奶牛乳房炎的病原分离鉴定与药敏实验

李 鑫刘丽娅夏 俊

(1.阿勒泰地区动物疾病控制与诊断中心,新疆阿勒泰 836000; 2.新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐 830099)

奶牛乳房炎的病原分离鉴定与药敏实验

李 鑫1刘丽娅2夏 俊2

(1.阿勒泰地区动物疾病控制与诊断中心,新疆阿勒泰 836000; 2.新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐 830099)

奶牛乳房炎是奶牛最常见疾病之一,也是最难以预防和控制的常在性疾病。通过对新疆某规模化奶牛场奶牛乳房炎的病原分离鉴定及药敏实验,进一步对该牛场更好的综合防控奶牛乳房炎提供技术资料参考。

奶牛乳房炎;分离鉴定;药敏实验;防控

新疆某规模化奶牛场奶牛，是新疆屈指可数的优秀牛场及奶源地，管理良好，但奶牛常年处于工业化生产模式，配种、妊娠、产犊、产奶、再配种，高负荷的运转使奶牛的乳房变得极脆弱，易生病。曾采用青霉素、链霉素、黄芪多糖等药物治疗，但因混合感染及耐药菌株的出现，收效甚微。本研究对该场引起奶牛乳房炎病原菌进行分离鉴定及药敏试验，对更好的预防和治疗奶牛乳房炎起到了重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 乳样来源 从该规模化奶牛场采集奶样3份，编号分别为054366、054603、087077。采集时严格无菌操作，先对乳头进行消毒，弃掉前10～20 ml奶样后无菌取乳样5 ml，放入EP管中，贴好编号后冰袋冷冻保存，24 h之内进行分菌培养。

1.1.2 试剂 普通营养琼脂培养基，50 ml/L兔鲜血培养基，按实验室常规配置。

1.1.3 药敏纸片 抗菌药物纸片共12种，包括头孢曲松、炎毒咳喘王、沙拉沙星、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、卡那霉素、青霉素、链霉素、林可霉素、克林霉素。

1.2 方法

1.2.1 病原菌的培养与分离 3份奶样取少量，分别划线接种到普通营养琼脂培养基、血琼脂平板，37℃培养12～24 h。

1.2.2 病原菌鉴定 将分离的不同病菌进行涂片，革兰染色，镜检，观察菌体的形态及染色特性。

1.2.3 药物敏感性试验 用临床上常用的、价格较低廉的12种抗生素对分离培养细菌进行药物敏感性试验。

2 结果

2.1 病原菌的培养分离

3份奶样分别接种普通琼脂、血琼脂平板，在37℃培养12h观察，结果如下：

054366号样品：在普通琼脂平板和血琼脂平板上没有任何细菌生长。

054603号样品：在普通琼脂平板和血琼脂平板上细菌生长情况基本相同，主要有三种菌落，一种是大而无规则的菌落，一种是中等大小菌落，一种是针尖大小菌落。其中以大而无规则的菌落占多数。

087077号样品：在普通琼脂平板和血琼脂平板上细菌生长情况基本相同，主要有三种菌落，一种是大而无规则的菌落，一种是中等大小菌落，一种是针尖大小菌落。其中以中等大小菌落及针尖大小菌落占多数，大而无规则的菌落很少。

2.2 病原菌鉴定（革兰氏染色）

将分离的三种不同病菌（大、中、小）进行革兰氏染色鉴定。结果大而无规则的细菌为革兰氏阳性杆菌（牛棒状杆菌、化脓杆菌等）；中等大小细菌为革兰氏阳性球菌（葡萄球菌、双球菌）；针尖大小菌落为革兰氏阳性球菌（链球菌）。

2.3 药物敏感性试验

用临床上常用的、价格较低廉的12种抗生素对分离培养细菌进行药物敏感性试验。结果阿米卡星（红色箭头所指）对大、中、小三种病菌均存在明显的抑菌环，能有效抑制病原菌的生长，效果最好。

3 讨论

（1）依据药敏试验结果，为该规模化奶牛场制定了防治方案，具体如下：

治疗：使用阿米卡星，药量及用药方法参照药品说明，连用5～7d。

预防：药物预防：首选兰州畜牧与兽药研究所生产的速效乳炎散（中药），成年/青年母牛全群投药，每次5d，一年2～3次。

（2）防治建议

①奶牛乳房炎是乳腺受到物理、化学、病菌等因素的刺激所发生的一种炎症变化，是一种多因素疫病。但是，除病原微生物外，其他因素随着奶牛饲养业的发展而逐渐改善，病菌就成为当前引起奶牛乳房炎的主要原因。已经报道的奶牛乳房炎病原微生物有150多种，包括细菌、真菌、支原体等，但研究证明，引发奶牛乳房炎的病原主要为金黄色葡萄球菌、链球菌和杆菌[5]，由这3种病原菌引起的奶牛乳房炎约占该病发病总数的90%以上。单纯由某一个病原菌引起的奶牛乳房炎较少，而多数是由2种～3种甚至是3种以上的病原菌引起的，这也是传统的治疗药物（如青、链霉素）难以取得令人满意效果的原因。由于规模化奶牛场普遍存在广泛使用抗生素的情况，使病原菌存在普遍的耐药性，那么当需要用药治疗或预防流行病时，就需要讲究科学“先对病原进行实验室确诊，再进行高效药物的筛选（药敏试验）”。否则使用了对病原菌无效的药物治疗疫病，不但浪费人力、财力、增加了药物在动物体内的残留量，更重要的是耽误了疫病防治的最佳时机，使疫情蔓延，造成不必要的、更大的经济损失，况且病重、病程长的奶牛往往很难治愈。

②有临床型（显性）乳房炎，就暗示隐性乳房炎一定不少。这在全世界都很普遍，就像犊牛肺炎和腹泻一样，不必恐慌，只要科学用药、疫苗预防，奶牛乳房炎是可控可治的。

③建议贵场加强环境卫生管理，牛舍定期消毒，清洁牛床，保持环境干燥；挤奶时正确使用挤奶器，尽量缩短挤奶时间，挤奶时用力要均匀，尽量挤净乳汁；病牛及时予以治疗。加强在分娩前后，尤其是产犊初期的饲养管理。分娩前，乳房明显肿胀时，应减少多汁饲料和精料喂量，分娩后控制饮水并适当增加运动和挤奶次数。此外，加强干奶期奶牛的饲养管理对奶牛乳房炎的预防及治疗也很重要，有资料显示，干奶期治疗奶牛乳房炎不但能治愈现有疾病，也能预防新的感染，还有治愈率比泌乳期高、能够较长时问使用高浓度抗生素、不存在乳汁中药物残留等优点。因此，对于奶牛养殖场来说，奶牛乳房炎的预防及治疗在奶牛生产的任何时期都应是一项常抓不懈的工作。

[1] 吴凌，刘志忠，夏成，等.荷颠坦奶牛乳房炎链球菌的分离与鉴定[J].畜牧与兽医，2003，35（3）：35.