淋巴瘤患儿血清铁调素、IL-6的水平变化及意义

穆慢慢，徐学聚，孙绘霞，张园，陈佩佩

(1郑州大学第一附属医院，郑州450052；2郑州市儿童医院)



淋巴瘤患儿血清铁调素、IL-6的水平变化及意义

穆慢慢1，徐学聚1，孙绘霞2，张园1，陈佩佩1

(1郑州大学第一附属医院，郑州450052；2郑州市儿童医院)

摘要：目的观察淋巴瘤患儿血清中铁调素(Hepcidin)和白细胞介素6(IL-6)水平变化，并探讨其临床意义。方法 选取初治并排除骨髓浸润的淋巴瘤患儿69例，分为贫血组15例、非贫血组54例，另选取健康体检儿童15例作为正常对照组。用ELISA法检测淋巴瘤患儿及正常对照组儿童血清Hepcidin和IL-6水平，分析血清Hepcidin和IL-6水平与贫血的关系。结果贫血组、非贫血组、正常对照组血清Hepcidin水平分别为(38.93±14.12)、(31.26±11.01)、(21.99±5.14)ng/mL，IL-6水平分别为(12.13±1.92)、(10.23±1.67)、(8.59±1.01)pg/mL，3组血清Hepcidin和IL-6水平比较差异有统计学意义(P均<0.05)。贫血组Hepcidin水平与血红蛋白水平呈负相关(r=-0.765,P=0.003), Hepcidin水平与IL-6呈正相关(r=0.657,P=0.014)。结论 淋巴瘤贫血患儿血清Hepcidin、IL-6水平升高，二者在儿童淋巴瘤相关贫血中发挥重要作用。

关键词：淋巴瘤，儿童；贫血；铁调素；白细胞介素6

淋巴瘤是原发于淋巴结和(或)结外淋巴组织的恶性肿瘤，是儿童常见的恶性肿瘤，贫血是其常见并发症[1]；其中慢性病贫血(ACD)最为常见，炎性细胞因子所引起的铁代谢异常在ACD机制中起至关重要的作用。铁调素(Hepcidin)可以通过抑制铁的吸收及单核巨噬细胞系统铁的释放对铁代谢起负性调控作用，白细胞介素6(IL-6)是刺激Hpcidin合成的最主要炎性因子，可通过刺激Hpcidin的合成调节铁的代谢，导致贫血的发生。本研究探讨淋巴瘤患儿血清Hpcidin、IL-6水平与贫血的关系，以进一步揭示淋巴瘤相关性贫血的发病机制。

1资料与方法

1.1临床资料2011年12月～2013年12月郑州大学第一附属医院、郑州市儿童医院共收治的淋巴瘤患儿69例。入选标准：①依据病理(细胞)形态学、免疫学和细胞、分子遗传学确诊为淋巴瘤；②经骨髓细胞学检查明确无骨髓浸润。排除标准：①有明确引起贫血的其他疾病，如新近和活动性出血、血液系统疾病、严重心肝肾功能损害，合并其他肿瘤；②淋巴瘤合并骨髓浸润。根据WHO贫血标准[2]将69例患儿分为贫血组15例(男12例、女3例，年龄8个月～12岁、平均6.19岁)和非贫血组54例(男37例、女17例，年龄1～13岁、平均6.57岁)。同期选取郑州大学第一附属医院儿科门诊健康体检儿童15例(男9例、女6例，年龄1～12岁、平均6.71岁)作为正常对照组。以上患儿及健康儿童均未接受补铁、重组人促红细胞生成素及输血治疗。各组性别、年龄比较差异无统计学意义。

1.2检测方法早晨采集3组空腹外周静脉血5 mL,取2 mL测定血红蛋白水平，另3 mL离心(3 000 r/min)20 min，取上清，-80 ℃冰箱保存备用。采用ELISA法检测Hepcidin、IL-6水平，依据说明书进行操作。

2结果

2.13组血清Hepcidin、IL-6水平比较3组血清Hepcidin、IL-6水平比较差异有统计学意义(P均<0.05)；贫血组Hepcidin及IL-6水平高于非贫血组和正常对照组，非贫血组高于正常对照组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表1。

表1　3组血清Hepcidin、IL-6水平比较

注：与非贫血组、正常对照组比较，*P<0.05；与正常对照组比较，**P<0.05。

2.2 血清Hepcidin、IL-6水平与贫血的关系淋巴瘤贫血患儿血清Hepcidin水平与血红蛋白水平呈负相关(r=-0.765,P=0.003)，血清Hepcidin水平与IL-6水平呈正相关(r=0.657,P=0.014)。

3讨论

贫血是淋巴瘤常见并发症，但在临床诊疗中往往忽视贫血对患者的影响。郭春宝等[3]研究显示，50%的淋巴瘤贫血患儿没有接受贫血治疗。贫血时组织和细胞缺氧，可抑制正常组织和细胞的增殖，促进细胞分化、凋亡和坏死，可致肿瘤细胞发生适应性改变，导致肿瘤进展和肿瘤治疗抵抗[4]。初治淋巴瘤患儿的贫血主要原因为ACD。ACD的发病机制尚未完全阐明，目前认为是由原发疾病启动的免疫反应所介导；激活的免疫细胞主要是单核-巨噬细胞和CD3+T细胞分泌多组炎性细胞因子，诱发了肝脏Hepcidin水平升高及铁代谢异常、红系造血前体细胞增殖受损、促红细胞生成素生成减少及反应钝化、红细胞寿命缩短等，从而导致贫血[5]。大量研究表明，IL-6在ACD的发生和发展中起着重要作用。铁代谢异常是ACD的突出特点，Hepcidin是铁代谢的核心激素。

Hepcidin是2000年由Krause和Park同时发现的一种抗菌多肽[6]，属防卫素蛋白家族，主要由肝脏合成，此外在单核-巨噬细胞、脂肪细胞、肾小管上皮细胞、胃肠黏膜细胞及心脏与肌肉细胞中均有少量表达。Hepcidin在维持机体的铁动态平衡中起关键作用。其调节铁代谢的机制是：Hepcidin分泌入血后与铁输出细胞(巨噬细胞、肠上皮细胞、肝细胞)表面的跨膜铁输出蛋白(FPN)结合，启动hepcidin-FPN复合物的内化、降解，使铁输出减少，从而对铁代谢起到负向调节作用。这种负调控作用导致体内可用于合成血红蛋白的原料铁减少，骨髓幼红细胞成熟受阻，在ACD发病机制中起着至关重要的作用。目前，有多项研究表明，Hepcidin通过影响铁代谢促进ACD的发生[7]。Sasu等[8]认为Hepcidin水平与炎性因子密切相关，是诊断贫血和判断疗效的有效指标，是铁转运的负性调节剂。Hohaus等[9]研究发现，霍奇金淋巴瘤患者血清中的Hepcidin的表达高于健康正常对照组，而且霍奇金淋巴瘤合并贫血患者血清中Hepcidin的表达水平更高，Massaki等[10]对非霍奇金淋巴瘤患者进行1年的前瞻性研究发现,血红蛋白水平在高Hepcidin组明显高于低Hepcidin组。本研究结果显示，淋巴瘤合并贫血患儿血清中Hepcidin表达水平不仅高于正常对照组，而且也高于非贫血组；血清Hepcidin表达水平与血红蛋白水平呈负相关。这与Hohaus研究结果一致。随着血清Hepcidin表达水平增加，血红蛋白水平下降，提示Hepcidin表达水平的上调参与了淋巴瘤贫血的发生。

作为多效免疫调节细胞因子，IL-6在ADC发生、发展中起着重要作用。人类编码Hepcidin的基因(HAMP)位于第19号染色体上，但研究发现在HAMP中并没有找到铁元素的作用位点，提示Hepcidin对铁代谢的调节可能通过某种介质进行，而不是直接通过铁水平来实现的[11]。有明确证据表明，IL-6能诱导编码Hepcidin的基因表达，促进Hepcidin合成[12]。在体外细胞培养中发现IL-6可有效诱导Hepcidin的产生。体外细胞培养证实，IL-6可介导Hepcidin mRNA表达增加，认为脂多糖刺激了IL-6表达，继而导致Hepcidin表达的增加，Hepcidin又通过铁代谢的异常最终引起贫血[13]。本研究显示，淋巴瘤合并贫血患儿血清中IL-6表达高于非贫血组及正常对照组，而且非贫血组患儿血清中IL-6表达也高于正常对照组。Hepcidin在淋巴瘤合并贫血患儿血清中的表达水平与IL-6的表达呈正相关。提示随着淋巴瘤患儿血清中IL-6表达水平的增加，Hepcidin表达水平也增加。有研究显示，在2例Castleman病患者体内注入抗IL-6受体，抗体能快速降低血清Hepcidin的水平，从而提升血红蛋白水平[14]。提示淋巴瘤的发生与循环系统中IL-6的生成和释放有关，IL-6能刺激肝脏合成Hepcidin，高水平的Hepcidin导致巨噬细胞内铁的滞留，用于红细胞生成的原料铁不足，从而导致贫血的发生。

淋巴瘤合并贫血会加重患儿临床症状，影响生活质量，增加死亡风险及医疗费用的投入。输血及补充铁剂、促红细胞生成素(EPO)治疗可改善淋巴瘤合并贫血患儿的临床症状，但输血不良后果较多，EPO治疗效果有限，及早降低血清Hepcidin、IL-6水平可能会成为治疗淋巴瘤患儿贫血症状的另一种有效方法。

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(收稿日期：2015-09-23)

中图分类号：R725.6

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)09-0062-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.09.024