受体品种对萨福克羊胚胎移植受胎率的影响

曾 滔，韩煜茹，马春江

（新疆哈密地区畜牧工作站，新疆哈密839000）

受体品种对萨福克羊胚胎移植受胎率的影响

曾 滔，韩煜茹，马春江*

（新疆哈密地区畜牧工作站，新疆哈密839000）

研究目的：研究不同受体品种对萨福克羊胚胎移植受胎率的影响。方法：首先对萨福克成年母羊进行同期发情、激素诱导超数排卵和人工授精，发情后5.5～6 d手术冲胚并对胚胎分级，使用腹腔镜将单枚A级胚胎移植到相同发情天数的受体母羊子宫角，受体母羊品种为多浪羊、小尾寒羊、湖羊和杂交羊（以哈萨克羊为母本，多浪和小尾寒羊为父本的杂种羊），30 d后用B超进行妊娠检查。结果：湖羊作为受体母羊受胎率最低，只有52.0％；而杂交羊作为受体羊的受胎率最高，达到68.7％；多浪羊和小尾寒羊的受胎率分别为65.1％和66.7％。但卡方检验表明不同受体品种间差异不显著（P＞0.05）。结论：以上受体品种对萨福克羊胚胎移植受胎率没有显著影响。

胚胎移植；受胎率；受体品种；妊娠检查

10.16863 /j.cnki.1003-6377.2016.05.005

胚胎移植技术是指将良种母畜的早期胚胎取出，移植到同种的、生理状态相同的一般母畜体内，使之继续发育成为新个体的繁殖技术。为了改良哈密地区肉用绵羊品种，提高羊肉品质及加速引进良种肉羊的扩繁速度，填补良种肉种羊的缺口，哈密地区自2013年开始由政府补贴大批量进行肉羊胚胎移植项目，2015年哈密地区养殖企业从澳大利亚购买了上千只萨福克纯种肉羊，利用胚胎移植技术将优质萨福克肉羊群体迅速扩繁，并向全区推广。

哈密地区目前养殖有多个绵羊品种，主要包括本土品种哈萨克羊和多浪羊、引入品种湖羊、小尾寒羊等。本研究拟探讨以多浪羊、小尾寒羊、湖羊和杂交羊作为受体，对萨福克羊胚胎移植受胎率的影响，以期为萨福克羊的后期大规模扩繁提供理论依据。

1 材料与方法

1.1实验动物

供体母羊为澳大利亚引进的萨福克羊，共55只，年龄2.5岁，平均体重65 kg。受体羊为多浪羊、小尾寒羊、湖羊、杂交羊。受体羊均来自哈密市牧祥养殖专业合作社，均为2～4岁经产母羊。受体羊各品种所处圈舍不同，在圈舍中按体重大小分群15～20只为一栏，精料粗蛋白18％，采用TMR技术，日粮采食量按体重4％供给。

1.2主要药品和试剂

FSH（宁波三生药业）、PG（宁波三生药业）、静松林、盐酸普鲁卡因、肾上腺素、PBS缓冲液、Holding液、海绵栓（氟孕酮、新西兰进口）、酒精、碘酊、新洁尔灭、矿物油、生理盐水。

1.3主要器械及设备

手术车、创布、剪毛剪、手术剪、止血钳、夹子、肠钳、移液枪、连续变倍体式显微镜、恒温水浴锅、烘干箱、高压灭菌锅、恒温台等。

1.4供体羊的超数排卵和胚胎鉴定

对供体萨福克母羊进行埋栓处理，海绵栓在供体羊阴道内放置13 d。在取出海绵栓前2 d开始肌肉注射FSH，总剂量300 U，按每天早晚各1次、剂量递减的方法连续注射3 d，共六次。在注射FSH第5针时，将海绵栓取出，同时注射0.1 mg PG，并清洗阴道。海绵栓取出24 h开始试情，根据发情情况进行人工授精。供体羊发情5.5～6 d时，采用子宫角冲胚方法进行手术冲胚。

子宫角收集的液体放在连续变倍体式显微镜下镜检，将胚胎从集卵皿吸至放有Holding液的四孔皿中，在连续变倍体式显微镜下观察受精卵的形态、色调、分裂球的大小、均匀度、细胞的密度与透明带的间隙以及变性情况，根据上述标准对受精卵进行鉴定和分级，详细记录每只供体羊出胚数和可用胚胎数。A级胚胎：胚胎形态完整，轮廓清晰，呈球形，分裂球大小均匀，结构紧凑，色调和透明度适中，无附着的细胞和液泡，细胞变性率不超过10％。

1.5受体羊的同期发情和内窥镜法胚胎移植

对受体母羊肌肉注射0.1mg PG，12～60 h用试情公羊进行试情，以母羊接受爬跨为准，用自喷漆做出标记后挑出，做好受体羊的发情记录与当天发情的供体羊一同标识。

受体羊术前要空腹十二小时，仰卧于手术保定架上，在后肢内侧鼠蹊部做1.5～2 cm切口，用腹腔镜确认黄体发育状况，优良的黄体予以移植。在另一侧做切口，用肠钳引导出黄体侧子宫角，将装有胚胎的移植管顺子宫角方向插入宫腔，推出胚胎，随即子宫复位。移植侧切口缝合消毒。

1.6受体羊的妊娠鉴定

使用B超对胚胎移植后30 d的受体羊进行妊娠检查，采用直肠内探查，将受体羊只保定后检查者站于羊体一侧，探头涂布耦合剂后，将探头插入直肠，朝向盆腔入口方向进行扫查。母羊一般取自然站立姿势，助手在旁扶持，遇到腹部大的经产母羊需要帮检查者托起腹部便于妊娠检查操作。

1.7数据分析

使用卡方检验分析不同品种的受胎率。

2 结果与分析

本次移植受体187只（四个品种），共移植A级胚胎187枚。经过B超检查，多浪羊、小尾寒羊、湖羊、杂交羊的受胎率分别为65.12％、66.67％、52.00％和68.67％，卡方检验表明，品种间差异不显著，见表1。

3 讨论

影响胚胎移植的因素有很多，例如胚胎等级、季节、供受体发情同步差、受体的营养状况、受体的黄体情况，移植环境、移植方法、操作人员的熟练程度等。本次试验是2015年12月10日在初冬季节开始，供体和受体膘情优良，发情率达到90％，黄体形状和等级都很好。

10-11月份是绵羊的繁殖季节，绵羊的季节性生殖特性会影响到在不同季节进行的同期发情和超数排卵效果。张金龙等（2013）报道，季节对受体羊胚胎移植效果的影响较大，秋冬季节（9-12月份）受胎率较高，夏季（6-8月份）受胎率较低，本实验与上述结果相一致。

此次为单胚移植,作为受体羊的4个品种中,湖羊和小尾寒羊为多胎品种,哈萨克杂交羊和多浪羊多数为单胎。本实验中单胎或多胎品种受体并不影响胚胎移植的妊娠率，这与吴晓东等人（2005）将杜泊羊胚胎移植给不同品种受体母羊后妊娠率差异不显著的结论相一致。这与刘引区等人（2012）将萨福克羊胚胎移植给小尾寒羊和小尾寒羊杂种羊妊娠率差异极显著结论相左。

此次胚胎移植产羔在2016年5月，共计产羔87只，受体羊产羔率71.31％，公母比49:51，初生重平均5 kg，羔羊生长发育良好。结果表明：单胎品种的杂交羊胚胎移植妊娠率比多胎品种的小尾寒羊和湖羊高,但是差异不显著。

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Effects of Recipient Varieties Against Conception Rate of Embryo Transp lantation in Suffolk Sheep

ZENG Tao,HAN Yu-ru,MA Chun-jiang*
（Animal Husbandry Station of HamiDistrict,Xinjiang Hami 839000，China）

Purpose of the study:to study the effects of different recipient varieties against conception rate of embryo transplantation in Suffolk sheep,Method:Firstly,estrus synchronization,superovulation and artificial insemination on adult Suffolk ewes were conducted,5.5-6 days after estrus,embryos were flushed and classified by surgery,single A-class embryo was transplanted into the cornua uteri in the receptor who iswith same days of estrus by use of laparoscope,the receptor varietiesmainly include Duolang sheep,Han sheep, Hu sheep and hybrid sheep（a kind of hybrid sheep,taking Kazakh sheep as female parent,Han and Doulang sheep as paternal）,30 days later,checked its pregnancy with B ultrasonic.Results:as the receptor,Hu sheep was in lowest conception rate,only 52.0％;while the hybrid sheep was in highest pregnancy rate,reached 68.7％;and Duolang sheep and Han sheep was 65.1％and 66.7％respectively,however,Chi-square test showed that the difference between different varieties of receptors is not significant（P>0.05）.Conclusion:the aforesaid varieties had no significanteffect on the pregnancy rate of embryo transplantation in Suffolk sheep.

embryo transplantation;conception rate;receptor species;pregnancy check

S814.6

：A

：1003－6377（2016）05－0024-04

国外专用肉羊胚胎移植推广项目（哈地党农（2014）3号）

曾滔(1977-)，男，本科，畜牧师，研究方向：动物营养与繁殖。E-mail：fanyuzhongxin@126.com

马春江（1972-），男，农业推广研究员，研究方向：动物营养与繁殖。

2016-04-20，

：2016-05-02