效成分含量测定 连翘有效成分含量测定采用参考文献[3]的方法并进行适当调整。色谱条件：C18色谱柱（10 μm，250 mm×46 mm）；流动相：乙腈∶水=30∶70；检测波长：277 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：室温；进样量20 μL。

1.4 数据处理

运用Microsoft Excel 2007和SPSS Statistics 18.0软件，采用双变量相关性分析中的Pearson法，对每个样方点土壤中有机质、碱解氮、速效钾与药材中主要成分连翘酯苷A、连翘苷含量进行相关性分析。

2 结果与分析

2.1 连翘有效成分含量

由表1可见，连翘苷的含量以山阳石头梁阳坡的连翘药材为最高（0.895%），山阳赵川阳坡样品次之（0.856%），洛南灵口阳坡样品最低（0.173%）；连翘酯苷A的含量以丹凤峦庄阴坡样品含量最高（10.687%），其次是洛南灵口阴坡样品（10.180%），山阳石头梁阴坡样品连翘酯苷A含量最低（0.624%）。

2.2 土壤理化性状与连翘有效成分含量的相关性分析

由表2、表3可知，土壤中有机质与速效钾之间存在极显著相关性，这是野生连翘生境土壤的一个重要特征。有机质、速效钾与连翘苷含量呈极显著正相关（Pearson 相关系数分别为0.934、0.772），有利于促进连翘药材体内连翘苷的积累；有机质与连翘酯苷A含量呈不显著负相关（Pearson 相关系数为-0.469），速效钾与连翘酯苷A含量呈显著正相关（Pearson 相关系数为0.501）；碱解氮与连翘苷的积累呈一定的正相关（Pearson 相关系数为0.446），与连翘酯苷A的积累则呈不显著的负相关（Pearson 相关系数为-0.301）。土壤pH值显示近碱性（pH平均为7.236），与连翘苷的积累呈不显著正相关（Pearson 相关系数为0.492），与连翘酯苷A呈极显著负相关（Pearson 相关系数为-0.630）。说明近碱性土壤条件会促进连翘药材中连翘苷的积累而抑制连翘酯苷A的积累。土壤中有机质、碱解氮、速效钾含量增高会促进连翘药材中连翘苷的形成和积累，速效钾含量增高会促进连翘药材中连翘酯苷A的形成和积累，而有机质、碱解氮含量增高反而会抑制连翘药材中连翘酯苷A的形成与积累。

3 结论与讨论

中药材的有效成分含量与药材品种、遗传因素等多种因素有关，而且受生态环境、气候、土壤等外界因子的影响较大[13]。本研究结果表明，不同土壤肥力条件对连翘苷、连翘酯苷A的积累有一定影响。有机质、速效钾有利于促进连翘苷的积累，速效钾也有利于促进连翘酯苷A的积累，而过多的有机质和碱解氮反而不利于连翘酯苷A的积累。近碱性土壤条件会促进连翘药材中连翘苷的积累而抑制连翘酯苷A的积累。

中药材有效成分大多为植物次生代谢产物，在植物的生长发育过程和抵御外界不良环境因素如干旱、盐胁迫等方面发挥重要作用[14]。连翘药材有效成分种类很多，其它有效成分与土壤因子之间的相关性及多种有效化学成分之间的比例关系尚待进一步研究。

参 考 文 献：

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