柴芩承气汤对重症急性胰腺炎大鼠内毒素、白细胞介素-6的影响*

桑凤梅，张士金，窦晨辉

(郑州人民医院中医科，郑州 450003)

柴芩承气汤对重症急性胰腺炎大鼠内毒素、白细胞介素-6的影响*

桑凤梅，张士金，窦晨辉

(郑州人民医院中医科，郑州 450003)

目的:研究柴芩承气汤对重症急性胰腺炎大鼠内毒素、白细胞介素-6的影响。方法:选取36只SD大鼠，按随机数字表法分为3组，观察各组动物血浆、肺组织、回肠组织病理的变化，分别测定内毒素、白细胞介素-6在不同病理以及不同时间段治疗的浓度变化。结果:治疗后，SAP+柴芩承气汤治疗组大鼠内毒素浓度的变化(0.077±0.013)Eu/mL显著低于模型组的浓度(3.31±0.698)Eu/mL，差异有统计学意义。治疗后，SAP+柴芩承气汤治疗组大鼠白细胞介素-6浓度的变化(45.17±6.13)pg/ mL显著低于模型组的浓度(87.31±5.98)pg/mL，差异有统计学意义。结论:柴芩承气汤对重症急性胰腺炎大鼠内毒素、白细胞介素-6具有一定的影响，值得广泛推广使用。

柴芩承气汤;重症急性胰腺炎;内毒素;白细胞介素-6

重症急性胰腺炎(SAP)在发病过程中会释放大量促炎因子，当失去促炎因子与抗炎因子之间的平衡时，炎性反应综合症便出现，进而影响脏器功能衰竭［1］。SAP具有病情险恶、发病快、致死亡率高的特点［2］。为探讨其治疗重症急性胰腺炎的可能机制，本实验主要观察柴芩承气汤对重症急性胰腺炎大鼠内毒素、白细胞介素-6的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 选取36只SD大鼠，雌雄各半，体质量230 g～280 g之间，由四川大学实验动物中心提供。

1.1.2 实验药品 柴芩承气汤组成:蒲公英、金银腾各25 g，黄芩、柴胡各12 g，金铃子、陈皮、青香藤、大黄、芒硝各8 g，冲服［3］。注射用水于实验前按照1 g生药/mL配成。

1.1.3 试剂 采用ChAT进行试剂盒检测，在进行实验前结合生理盐水配成3%的牛胆酸溶液，保存时应避免光的直射［4］。

1.1.4 实验仪器 大学科技实业总公司提供GC-911r放射免疫计数器，日本SANYO公司提供超低温冰箱，由海市医学化验所提供鲎试剂盒。

1.2 方法

1.2.1 制作SAP模型 喂养大鼠1周培养适应性，在进行试验前半天禁止入食但不禁水。注射麻醉腹腔进行常规消毒之后，在腹部正中线切入长度约为3.5 cm的切口，拨开肝叶确凿十二指肠，取出长度约为4.5 cm左右，翻动十二指肠之后发现片状胰腺，淡黄色或者半透明乳白的为胆胰管［5］。十二指肠进行固定，伸直胆胰管，见十二指肠乳头开口采用留置针刺破肠壁，当发现十二指肠稍微高于肠壁时将针尖抬高，进入到胆总管之后，沿其方向进针约为2.8 cm，针芯退出以后，黄色胆汁流出［6］。夹住接近肝端使用微型血管夹，泵入3%的牛胆酸溶液，微泵标准为0.1 mL/100 g，在5 min内泵完［7］。保留5 min留置针与微血管夹之后，将留置针拔出，微血管夹打开。在大鼠胰腺表现出血、坏死以及水肿等症状时，造模极为成功。

1.2.2 制作假手术模型 术前准备进入至腹腔操作，刺破肠壁后保持5 min的留置针，不需要药物注射。

1.2.3 分组 按照随机数表法分为假手术对照组、SAP模型组、SAP+柴芩承气汤治疗组3组各12只。假手术对照组在模型造模成功后注射生理盐水共4 mL于皮下，每2 h 1次，其中应将0.4 mL/ 100 g的生理盐水经胃管注入，每1 h 1次，在5 h后取血经腹腔静脉并进行检验。SAP模型组在模型成功后，注射生理盐水共4 mL于皮下，每2 h 1次，其中应将0.4 mL/100 g的生理盐水经胃管注入，每1 h 1次，在5 h后取血经腹腔静脉并进行检验。SAP +柴芩承气汤治疗组用配置好的柴芩承气汤治疗SAP大鼠，在制造模型成功后的12 h灌入配置好的柴芩承气汤1 mL/100 g。

1.3 观察指标

观察各组间的生化指标、淀粉酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶和血清乳酸脱氢酶。观察各组动物血浆、肺组织、回肠组织病理的变化，分别测定内毒素、白细胞介素-6在不同病理以及不同时间段治疗的浓度变化。制作组织动物血浆、肺组织、回肠组织，加入 PBS缓冲液后采用匀浆器搅拌均匀，在低温高速离心机中分离出上清液，并分装置入小离心管在－75℃的冰箱中保存并检测蛋白。内毒素水平的测定采取鲎试剂偶氮基质显色方法，白细胞介素-6的测定采取放射免疫法。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件进行统计分析，以均数±标准差(±s)表示，计量资料比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组、模型组、SAP+柴芩承气汤治疗组生化指标比较

表1显示，模型组的淀粉酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、血清乳酸脱氢酶均高于对照组和SAP+柴芩承气汤治疗组水平，差异有统计学意义(P＜0.05)。

表1 对照组、模型组、SAP+柴芩承气汤治疗组生化指标比较(±s)

表1 对照组、模型组、SAP+柴芩承气汤治疗组生化指标比较(±s)

鼠数 对照组 模型组 SAP+柴芩承气汤治疗组t淀 粉 酶 (AMY)(IU/L) 12 842.6±68.5 3097.6±1032.2 1132.1±87.3 75.1099丙氨酸转氨酶(ALT)(IU/L) 12 67.6±11.4 169.9± 38.1 53.6± 9.8 23.9698天冬氨酸转氨酶(AST)(IU/L) 12 171.4±10.9 992.4± 164.2 186.2±52.5 49.8331血清乳酸脱氢酶(LDH)(IU/L) 12 656.3±98.4 1412.1± 249.4 200.1±25.3 38.0762

2.2 对照组、模型组、SAP+柴芩承气汤治疗组内毒素检测结果

表2显示，模型组内毒素表达水平显著高于对照组和SAP+柴芩承气汤治疗组，差异有统计学意义(P＜0.05)。

表2 对照组、模型组、SAP+柴芩承气汤治疗组血浆、肺和回肠的内毒素浓度比较(±s，Eu/mL)

表2 对照组、模型组、SAP+柴芩承气汤治疗组血浆、肺和回肠的内毒素浓度比较(±s，Eu/mL)

组别 鼠数 血浆 肺组织 回肠组织对照 组12 0.059±0.007 2.51±0.18 2.58±0.32模 型 组 12 0.364±0.315 4.54±0.31 5.01±0.81 SAP+柴芩承气汤治疗组 12 0.101±0.019 2.16±0.41 2.89±0.61统 计 值 57.9768 6.4834 8.0492 P 0.0000 0.0391 0.0179

2.3 对照组、模型组、SAP+柴芩承气汤治疗组白细胞介素-6检测结果

表3显示，模型组白细胞介素-6的浓度表达水平显著高于对照组和SAP+柴芩承气汤治疗组，差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.4 治疗后不同时间段各组大鼠内毒素变化

表4显示，治疗后SAP+柴芩承气汤治疗组大鼠内毒素浓度的变化(0.077±0.013)Eu/mL显著低于模型组浓度(3.31±0.698)Eu/mL，且较后时间段浓度变化均显著低于前时段(1.467±0.058)Eu/ mL，差异有统计学意义(P＜0.05)。

表3 对照组、模型组2组、SAP+柴芩承气汤治疗组血浆、肺和回肠的白细胞介素-6浓度比较(±s，pg/mL)

表3 对照组、模型组2组、SAP+柴芩承气汤治疗组血浆、肺和回肠的白细胞介素-6浓度比较(±s，pg/mL)

别 鼠数 血浆 肺组织 回肠组织对照组组0.0000 0.0000 0.0000 12 6.49± 1.07 4.51±0.17 9.58±0.36模 型 组 12 115.36±16.31 34.54±1.31 43.01±1.61 SAP+柴芩承气 汤治疗组 12 68.41± 7.14 19.97±2.41 20.14±2.35统 计 值 45.9002 42.4461 25.5301 P

表4 治疗后不同时间段各组大鼠内毒素的变化(±s，Eu/mL)

表4 治疗后不同时间段各组大鼠内毒素的变化(±s，Eu/mL)

组别 鼠数 12 h 24 h 48 h对照组12 0.033±0.009 0.024±0.012 0.030±0.0 t P 08 0.3471模型组12 1.386±0.036 1.799±0.587 3.31±0.698 9.5359 0.0000 06 0.96 SAP+柴芩承 气 汤 治 疗 组 12 1.467±0.058 0.643±0.052 0.077±0.013 81.0091 0.0000

2.5 治疗后不同时间段各组大鼠白细胞介素-6的变化

表5显示，经治疗后SAP+柴芩承气汤治疗组大鼠白细胞介素-6浓度的变化(45.17±6.13)pg/ mL显著低于模型组浓度(87.31±5.98)pg/mL，且较后时间段浓度变化均显著低于前时段(68.67± 6.58)pg/mL，差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

柴芩承气汤具有大承气汤与大柴胡汤的共同功效，大柴胡汤主要针对偏重阳明的患者，大承气汤具有燥、实、痞满、坚的特点，为此具备消除痞满、通里攻下的功效以及活血凉血、清热解毒的功能，此方法对于重症急性胰腺炎的治疗已经逐渐在临床中得到认可［8-9］。

表5 治疗后不同时间段各组大鼠白细胞介素-6的变化(±s，pg/mL)

表5 治疗后不同时间段各组大鼠白细胞介素-6的变化(±s，pg/mL)

组别 鼠数 12 h 24 h 48 h t P .9255模型组12 69.86±7.36 91.43±5.87 87.31±5.98 6.3743 0.0000对照组12 20.53±5.09 21.14±6.15 20.32±5.76 0.0946 0 SAP+柴芩承 气 汤 治 疗 组 12 68.67±6.58 60.43±3.52 45.17±6.13 9.0522 0.0000

相关研究表明，柴芩承气汤具有排除肠胃积滞、去除肠道内毒素的功效，使肠道的免疫屏障得以保护［10-11］。在本次研究中发现，经柴芩承气汤治疗后大鼠的血浆(0.101±0.019)Eu/mL、肺组织(19.97 ±2.41)Eu/mL和回肠组织(2.89±0.61)Eu/mL的毒素浓度均得以明显降低，与相关研究者的观点一致。提示柴芩承气汤可以很好地使内毒素的生产得以减少，进而吸收、快速灭活以及排泄的功能，有利于减轻由于内毒素导致的炎性反应综合征和急性肺遭受损害［12］。

通过本次研究发现，对重症急性胰腺炎大鼠实施柴芩承气汤治疗后，其血浆(68.41±7.14)pg/ mL、肺组织(19.97±2.41)pg/mL和回肠(20.14± 2.35)pg/mL的白细胞介素-6浓度均有所下降。白细胞介素-6能够快速反应炎症，促炎因子会因此进而引发一系列甚至放大病理的炎症反应，最终致全身出现炎症反应综合症以及多器官功能受损。相关研究显示，白细胞介素-6重症急性胰腺炎在发病中起举足轻重的作用，其白细胞介素-6升高，对重症急性胰腺炎的发病机制危险越大，因此在发病后应该及时对白细胞介素-6的含量进行检测，可以对重症急性胰腺炎的严重程度进行有效评价［13～14］。

相关研究表明，柴芩承气汤具有抑制多种细胞尤其是白细胞介素-6以及毒素的活性及产生，进一步缓解重症急性胰腺炎由于炎症带来的发炎，降低组织器官受损的概率［15］。在本次研究中也发现，柴芩承气汤治疗重症急性胰腺炎大鼠，在不同时间段的毒素、白细胞介素-6的浓度均在不同程度呈现降低趋势，表明柴芩承气汤具有改善胰腺组织病理学变化的功能，逐渐缓解病情，符合相关研究者的观点。

综上所述，柴芩承气汤对重症急性胰腺炎大鼠内毒素、白细胞介素-6的具有一定的影响，值得广泛推广使用。

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Effects of Chaiqin Chengqi Decoction on Endotoxin and Interleukin-6 in Rats with Severe Acute Pancreatitis

SANG Feng-mei，ZHANG Shi-jin，DOU Chen-hui
(Zhengzhou People’s Hospital of Traditional Chinese Medicine，Zhengzhou 450003，China)

Objective:To study the Chaiqing Chengqi decoction influence toxin and interleukin-6 on rats with severe acute pancrentitis.Methods:36 SD rats，according to a random number table divided into three groups.Observed in plasma，lung tissue of animals in each group.Endotoxin，interleukin-6 concentrations were measured in different pathological changes and the different time periods of treatment.Results:After treatment，SAP + changes in toxin concentration in Chaiqin-Chengqi Treated rats(0.077 ±0.013)Eu/mL concentration was significantly lower than the model group(3.31 ±0.698)Eu/mL，the difference has statistically significance.After treatment，SAP +changes in interleukin-6 concentrations Chaiqingchengqi Treated rats(45.17 ±6.13)pg/mL concentration was significantly lower than the model group(87.31±5.98)pg/mL，the difference has statistically significance.Conclusion:Chaigin Chengqi Decoction decoction on rats with severe acute toxin within the interleukin-6 has a certain influence，which worth widely used.

Chaigin Chengqi Decoction;Severe acute pancreatitis;Endotoxin;Interleukin-6

R285.5

:B

:1006-3250(2016)03-0345-03

2015-07-19