宫颈癌中EGFR和FSCN1的表达及其相关性

黄必飞，王超群，赵永明，孙鑫鑫，王倩，曾悦，邵俊康，王艳

（东阳市人民医院，浙江 金华 322100，1.病理科；2.肿瘤外科；3.肿瘤内科）



宫颈癌中EGFR和FSCN1的表达及其相关性

黄必飞1，王超群1，赵永明2，孙鑫鑫1，王倩1，曾悦1，邵俊康1，王艳3

（东阳市人民医院，浙江 金华 322100，1.病理科；2.肿瘤外科；3.肿瘤内科）

[摘 要]目的：探讨宫颈癌中表皮生长因子受体1（EGFR）及Fascin-1（FSCN1）蛋白的表达及其相关性。方法：采用免疫组织化学EnVision法检测120例宫颈癌组织中EGFR及FSCN1蛋白的表达。结果：宫颈癌组织中EGFR蛋白阳性率为89.2%（107/120），FSCN1蛋白阳性率为99.2%（119/120），其中强阳性率为88.3%（106/120）。EGFR阳性表达与FSCN1强阳性表达呈显著正相关（P＜0.01）。结论：宫颈癌中EGFR可能参与正性调控FSCN1表达。

[关键词]表皮生长因子受体1；Fascin-1；宫颈肿瘤；免疫组织化学

宫颈癌是全球女性最常见的恶性肿瘤，其发病人数和死亡人数均位于女性恶性肿瘤前列[1]。近年来，虽然宫颈癌的综合治疗有了新的进展，但其仍然是导致中老年女性死亡的重要原因之一，且发病年龄有年轻化趋势[2]。因此，寻找宫颈癌发生发展的分子机制，并对其进行干预，对提高患者生存质量和生存率有着重要意义。表皮生长因子受体1（EGFR）是促肿瘤发生发展的重要因子，其在宫颈癌侵袭转移过程中发挥了重要作用[3-4]。Fascin-1（FSCN1）是一种相对分子质量为5.5×104的细胞骨架蛋白，其高表达与多种肿瘤发生发展密切相关[5-10]。有研究表明，激活食管癌中EGFR信号通路可上调FSCN1表达[11]。然而，关于宫颈癌中EGFR和FSCN1之间的关系尚鲜见相关报道。本研究采用免疫组织化学EnVision法检测宫颈癌组织中EGFR和FSCN1蛋白的表达并分析其相关性，以进一步探索影响宫颈癌发生发展的分子机制。

1　资料和方法

1.1一般资料 收集2007年1月到2012年12月东阳市人民医院病理科宫颈鳞状细胞癌石蜡标本120例，患者年龄34～77岁，中位年龄55岁。按WHO标准（2003年）对各病例进行分级和分期。组织学分化：高分化21例，中分化84例，低分化15例；TNM分期：I期81例，II/III期39例；淋巴结转移：有淋巴结转移26例，无淋巴结转移94例；浸润深度：＞1/2 者75例，＜1/2者45例。所有病例术前均未行放疗、化疗等抗肿瘤治疗。

1.2免疫组织化学染色 所有组织均以10%中性甲醛溶液固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，用于HE及免疫组织化学染色。免疫组织化学染色采用EnVision二步法：枸橼酸盐缓冲液高压热修复，0.3% H2O2室温孵育10～15 min，鼠抗人FSCN1单克隆抗体（克隆号：55K-2，Santa Cruz公司）及兔抗人EGFR多克隆抗体（克隆号：1005，Santa Cruz公司）均以1:100稀释比例滴加，室温孵育1 h，之后用Dako公司EnVision二步法试剂盒室温孵育30 min，最后用DAB显色剂显色5～8 min，苏木素复染、脱水、封蜡。1.3 免疫组织化学评分 ①FSCN1染色主要定位于细胞浆，其结果判定采用以下标准：染色强度计分：0（无染色），1（淡黄色），2（棕黄色），3（棕褐色）；染色范围计分：0（无阳性细胞），1（1%～25%），2 （26%～50%），3（51%～75%），4（76%～100%）；两者相加得分0～7分。以得分≥3分且切片中≥5%细胞染色视为阳性，其中得分为6～7分者视为强阳性，其余为弱阳性。②EGFR染色主要定位于细胞膜和细胞浆，本研究中以≥10%癌细胞可见弱或强的胞膜着色视为阳性。

1.4统计学处理方法 数据处理采用SPSS19．0统计软件。样本率比较应用x2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1EGFR和FSCN1蛋白在宫颈癌中的表达及分布

EGFR蛋白主要定位于癌细胞胞膜和胞浆；FSCN1蛋白主要定位于癌细胞胞质中，血管内皮细胞均阳性表达（见图1）。宫颈癌组织中EGFR蛋白阳性率为89.2%（107/120）。120例宫颈癌中，119例（占99.2%）FSCN1蛋白表达为阳性，其中包含106例（占88.3%）强阳性病例。

A：EGFR阳性表达（×200）；B：FSCN1强阳性表达（×100）图1　宫颈鳞状细胞癌免疫组织化学染色（EnVision二步法）

2.2宫颈癌中EGFR和FSCN1的相关性 表1显示，EGFR阳性组中FSCN1强阳性率为91.6%，而在EGFR阴性组中FSCN1强阳性率为61.5%，宫颈癌中EGFR阳性表达与FSCN1强阳性表达呈显著正相关（P＜0.01）。

表1　宫颈癌中EGFR和FSCN1的相关性 [n（%）]

3　讨论

EGFR是表皮生长因子受体家族（HER/erbB家族）的重要成员，其广泛分布于人体各组织中，是一种具有酪氨酸激酶活性的I型跨膜糖蛋白受体，它由胞外N末端配基结合区、跨膜亲脂片段和胞内C末端酪氨酸激酶区三部分组成。当配体（如EGF）结合于胞外区后，EGFR形成二聚体，引起胞内区自身磷酸化并激活酪氨酸激酶，启动一系列下游信号转导通路调节细胞各方面功能，包括细胞增殖、凋亡和分化[12]。研究表明，在多种肿瘤细胞中存在EGFR的高表达或异常活化，其通过激活下游PI3K-AKT和MEK-ERK1/2两条主要的信号通路，在肿瘤细胞增殖、分化以及侵袭转移过程中起了重要作用[13]。国内外已有大量研究[3-4]证实，宫颈癌中EGFR高表达与患者淋巴结转移、局部浸润等预后不良因素相关。

FSCN1是一种相对分子质量为55 000的细胞骨架蛋白，它与细胞膜丝状伪足、片状伪足、微棘的形成密切相关，从而促进细胞运动、迁移及肿瘤细胞侵袭转移[14]。研究[5-10]表明，FSCN1在胃癌、乳腺癌、非小细胞肺癌、结直肠癌等多种肿瘤中表达增强，且能显著增强胃癌及非小细胞肺癌细胞的侵袭能力。因此，FSCN1在肿瘤发生及进展过程中发挥了重要作用。目前，国内外仅有少数文献报道了宫颈癌中FSCN1的表达[15-17]，这些研究显示宫颈癌中FSCN1阳性率在67.0%到90.9%之间。而本研究中FSCN1阳性率为99.2%，其中强阳性率为88.3%，与先前的研究比较阳性率偏高，我们分析可能是由于这些研究间采用了互不相同的FSCN1评分标准，或者是因为选取了不同地区的宫颈癌患者。

有研究[11]显示食管癌中激活EGFR信号通路可上调FSCN1表达。本研究通过免疫组织化学技术检测了120例宫颈癌组织中EGFR和FSCN1的表达，显示EGFR与FSCN1强阳性表达呈正相关。但本研究中因FSCN1仅1例阴性，故分层分析不能显示EGFR与FSCN1阳性（包含全部阳性病例）之间的关系。以上结果初步显示宫颈癌中EGFR可能参与正性调控FSCN1表达，有待进一步大样本进行验证。

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（本文编辑：丁敏娇）

·临 床 经 验·

Expression and correlation of EGFR and FSCN1 in cervical cancer

HUANG Bifei1,WANG Chaoqun1,ZHAO Yongming2,SUN Xinxin1,WANG Qian1,ZENG Yue1,SHAO Junkang1,WANG Yan3.1.Department of Pathology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100; 2.Department of Surgical Oncology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100; 3.Department of Medical Oncology,Dongyang People’s Hospital,Jinhua,322100

Abstract:Objective:To explore the expression of EGFR and FSCN1 protein in cervical cancer and its correlation.Methods:The expression of EGFR and FSCN1 in 120 cases of cervical cancer was evaluated with immunohistochemical technique,EnVision method.Results:EGFR protein expression rates in cervical cancer was 89.2% (107/120).FSCN1 protein positive rate in cervical cancer was 99.2% (119/120),in which strong positive rate was 88.3% (106/120).EGFR positive expression was signifi cantly positive correlation with FSCN1 strong positive expression (P＜0.01).Conclusion:EGFR may participate in positive regulation FSCN1 expression in cervical cancer.

Key words:EGFR; FSCN1; cervical neoplasms; immunohistochemistry

作者简介：黄必飞（1971-），男，浙江东阳人，副主任医师。

基金项目：金华市科技计划重点项目（2012-3-021）；浙江省医药卫生科技计划项目（2012KYB230）；金华市科技计划项目（2013-3-097）。

收稿日期：2015-02-06

[中图分类号]R651.65

[文献标志码]B

DOI:10.3969/j.issn.2095-9400.2016.01.017