对苯在异维A酸产品中残留的研究和检测

刘武均

摘 要：目的：建立气相色谱法（GC）测定异维A产品中虽然没有使用但有可能引入的有机溶剂苯的残留，并进行分析方法验证。方法：采用DB-624（30m×0.53mm×3.0μm）为色谱柱，顶空自动进样，程序升温，流速5mL/min，分流比：1∶1。结果：气相色谱法（GC）的专属性、系统适应性、检测限以及加入试验均符合的要求；苯在异维A酸产品中的残留检测结果低于检测限。结论：气相色谱法（GC）测定A产品中残留溶剂方法方法是可性的和准确的；异维A酸产品的溶剂残留是符合国内国际要求，可以确保用药安全。

关键词：异维A产品；残留溶剂；气相色谱法（GC）

中图分类号：O648 文献标识码：A

1 材料

1.1 仪器

气相色谱仪Agilent 6890N，包括自动顶空进样器Agilent 7694，检测器和Agilent色谱工作站XP205电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

1.2 药品与试剂

异维A酸样品（重庆华邦制药有限公司，批号：IST-081201，IST-081202，和IST-081203.苯（分析纯试剂，批号：20071220），N，N-二甲基乙酰胺（色谱纯，批号：20080821）

2 分析方法

2.1 系统条件

色谱柱：DB-624（30m×0.53mm ×3.0μm）

柱温：在40℃保持5分钟，然后以20℃/min的速度升温到180℃，然后在保温5.0分钟。

进样口温度：200℃

检测器温度：250℃

流速：5mL/min

分流比：1∶1

载气：氮气，流速3.0mL/min

燃烧气：氢气，30mL/min

助燃气：空气，300mL/min

Agilent 7694顶空自动进样。

温度：瓶温80℃，环温150℃，传输线温度130℃。

时间：GC循环时间0.5min，瓶平衡时间0.5min，加压时间0.5min，充环时间0.2min，环平衡时间0.2min，进样时间1.0min。

定量环：3mL

2.2 溶液的配制

异维A酸样品溶液：称取样品约1.0g，精密称定，置20mL顶空瓶中，加5mL N，N-二甲基乙酰胺使溶解，压盖密封。

苯贮备液：精密称取0.10449g的苯加入到50mL的容量瓶中，用N，N-二甲基乙酰胺用N，N-二甲基乙酰胺稀释到刻度，混匀。量取1mL该溶液到50mL容量瓶，用N，N-二甲基乙酰胺稀释到刻度，混匀（41.796?g/mL）。

苯对照溶液（相对浓度为2ppm）：精密量取1mL苯贮备液到100mL容量瓶，用N，N-二甲基乙酰胺稀释到刻度，混匀（0.41796?g/mL）。

2.3 测试方法

吸取5mL苯对照溶液，加入20mL的顶空进样品，密封，进样；进异维A酸样品溶液，记录色谱图。

3 方法验证与结果

3.1 方法专属性

分别取甲醇，乙醚，异丙醇，乙腈，二氯甲烷，正己烷，乙酸乙酯，四氢呋喃，苯，吡啶各溶剂适量，用N，N二甲基乙酰胺稀释，于顶空瓶中单独进样，并混合进样，记录保留时间RT（min）和分离度R。

结果：相邻峰的分离度R>1.5

结果表明，稀释剂及其他溶剂对苯的检测无干扰。

3.2 检测限度

苯检测限溶液配制：吸取0.21mL苯储备液，加入到100mL容量瓶，用N，N-二甲基乙酰胺稀释到刻度，混匀（0.0877?g/mL）。

加5mL苯检测限溶液（0.0877?g/mL）到20mL的顶空进样瓶，密封，进样，记录色谱圖，计算信噪比。

（a）LOD（ppm）=LOD（?g/mL）/异维A酸测试样品浓度×106

因此，苯方法苯在异维A酸样品中的检测限为0.4ppm。

3.3 系统适应性测定：

分别取5份0.4ppm苯标准液于顶空瓶，进样。

结果：S/N符合3∶1，RSD%<5%

该方法中重复进样六针，其峰面积的相对标准偏差为0.8%，证实检测结果有良好的重复性。

3.4 加入试验

称取异维A酸样品约1g（批号：IST-081201），加入顶空进样瓶，加5mL苯检测限溶液，平行进样，记录色谱图，计算信噪比。结果：在样品溶液中加入苯检测限溶液，能够有效检出，信噪比符合要求。

3.5 样品检测

精密称取异维A酸样品约1克（批号：IST-081201，IST-081202，IST- 081203），置20mL顶空瓶中，加5mL N，N-二甲基乙酰胺使溶解，压盖密封，进样，记录色谱图。实验结果表明，样品中均未检出苯，证明实际生产的产品中不含或苯的含量远低于检测限（0.4ppm）。而在样品加入的检测限浓度的苯能有效被检出，所以我们的分析方法可以有效可靠的监控产品中苯的残留情况。

结论

经过上述方法专属性，系统适应性，检测限度，样品检测和加入试验证明我们建立的用气相方法是可行的，是准确和可靠的。同时，我公司生产的异维A酸产品中溶剂残留不仅仅完全符合国内标准，也符合欧美发达国家的标准，完全可以保证用药安全。

参考文献

[1] ICH Q3C[Z].

[2]美国药典USP<467>[Z].