兽医实验室血清制备的影响因素及解决办法



兽医实验室血清制备的影响因素及解决办法

从室外畜禽采血到室内血清分离，通过对兽医实验室血清制备各环节的分析，找出影响血清制备效果的因素，并探讨提出控制或解决影响因素的办法。

血清是血清学检测实验必备的材料，足量、合格的血清是保证血清学检测成功的重要条件。血清的制备受多种条件的影响，对各种影响因素探讨如下：

1 采血环节影响

1.1 采血部位（1）猪采血部位可选择前腔静脉和耳静脉。但作重大动物疫病免疫效果监督检测需大批量采血时宜选择前腔静脉，因为前腔静脉出血量大，出血连续，不易污染，血清易析出，而且对猪保定简单，采血效率高。（2）禽采血部位可选择翅内侧腋静脉和心脏。一般选择翅内侧腋静脉采血。在对淘汰禽检测或技能竞赛时多选择心脏采血法。（3）牛采血部位可选择颈静脉和尾根静脉。牛尾根静脉较粗且位置浅，尾神经敏感性不强，对牛的应激小，采血对牛保定要求低，所以对奶牛等宜选用尾根静脉采血。（4）羊采血部位在颈侧静脉。

1.2 采血针头（1）猪前腔静脉采血。猪大小不一样，前腔静脉的深浅和粗细也不一样，因此对针头选择差异较大。体重≦10kg的乳猪宜用9*20mm针头，10kg＜体重≦30kg的保育猪宜用9*25mm针头，体重＞30kg的育肥猪宜用12*38mm针头，对种公母猪采血宜用16*50mm针头。（2）猪耳静脉采血宜用7号针头。（3）其他家畜家禽宜用7号针头。

1.3 采血时间 畜禽禁食8h（空腹）后进行采血，日常多选择在早上或午后采血。

1.4 血样编号 对采血样品编号时多用阿拉伯数字编写，为了避免不同环节实验人员误读，可在编号下统一划横线，如16，若反过来读作91，加横线后为16，则不易混淆。

1.5 采血程序（1）采血后用一次性注射器存送样，先在一次性注射器上给样品编号，采血后把注射器活塞往后拉至少为采血量2倍长度，再加针头帽，最后针头朝上与地面成30～45。斜放，在室温下静置2～4h（避免暴晒），待血清自然析出。（2）采血后转注离心管送样，先在离心管上给样品编号，然后把注射器针头取下，沿离心管壁将全血缓慢注入，最后盖紧离心管管帽。

1.6 采血量 全血不少于5ml。析出血清量，畜不少于1ml，禽不少于0.5～1ml。

2 送样环节影响

2.1 全血运输 运送全血样品时一定要轻拿轻放，不要剧烈震动。使用血液样品专用运输箱运送更好.

2.2 运输时间 能在6h内送达实验室的，作冷藏处理运输；不能在6h内送达的，作冷冻处理后冷藏运输。

3 实验室环节影响

3.1 血清析出良好 接收的样品若血清析出良好，可直接将血清转入离心管，按实验室规定程序编号检测。

3.2 血清析出较差 接收的样品若血清析出较差或室外气温过低，可放入37℃恒温箱中1h或25～37℃水浴锅中1h作预处理，再用离心机1500～2000r/min作5min离心。

3.3 实验室适宜环境 实验室温度应在23℃±2℃，相对湿度40%～70%。

3.4 不同材质容器影响 玻璃试管血清析出效果优于塑料离心管。

3.5 血清在实验室的保存（1）短时间保存，若4℃冷藏保存，时间最多不能超过1个月。（2）长时间保存，若-20℃冷冻保存，忌反复冻融。

4 异常情况分析

4.1 异常情况 血清有析出，但呈胶冻样；血清有析出，但伴随溶血现象；无血清析出；血清中有沉淀。

4.2 异常情况分析（1）血清呈胶冻样的原因：畜禽在刚采食后不久进行采血所致；采血后静置时间很短即用离心机离心；所采血动物膘情良好，营养过剩，形成脂血。（2）出现溶血的原因：采血后未经静置即运送；采血后送检时样品发生剧烈震动；采血后由注射器转入离心管时，未取下针头即快速转移血液，致红细胞受挤压破裂出现溶血；采血用注射器未干燥，内壁湿润。（3）无血清析出的原因：全血量过少；血液在一次性注射器中静置时，注射器活塞没有往后拉留出空间致血清无法析出；采血时出血不连续，出现空泡。（4）血清中有沉淀原因分析：血清置37℃下时间太长，易出现浑浊或沉淀；血清由室温转入-20℃冷冻保存或由-20℃冷冻保存状态转入室温时未经过冷藏并经摇匀处理，易出现沉淀；血清在高于60℃环境下时，球蛋白和白蛋白出现凝结沉淀。

文献标识码：王荣华（河南省博爱县动物疫病预防控制中心 454450） 中图分类号：S851.4C

文章编号：1007-1733（2016）04-0032-01

收稿日期：（2016–01–22）