免疫增强剂的特点及其在水产动物中的应用方法
2016-03-28孟思妤孟长明陈昌福河南省新乡康大消毒剂有限公司华中农业大学武汉430070
○孟思妤 孟长明 陈昌福(河南省新乡康大消毒剂有限公司;华中农业大学,武汉430070)
免疫增强剂的特点及其在水产动物中的应用方法
○孟思妤1)孟长明1)陈昌福2)
(1)河南省新乡康大消毒剂有限公司;2)华中农业大学,武汉430070)
免疫刺激剂(immunologic stimulant)是指能够调节动物免疫系统并激活免疫功能,增强机体对细菌和病毒等传染性病原体抵抗力的一类物质。将免疫刺激剂用于水产养殖动物传染性疾病预防的研究,其主要目的是为了预防使用化学药物难以奏效的水产养殖动物的病毒和细菌性疾病。
(一)免疫刺激剂的种类、特点与应用
1.革兰阳性菌与菌体肽聚糖部分革兰阳性菌的灭活菌体具有激活动物免疫功能的作用,其作用的主要成分是菌体细胞壁中的肽聚糖。并非所有的革兰阳性菌都具有这种功能,而只有特定的菌种和特定的菌株具有这种免疫激活功能。
将属于革兰阳性菌的嗜热双歧杆菌细胞壁中提取的肽聚糖投与鱼类后,在提高鱼体的巨噬细胞和嗜中性白细胞的吞噬能力与过氧化物酶活性的同时,还能增强溶菌酶的活性。对养殖虾类投与这类物质可以提高其粒细胞的吞噬活性并增加细胞中超氧化歧化酶的生成量,同时提高酚氧化酶的活性。由于这类免疫刺激剂激活了水产动物的免疫功能,已经证明可以提高虹鳟对弧菌病、五条鰤对链球菌病和日本囊对虾对弧菌病与病毒性血症的抵抗力。
2.革兰阴性菌与菌体LPS将部分革兰阴性菌及其细胞壁中LPS投与鱼类后,可以增加鱼类血液中白细胞的数量和提高其吞噬活性。增强日本鳗鲡对爱德华菌病的抵抗力。用杀对虾弧菌的灭活菌体注射、浸泡和投喂日本囊对虾,可以促进对虾体内产生血细胞趋化因子和提高血细胞的吞噬活性,增强日本囊对虾对弧菌病的抵抗力。
3.从放线菌中提取的短肽从属于放线菌的橄榄灰链霉菌的培养液中提取的短肽类物质投与鱼类后,可以提高供试鱼的巨噬细胞的吞噬活性和杀菌能力,能增强虹鳟对肾脏病等传染性疾病的抗病力。
4.酵母菌与菌体多糖酵母菌的细胞壁中存在大量的β-1,3-葡聚糖、β-1,6-葡聚糖和甘露聚糖等多糖类物质,尤其是含有较多的β-1,3-葡聚糖。将从酵母菌中提取的β-1,3-葡聚糖投与鱼体,可以提高鱼体内巨噬细胞及其他白细胞的吞噬和杀菌活性,同时还可以提高IL-2和补体的活性。将啤酒酵母菌细胞壁成分投与对虾,也可以提高血细胞的吞噬活性、酚氧化酶和超氧化歧化酶的产生能力。通过激活免疫功能,可以使斑鮰对迟缓爱德华菌病、鲑科鱼类对肾脏病和弧菌病的抗病力。湖北安琪酵母股份有限公司生产的免疫多糖(酵母细胞壁),其中主要含有β-葡聚糖≥20%,α-甘露聚糖肽≥20%,肽类及蛋白质≥30%,几丁质≥2.0%等,经过对凡纳滨对虾、日本鳗鲡和中华鳖的大量试验研究证明,该产品对多种水产动物的免疫系统有良好的刺激作用,是一种优质免疫刺激剂。
5.真菌与真菌多糖将从蘑菇中提取的β-1,3-葡聚糖投与鱼类后,可以增强供试鱼白细胞吞噬活性,提高补体和溶菌酶的活性,促进特异性抗体的生成。将这种β-1,3-葡聚糖投与对虾后,也可以增强血细胞的吞噬活性和提高酚氧化酶的活性。由于免疫刺激剂激活了免疫功能,可以有效地预防鲤的气单胞菌病、五条鰤的链球菌病和日本囊对虾的弧菌病与病毒性血症。
6.海藻与海藻多糖将从海带中提取的β-1,3-葡聚糖添加在培养液中,可以刺激鲑的巨噬细胞产生超氧化歧化酶。此外,髓藻属的多种海藻、苏萨海带、帕纳普海带和裙带菜属的一些种类中的热提取物,投与鱼类后,利用在实验室条件下的攻毒试验,证明日本鳗鲡对E.tarda,五条鰤对链球菌的抵抗力明显上升。
7.甲壳质与壳多糖从甲壳类和昆虫的外壳中提取的甲壳质与壳多糖,投与鱼类后,可以增强供试鱼的白细胞吞噬活性和杀菌能力,提高体内溶菌酶活性和对各种传染病的抵抗力。
8.其他免疫刺激剂如左旋咪唑等化学合成物质,本来是作为杀虫剂使用的,现在已经研究结果证明这种物质还具有增强鱼类白细胞的吞噬活性和杀菌活性,使溶菌酶的活性上升,提高虹鳟对弧菌病的抵抗力。从中草药中提取的许多成分,如干草素、莨菪碱等也已经被初步证明是很有开发前景的水产用免疫刺激剂。
(二)免疫刺激剂的应用途径与程序
每一种免疫刺激剂的有效剂量都存在使用上限和下限,对水产动物采用间隔一定时间定期投与免疫刺激剂较长期连续投与的效果好,而且只有在投与量和方法正确的前提下,免疫刺激剂才能正常地发挥作用。从嗜热双歧杆菌中提取的肽聚糖,每日按每千克体重0.2mg的剂量投与,对鱼、虾是适宜的剂量,如果每日按该剂量的10倍投与,供试鱼、虾的免疫系统的功能就会趋于与未使用免疫刺激剂的对照组相同。此外,用该物质作为鱼、虾的免疫刺激剂时,采用连续投喂4 d停用3 d或者连续投喂7 d停用7 d的投与方式,其效果较连续投喂好。
关于免疫刺激剂投与的时间,最好能在水产动物传染性疾病的发生季节前连续投喂一段时间,将水产动物自身非特异性免疫力提高。这是因为在使用免疫刺激剂期间,即使有细菌或病毒性病原进入了水产动物机体,由于机体的免疫功能在免疫刺激剂的作用下,表现出较高的免疫活性,抑制了病原体增殖而并未将其消灭或排除体外的缘故。采用免疫多糖(酵母免疫多糖)作为水产养殖动物的免疫刺激剂时,在各种传染性疾病的流行高峰时期,可以采用连续投与的方式,而在养殖时期则可以采用连续投与3~4周,在必要的情形下,间隔一段时间后(也可以更具需要而确定)再进行第二个投喂周期的方式进行。
需要特别注意的是免疫刺激剂是通过激活水产动物的免疫系统而发挥抗传染病的功能的,如果因为养殖环境特别恶劣,水产动物的免疫系统衰弱至不能激活的状态,免疫刺激剂也就难以发挥其作用了。所以,从改善水产动物的饲养环境、加强营养和饲养管理入手,尽量减少抑制水产动物免疫系统的环境因素,是提高免疫刺激剂使用效果的重要途径。