艾滋病病毒抗体检测初筛实验室室内质量控制措施探微

周建德

（昆明铁路局疾病预防控制中心 云南昆明 650011）

艾滋病病毒抗体检测初筛实验室室内质量控制措施探微

周建德

（昆明铁路局疾病预防控制中心 云南昆明 650011）

目的：为提高艾滋病病毒抗体初筛检测实验精度，降低误检或漏检率，提高检测工作质量。方法：我实验室严格按照《艾滋病检测质量管理工作指南》开展艾滋病病毒抗体初筛检测实验。结果：艾滋病病毒抗体初筛检测结果准确性符合标准，工作质量得到提高。结论：必须关注影响艾滋病初筛检测结果准确性的因素，采取有效的实验室室内质量控制措施，从而提高实验室检测水平及工作能力。

艾滋病病毒抗体初筛检测 质量控制 措施探微

随着社会经济的快速发展，不同地区及人们之间交流的逐渐增加，艾滋病防治形势日渐严峻，病情监测与抗体检测工作任务逐渐加重，而确保检测结果的准确性是HIV抗体检测工作的首要要求［1］。然而HIV抗体检测实际工作中，其检测结果却受到实验室环境、工作人员能力、态度等因素的影响。因此我们有必要探讨提高HIV抗体检测初筛实验室的室内控制措施。具体报告如下：

1 资料与方法

1.1一般资料

1.1.1 试剂［2］我实验室检测工作中采用的试剂有英科新创试剂（厦门英科新创科技有限公司生产）和珠海丽珠试剂（珠海丽珠试剂股份有限公司生产）。同时，实验室采用的2种试剂经过国家卫生部批准注册并且均在规定的有效期内使用，质量可靠。

1.1.2 血清来源 本实验室检测血清均来源于昆明铁路公安处看守所羁押人员。

1.1.3 仪器设备 本实验室用到的仪器有：酶标仪、移液器、洗板机、生物安全柜、恒温水浴箱等；所有仪器均经过云南省计量测试技术研究院校准合格并在有效期内使用。

1.2 操作及质量控制措施

1.2.1 弱阳性外部对照质控血清制备 混合HIV抗体检测呈阳性或阴性的正常人血清，对其进行离心过滤处理3000转/min，离心15min；随后进行过滤除菌处理（0.2μm生物滤膜）；然后在56摄氏度下持续加热30min完成热灭活处理。用抗体阴性正常血清稀释抗体强阳性血清，稀释度保持在OD值处于2-3倍Cut-off值范围内。批量植被后分装塑料试管保存在-70℃冰箱内备用。

1.2.2 严格按照试剂盒说明书检测步骤进行艾滋病病毒抗体初筛检测。

1.2.3 质控措施

1.2.3.1 室内设施与环境控制 实验室应完全符合《全国艾滋病检测工作规范》的要求，并具备清洁区、污染区、半污染区等独立区域。实验室温度严格控制在18-23摄氏度之间。另外，实验室应符合BSL-2要求。

1.2.3.2 仪器设备控制 检测用到的实验设备应齐全，各类防护设施用品完备；酶标仪、温度计、移液器、高压灭菌器等仪器需每年进行1次强制性检定并在有效期内使用。

1.2.3.3 人员控制 实验室至少要具备三名以上专业技术人员，其中：具有中级技术职称且有2年以上本工作经验的人员至少1名。并且所有人员都需接受相应的省级技术培训并取得资格证书；每2年至少接受一次省级技术规范复训。另外，专业技术人员还应取得压力容器作业资格证书，具备高压灭菌器操作资格。

1.2.3.4 检测方法控制 严格按照2009版《全国艾滋病检测工作规范》进行检测。

1.2.3.5 检测质量控制 ①严格按照试剂盒说明书设立阳性和阴性血清对照；②严格按照规范制备外部对照质控血清；③根据外部对照质控血清的测定数据建立质控图，并对质控图进行仔细分析与总结，且存档保存质控图。

1.2.3.6 实验室管理控制 必须建立严格的生物安全管理制度和实验室管理制度，且各项操作均需具备规范的作业指导书。在进行日常管理时应该严格样品接收登记记录、检测原始记录、酶标仪打印记录、废弃物消毒记录、仪器维护与使用记录、仪器维修与检定记录等工作，不能遗漏任何一项，同时每天填写实验室工作日志。而且，酶标仪打印记录与样品结果报告必须保持一致。另外，实验室内的所有档案均需要保存15年以上，并且要确保档案文件的完整性。

2 结果

检测过程中未出现异常，质控血清测定值未超过±2s；且质控血清测定值均匀散落在均值两侧，未出现连续几个值（3-5个）落于一侧的状况；另外，不存在连续几个值（5-7个）按照同一方向分布的情况发生。

3 讨论

艾滋病病毒抗体初筛检测实验中导致检测工作质量失控的原因，根据以往的实践研究可以发现，导致质量失控的常见原因有：酶标仪等实验室仪器未能定期检定；移液器等需要校准的仪器未能及时校准；实验室温度过高或者过低，超出规定范围；温育时间不准确，过长或者过短；实验室所用电源电压不稳致使仪器出现波动；实验所用试剂质量不合格或超过试剂有效期使用；试剂批号出现变化等等［3］。

一旦实验室检测中出现以上问题，我们必须要终止检测，及时采取措施纠正问题，并再进行重复检测。然而在检测中做好质量控制管理才是确保检测工作质量的关键。结合本实验室工作，我们发现在实验中应该做好的室内质量控制管理措施主要有以下三点：

第一，严格按照《全国艾滋病检测技术规范》等有相关部门制定的规章制度，结合自身实验室的实际情况建立严格、规范、全面、系统的质量管理体系。对实验室环境、工作人员、仪器、检测流程等进行严格管理要求。

第二，检测必须要建立质控图，有质控图才能保证在检测中及时对失控原因进行查找纠正，降低假阳性及假阴性结果出现机率，提高检测结果的准确性。

第三，实验室工作人员要及时积极参加市级及以上规格的技术培训活动及能力验证考核，不断提高自己的工作能力水平，充实自己的工作经验。

［1］袁彬，吴兰，王玲，等.艾滋病初筛实验室质量控制影响因素［J］.中国伤残医学，2014，（16）：131-132.

［2］常艳萍.基层艾滋病初筛实验室的质量控制［J］.世界最新医学信息文摘（连续型电子期刊），2015，（32）：136-136.

［3］胡伦文，雷少华.探讨艾滋病初筛实验室的规范化建设和管理［J］.中国卫生产业，2015，（5）：97-98.

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1674-2060（2016）02-0079-01