乌沉香的安全性评价研究
2016-03-28谢建卫曾建全庞文生洪振强胡娟
谢建卫 曾建全 庞文生 洪振强 胡娟
【摘 要】 目的:对彬达牌乌沉香进行安全性评价研究。方法:采用急性吸入毒性实验和亚急性吸入毒性实验,将白鼠随机分成空白组和给药组,给药组给予不同剂量的熏香量,观测其急性吸入毒性症状,计算半数致死量;对亚急性吸入毒性大鼠进行一般情况、血液生化指标及内脏系数检测。结果:急性吸入毒性实验通过给药确定彬达牌乌沉香对小鼠的半数致死量为323170mg/m3;亚急性毒性实验检测的各血液生化指标及内脏系数与空白组无显著差别。结论:比照急性吸入毒性分级标准,远大于2000mg/m3,本产品属无毒级;亚急性吸入毒性实验,对大鼠一般综合指标没有影响,大鼠血常规、血液生化、内脏系数等指标均无毒性显示。因此,本产品无毒性,无不良反应,安全性良好。
【关键词】 彬达牌乌沉香;吸入毒性;生化指标
【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2016)04-0034-03
Abstract:Objective To evaluate the safety of Binda brand Linderae-Agilawood Incense. Methods To employ acute inhalation toxicity and subacute inhalation toxicity test,rats were randomly divided into control group,blank group and the treatment groups were given different doses of incense,then observe its acute inhalation toxicity symptoms,calculate half lethal dose. To detected the general situation and blood biochemical parameters of rats with subacute inhalation toxicity. Results Acute inhalation toxicity experiment by administration of Binda brand linderae-Agilawood Incense on mice determine the median lethal dose was 323170 mg/m3 and there was no significant difference between the blood biochemical parameters and the blank group in the test of subacute toxicity. Conclusion Comparising acute inhalation toxicity grading criteria far greater than 2000mg/m3, this product is non-toxic grade. Subacute inhalation toxicit effect on rats in rats, blood indexes, blood biochemical indexes,visceral coefficient such as non-toxic display.This product is actually non-toxic, no adverse reactions and it has a good safety.
Keywords:Binda Brand linderae-Agilawood Incense;Inhalation Toxicity;Biochemical Index
香薰在中国古代人们的生活中的使用广泛,从熏燃、悬佩到涂敷、饮用,乃至用于计时等等,都反映了古人对“香”的深刻认识和情之所往,特别是在文人墨客的生活中应用极其广泛,是他们居家养生、陶冶情操必备的日常用品[1]。同时,“香”在宗教和祭祀活动中都是必不可少的供品与用品,在佛教中更是有着特殊的意义。不同香品应用的中药材种类不同,其功效也有所不同。乌沉香主要是由沉香[2]、木香、乌药、肉桂[3]、甘松[4]等药材组成的一种天然熏香。实验通过急性吸入毒性实验、亚急性吸入毒性实验,确定乌沉香对大鼠的毒性反应,为彬达牌乌沉香的应用提供安全性评价依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器 AE240电子分析天平(梅特勒-托利仪器有限公司);FA2104N电子分析天平(上海精密科学仪器有限公司);HERAEUS Pico17微量高速离心机(Thermo Fisher);LXJ-ⅡB离心机(上海安亭科学仪器厂);pocH-100iV Diff自动动物血液分析仪(希森美康株式会社);M200PRO多功能酶标仪(TECAN)。
1.2 材料 彬达牌乌沉香(永春县达埔彬达制香厂有限公司);苦味酸(批号:20131023,北京鑫鼎鹏飞科技发展有限公司);尿素氮(BUN)试剂盒、总蛋白试剂盒、总胆红素试剂盒、总胆固醇试剂盒、葡萄糖试剂盒、谷草转氨酶(AST/GOT)试剂盒、谷丙转氨酶(ALT/GPT)试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。
1.3 动物 昆明种小鼠,普通级,雌雄各半,(20±2)g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,合格证号:SCXK-(沪)2012-0002;Wistar大鼠,雌雄各半,体质量180~200g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号:SCXK-(沪)2012-0002。
2 方法
2.1 急性吸入毒性实验
2.1.1 实验分组及给药 健康成年昆明小鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,每组10只。各组小鼠放入体积0.1024m3的箱子中,分别给予129.21g/m3/次、215.35g/m3/次、301.49g/m3/次、387.63g/m3/次、430.7g/m3/次的熏香量,每次2h,持续14d以上,观察并记录小鼠的死亡时间及中枢神经系统的反应。
2.1.2 观察指标
2.1.2.1 中枢神经系统 体味异常、叫声异常、不安、呆滞、痉挛、抽搐麻痹运动失调、对外反应过敏或迟钝。
2.1.2.2 植物神经系统 瞳孔扩大或缩小、流涎或流泪。
2.1.2.3 呼吸系统 鼻孔流液、鼻翼煽动、呼吸深缓、呼吸过速、蜂腰。
2.1.2.4 皮肤和毛 皮肤充血、紫绀、皮毛蓬松、污秽。
2.1.2.5 眼 眼球突出、结膜充血、角膜混浊。
2.1.2.6 消化系统 腹泻、厌食。
2.2 亚急性吸入毒性实验
2.2.1 分组及给药 健康Wistar大鼠40只,雌雄各半,适应性饲养1周,随机分为空白对照组、熏香高/中/低剂量组,每组10只。空白对照组只呼吸新鲜空气,熏香低、中、高剂量组分别给予43.07g/m3/次、172.28g/m3/次、301.49g/m3/次熏香量,每次4h,每天1次,每周5d,连续3周。腹主动脉采血,观测相应指标。
2.2.2 观察指标
2.2.2.1 一般情况 观察给药期间和给药后实验动物的毒性反应及其出现时间、持续时间和程度。如果发现濒临死亡的动物及时解剖,每周测量1次进食量和体重。
2.2.2.2 血液检查 血红蛋白含量、红细胞数、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白浓度、血小板数及白细胞计数等。
2.2.2.3 血液生化指标检查 谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、总胆红素等肝功指标,尿素等肾功指标,葡萄糖、胆固醇等生化指标。
2.2.2.4 病理学检查 实验结束后处死大鼠,解剖、分离出肺、肝和肾等主要器官,生理盐水清洗油污,吸水纸吸干表面水分,剔除脏器表面脂肪、筋膜后用电子天平精确称重,计算脏器系数。(脏器系数=脏器重/体重×100%)
2.3 统计学处理 数据以(x±s)表示,用SPSS软件进行数据统计分析,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05表示差异有统计学意义。
3 结果
3.1 小鼠的半数致死量(LD50) 由表1可知,实验测定彬达牌乌沉香致小鼠的半数致死量(LD50)为323170mg/m3,远大于2000mg/m3,比照急性吸入毒性分级标准,该样品属无毒级。
3.2 对大鼠一般情况的影响 由表2可知,实验期间熏香各组大鼠精神状态好,排便、体温和皮毛等未见异常,其体质量、进食量与空白对照组基本一致,差异无统计学意义(P>0.05)。低剂量组无任何毒性反应,中剂量组出现呼吸过速、流泪,高剂量组出现呼吸过速、流泪、咳嗽,但导致大鼠出现呼吸道、泪腺刺激性的剂量已是使用量的1000倍,说明彬达牌乌沉香对大鼠没有毒性反应。
3.3 对大鼠血液学指标的影响 由表3可知,与空白对照组比较,熏香高、中、低剂量组大鼠血液中的红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白、红细胞平均体积及红细胞平均血红蛋白浓度差异均无统计学意义(P>0.05);熏香高、中、低剂量组之间差异均无统计学意义(P>0.05);上述六个血液学指标的各项数值均在正常范围之内,未见因熏香而引起的异常。
3.4 对大鼠血液生化指标的影响 由表4可知,与空白对照组比较,熏香高、中、低剂量组大鼠血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、总胆红素等肝功指标,尿素、肌酐等肾功指标,葡萄糖、胆固醇等生化指标差异均无统计学意义(P>0.05);熏香高、中、低剂量组之间差异均无统计学意义(P>0.05);上述七个生化指标的各项数值均在正常范围之内,未见因熏香而引起的异常。
3.5 对大鼠内脏系数的影响 由表5可知,与空白对照组比较,熏香高、中、低剂量组大鼠的肺、肝和肾的内脏系数差异均无统计学意义(P>0.05);熏香高、中、低剂量组之间差异均无统计学意义(P>0.05);上述脏器各项数值均在正常范围之内,未见因熏香而引起的异常。
4 讨论
近年来十分流行的室内薰香用品,其配方由挥发性比较好的植物或中药和无烟物质组成,点燃时功效或芳香成分进入空气中,保持室内空气的清新、抗菌杀毒、醒脑安神、增强体质、预防疾病。劣质的薰香,因为考虑成本问题,只能采用化学合成香料,非但不能达到应有的效果,还会适得其反,对人体造成伤害。研究通过急性吸入毒性实验和亚急性吸入毒性实验,对一种天然熏香——乌沉香进行安全性评价研究。实验结果表明,彬达牌乌沉香对小鼠的半数致死量(LD50)为323170mg/m3,远大于2000mg/m3,比照急性吸入毒性分级标准,该样品属无毒级[5];亚急性吸入毒性实验结果表明,乌沉香对大鼠一般综合指标、血常规、血液生化指标及内脏系数等指标均无影响。为彬达牌乌沉香在日常生活中的应用,提供了安全性评价依据。
参考文献
[1]杨岗.先秦以至秦汉的薰香习俗文化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,11(4):174-179.
[2]马艳.中药沉香的化学成分研究进展[J].科技信息,2013(24):143-143.
[3]赵凯,薛培凤,屠鹏飞.肉桂的化学成分及其生物活性研究进展[J].内蒙古医科大学学报,2013(1):63-74.
[4]袁捷,韩祖成.中药甘松研究概况[J].中国民族民间医药杂志,2012,21(16):57-59.
[5]黄清臻, 贾瑞忠, 韩华. 熏香类卫生杀虫制品的安全性探讨[J].中华卫生杀虫药械,2013,20(2):94-96.
(收稿日期:2015.12.25)