APP下载

胚胎性转录因子FOXC2调控卵巢癌细胞增殖与侵袭的作用机制

2016-04-04郑州大学附属洛阳中心医院河南洛阳471099

关键词:组织化学切片卵巢癌

周 星(郑州大学附属洛阳中心医院,河南 洛阳 471099)

胚胎性转录因子FOXC2调控卵巢癌细胞增殖与侵袭的作用机制

周 星
(郑州大学附属洛阳中心医院,河南 洛阳 471099)

目的 卵巢癌已经是临床妇科肿瘤常见肿瘤之一,其发病率逐年走高。其发病机制学说存在多种假说。本文探讨了胚胎性转录因子FOXC2调控卵巢癌细胞增殖与侵袭的作用机制。方法 对我院2013年7月-2015年7月收治的女性患者的正常卵巢组织标本和癌卵巢组织标本免疫组织化学染色,观察FOXC2的分布。结果 正常卵巢组织标本中没有发现FOXC2的表达,在上皮性卵巢癌,交界性浆液性囊腺肿瘤中发现了FOXC2的表达,主要分布在间质血管、肿瘤细胞核等。结论 FOXC2对上皮细胞转化为间质细胞过程中是关键的调控因子之一,可以促进细胞迁徙;可以诱导肿瘤病灶中血管生成,并促进肿瘤细胞的增殖、迁徙。

FOXC2;卵巢增殖;侵袭

1 资料与方法

1.1 研究对象

研究对象为我院2013年7月-2015年7月收治的女性患者的卵巢组织共18例,其中属于上皮性卵巢癌14例,交界性浆液性囊腺肿瘤3例,正常卵巢组织1例。获取的组织样本使用磷酸盐缓冲液进行清洗,清洗之后浸在福尔马林中24h固定。

1.2 主要仪器

光学显微镜Olympus、环凯牌恒温水箱、ERM3000 生物组织切片机

1.3 主要试剂

FOXC2 兔抗人多克隆抗体(LSBio)、SP羊抗兔/小鼠免疫组化试剂盒(上海研卉生物科技有限公司)、DAB显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)、甲醛(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)、苏木精(上海迈瑞尔化学技术有限公司)。

1.4 方法

将标本进行HE和免疫组织化学染色。载玻片清洗干净,进行酸处理24h,然后蒸馏水冲洗干净,晾干。然后载玻片包被多聚赖氨酸,晾干。取福尔马林中固定的标本组织进行酒精脱水。脱水的方法采用梯度法,80%酒精、90%酒精、100%酒精从低到高一次脱水;之后二甲苯透明处理。然后进行组织包埋,标本组织石蜡包埋后放在4℃冰箱过夜。将包埋好标本组织的蜡块进行切片,将切片贴片于载玻片,60-70℃烘箱烘烤100min。将切片中的石蜡利用二甲苯进行脱蜡处理,之后利用从高到低梯度的乙醇进行复水。免疫组织化学染色需要对抗原进行修复,修复的方法采用柠檬酸盐和微波的方式进行修复。然后,利用3%双氧水孵育5-10min,消除内源性的过氧化物酶活性。使用滴加马血清,室温孵育10min封闭。滴加一抗FOXC2,37℃孵育2h。PBS冲洗5分钟,共冲洗3次,然后加入连接辣根过氧化物酶的二抗,37℃孵育20min,然后显色剂DAB显色,复染,脱水并透明,最后中性树胶封片。

1.5 观察数据

观察FOXC2在卵巢癌细胞、间质血管等的表达。

2 结 果

2.1 正常卵巢组织和交界性浆液性囊腺肿瘤染色结果

观察正常卵巢组织免疫组织化学染色结果,在切片中并没有发现棕色深染区域,即FOXC2没有在正常卵巢组织表达。观察交界性浆液性囊腺肿瘤切片组织免疫组织化学染色结果,在切片发现棕色深染区域主要分布在血管或者淋巴管和腺体细胞中,即FOXC2在血管或者淋巴管和腺体细胞中表达。

2.2 上皮性卵巢癌染色结果

观察上皮性卵巢癌组织切片发现,上皮性卵巢癌组织病灶存在大量棕色深染颗粒,即FOXC2在上皮性卵巢癌中大量表达,呈阳性。FOXC2在肿瘤细胞核中大量表达,细胞核体积出现明显的增大。

2.3 间质血管内皮细胞染色结果

上皮性卵巢癌组织切片和交界性浆液性囊腺肿瘤组织切片中发现FOXC2在间质血管内皮细胞的细胞质中表达强烈。

3 讨 论

本研究中发现卵巢肿瘤间质血管有FOXC2表达,这可能是促进新生血管为其恶化肿瘤提供营养。这主要涉及到血管新生的信号通路Notch,该信号通路主要是对血管形成和胚胎时期动脉分化进行调控。FOXC2作为该信号通路上重要的分子,对动脉细胞的分化起着至关重要的作用。FOXC2可以激活Notch配体DLL4的启动子,Notch和DLL4对动脉细胞的分化有决定性作用。因此,FOXC2通过调控的DLL4蛋白分子可以控制内皮细胞的分化[1-3]。FOXC2既可以影响内皮细胞的迁徙也可以调控动脉细胞的分化。FOXC2在肿瘤细胞核中表达强烈,可能也是调控DNA转录,影响肿瘤细胞发展的重要转录因子之一。

[1] 杨念念.中国2009年卵巢癌发病与死亡分析[J].中国肿瘤,2013(08):617-621.

[2] 郑春花.转录因子 FOXC2 在宫颈癌发生的研究[D].吉林:吉林大学,2014.

[3] 马珂等. Notch3 及 Notch 基因细胞内区在卵巢上皮性癌组织中的表达及DAPT 对卵巢上皮性癌细胞的作用[J].中华妇产科杂志, 2010, 45(12):921-926.

R737.31

A

ISSN.2095-8803.2016.09.0015.02

猜你喜欢

组织化学切片卵巢癌
miR-181a在卵巢癌细胞中对顺铂的耐药作用
食管鳞状细胞癌中FOXC2、E-cadherin和vimentin的免疫组织化学表达及其与血管生成拟态的关系
Wnt3 a和TCF4在人卵巢癌中的表达及临床意义
基于SDN与NFV的网络切片架构
肾穿刺组织冷冻切片技术的改进方法
大口黑鲈鳃黏液细胞的组织化学特征及5-HT免疫反应阳性细胞的分布
卵巢癌脾转移的临床研究进展
基于镜像对称参考切片的多扫描链测试数据压缩方法
microRNA与卵巢癌转移的研究进展
免疫组织化学和免疫荧光染色在肾活检组织石蜡切片磷脂酶A2受体检测中的应用