地锦草对心肌缺血再灌注损伤大鼠血清心肌酶活力的影响

马宝慧 　高永胜 　徐继辉 　吕军 　齐瑞芳 　王立军

【摘 要】 目的：观察地锦草对心肌缺血再灌注大鼠血清心肌酶活力的影响。方法：60只Wistar大鼠随机分为6组：假手术组、模型组、阳性对照组、地锦草低、中、高剂量（50、100、200 mg/kg）组，每组10只。阳性对照组给予复方丹参片600mg·kg-1·d-1灌胃，地锦草组给予低、中、高剂量（50、100、200mg·kg-1·d-1）地锦草灌胃，其它组给予生理盐水灌胃。各组均灌胃14d后，除假手术组外其余各组大鼠心脏左前降支结扎30min后再灌注120 min，建立心肌缺血再灌注模型。测定各组大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CKMB）的活力。结果：地锦草可降低心肌缺血再灌注大鼠血清AST、CK、CKMB活力。结论：地锦草对缺血再灌注损伤心肌具有一定的保护作用。

【关键词】 地锦草；心肌酶；心肌缺血再灌注损伤；大鼠

【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）06-0044-02

地锦草为大戟科植物地锦（Euphorbian humifusa uilld）或斑地锦（Euphorbia maculata L.）的干燥全草，是常用的中药材，也是一种蒙药材（蒙文名为马拉根-扎拉-乌布斯），具有清热解毒、活血止血的功效。常以单方或复方入药，用于治疗肝炎、急慢性支气管炎等。地锦草主要含有黄酮类、鞣质类等化合物，如槲皮素、山奈酚、芹菜素、木犀草素等。研究表明地锦草具有抗菌、抗氧化、抗炎、抗过敏、免疫调节、保肝、活血止血等多种生物活性[1]。研究观察地锦草对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌酶的影响。

1 仪器与材料

1.1 动物 健康雄性Wistar大鼠60只，体重180～220g，SPF级，许可证号：SCKK（京）2011-0012，购自北京芳元缘养殖中心。

1.2 材料 复方丹参片（批号：12126626，北京同仁堂科技发展股份有限公司）；天门冬氨酸氨基转移酶（AST，批号：13010705）、肌酸激酶（CK，批号：13040203）、肌酸激酶同工酶（CKMB，批号：13040304）试剂盒为武汉长立生物有限责任公司生产；地锦草（自制水煎剂）：取一定量的地锦草，加水浸泡30 min，先以武火煎开，再以文火煎煮30 min滤取煎液，以同样的方法煎煮第2、第3次，将3次取得的煎液合并，静置24 h，过滤去掉沉淀，浓缩。

1.3 仪器 东芝全自动生化分析仪。

2 方法

2.1 动物分组及给药 随机分为6组：假手术组、模型组、阳性对照组、地锦草低、中、高剂量组，每组10只。阳性对照组给予复方丹参片600mg·kg-1·d-1灌胃，地锦草组给予低、中、高剂量（50、100、200mg·kg-1·d-1）地锦草灌胃，其它组给予生理盐水灌胃。各组均灌胃14d。

2.2 造模方法 将大鼠麻醉后于左侧第3或第4肋间打开胸腔，轻压将心脏挤出胸腔，剪开心包，左心耳根部下1～2mm处，用无创伤缝合线结扎冠脉，造成左心室室壁缺血。迅速将心脏送回胸腔，用长嘴止血钳将胸部皮肤和肌肉以及心脏挂线夹紧，防止发生气胸。30min后，放松挂线，再灌注120min，制成心肌缺血再灌注模型。同时记录Ⅱ导心电图。缺血心肌壁呈现发绀、膨出，心肌收缩减弱，同时心电图示S-T段明显上抬，T波高耸，造成心肌缺血，30min后复灌120min，心电图示S-T段回落1/2以上，表示心肌缺血再灌注模型制备成功[2]。其中假手术组只穿线不结扎冠状动脉。

2.3 标本留取方法 右颈总动脉取血5 ml，4000 rpm离心，取血清。

2.4 酶的测定方法 利用全自动生化分析仪测定AST、CK、CKMB活力。相对酶活力=（除假手术组外的其它组酶活力/假手术组酶活力）×100 %。

2.5 统计分析 采用SPSS 12.0统计软件进行处理，计量资料用x±s表示，采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示差异有统计学意义。

3 结果

由表1可知，与假手术组相比，模型组大鼠血清AST、CK、CKMB活力增加。与模型组相比，地锦草组大鼠血清AST、CK、CKMB活力降低，除地锦草低剂量组CKMB活力无显著性差异外，其余各组大鼠血清AST、CK、CKMB活力与模型组相比有统计学意义（P<0.05）。

4 讨论

心肌缺血再灌注损伤是由于冠状动脉发生闭塞后再通，造成供血急剧减少或中断后血流恢复，使心肌细胞生物膜损伤、通透性增加、心肌酶逸出[3]。其中比较重要的有AST、CK、CKMB。AST在心肌细胞中含量最高，临床一般常作为心肌缺血再灌注和心肌炎的辅助检查。CK有三种同工酶，其中CKMB主要存在于心肌，含量高达40 %以上，对心肌具有相对较高的特异性和敏感性。