血管内皮生长因子在骨肉瘤及骨转移瘤肿瘤中的表达水平分析

买买提艾力·哈斯木，白靖平，江仁兵

(新疆医科大学附属肿瘤医院骨与软组织科，新疆乌鲁木齐　830000)



血管内皮生长因子在骨肉瘤及骨转移瘤肿瘤中的表达水平分析

买买提艾力·哈斯木，白靖平，江仁兵

(新疆医科大学附属肿瘤医院骨与软组织科，新疆乌鲁木齐830000)

【摘要】目的:探讨原发骨肉瘤与骨转移瘤肿瘤中的血管内皮生长因子( VEGF)表达水平。方法:选取34例骨肉瘤以及16例骨转移瘤患者肿瘤组织纳入研究，另选取10例同时期单纯骨折患者组织标本作为对照。运用免疫组化法检测3种组织VEGF表达，并比较不同骨组织VEGF表达水平差异。结果:骨肉瘤患者、骨转移瘤患者VEGF表达均高于正常对照组，差异具有显著性意义( P＜0. 01)，骨转移瘤与骨肉瘤肿瘤组织VEGF表达水平差异无统计学意义( P＞0. 05)。不同组织学分型骨肉瘤VEGF阳性表达比较差异无统计学意义( P＞0. 05)。结论: VEGF在骨肉瘤与骨转移瘤组织中表达异常增高。在不同类型骨肿瘤组织之间及不同组织学分型骨肉瘤之间VEGF表达无显著差异性。

【关键词】骨肉瘤;骨转移瘤;血管内皮生长因子

网络出版时间: 2016-3-4 10∶16网络出版地址: http: / /www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20160304.1016.022.html

肿瘤的生长、浸润和转移依赖于血管生成［1］。血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor，VEGF)是目前已知的作用最强的促血管生成因子之一，VEGF特异性作用于血管内皮细胞，通过促进内皮细胞增殖、增加血管通透性，以诱导肿瘤血管生成，在肿瘤的发生发展中起关键作用［2］。骨肉瘤是骨原发性的恶性肿瘤，其生长速度较快，容易出现复发和转移，VEGF起到很大的促进作用［3］。骨转移瘤多来源于肺癌及乳腺癌，VEGF的异常表达对骨转移瘤的发生亦有很大的作用［4］。本研究通过免疫组化法分析骨肉瘤以及骨转移瘤(乳腺癌骨转移)肿瘤组织中VEGF表达，了解骨肉瘤以及骨转移瘤中VEGF表达差异。

1　资料与方法

1.1一般资料

收集2011年1月至2014年12月在新疆医科大学附属肿瘤医院收治的，经病理确诊的34例骨肉瘤患者以及16例骨转移瘤患者的肿瘤组织标本各200 mg，标记并置于－70℃备用。其中，骨肉瘤患者男性18例，女性16例;年龄29～57岁，平均( 42. 4± 10. 6)岁;按WHO分型，成骨细胞型14例，成软骨细胞型12例，成纤维细胞型8例。骨转移瘤均为女性乳腺癌患者术后骨转移并病理性骨折，年龄32～49岁，平均( 40. 1±7. 4)岁。所有患者标本均经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，5 mm连续切片。另选取10例同时期单纯骨折患者组织标本作为对照组。

1.2方法

对照组正常组织、原发骨肉瘤与骨转移瘤肿瘤组织VEGF表达采用免疫组化SP法。兔抗人VEGF单克隆抗体和即用型SABC试剂盒均购自武汉博士德公司。严格按照试剂盒操作步骤说明书进行，标本进行石蜡包埋，经常规切片，脱蜡，磷酸盐缓冲液清洗，高温抗原修复，进行VEGF免疫组化染色，苏木精复染，专用封片剂封片。

1.3结果评价

染色结果两位高级病理专业技术人员以双盲法读片，结果取平均值计算。以核染色棕黄或者褐色为阳性，核未染色为阴性。结果判定:每个样本随机选择10个高倍视野，每个视野计数100个细胞，阳性细胞比率≥5%为阳性( + )表达，＜5%为阴性(－)表达。阳性率=阳性细胞数/总细胞数× 100%。

1.4统计学分析

采用SPSS 19.0进行统计学分析。计数资料以百分比表示，不同骨肉瘤组织学分型之间VEGF阳性表达比价采用Fisher精确概率法检验，骨肉瘤与骨转移瘤肿瘤组织VEGF表达水平比较采用χ2检验，检验水平α=0. 05，P＜0. 05认为差异有统计学意义。

2　结果

2.1骨肉瘤及骨转移瘤肿瘤组织VEGF免疫组化

结果

骨肉瘤细胞及骨转移瘤细胞VEGF蛋白染色均呈棕黄色颗粒状强染，位于胞浆，间质细胞阴性。对照组健康骨组织细胞VEGF表达阴性，几乎无黄染。

2.2骨肉瘤及骨转移瘤肿瘤组织VEGF表达水平比较

对照组VEGF阳性表达率为10% ( 1/10)。骨肉瘤患者肿瘤组织VEGF的阳性表达率为73. 53% ( 25/34)，其中，成骨细胞型、成软骨细胞型及成纤维细胞型骨肉瘤组织VEGF的阳性表达率分别为71. 43%( 10/14)、75. 00% ( 9/12)及75. 00% ( 6/8)，不同组织学分型骨肉瘤VEGF阳性表达比较差异无统计学意义( P＞0.05)。骨转移瘤患者肿瘤组织VEGF阳性表达率为68. 75% ( 11/16)。骨肉瘤患者、骨转移瘤患者VEGF表达均高于正常对照组，差异具有显著性意义( P＜0. 01)，骨转移瘤与骨肉瘤肿瘤组织VEGF表达水平差异无统计学意义( P＞0. 05)。

3　讨论

研究发现，肿瘤发生发展与血管的形成密切相关，抑制肿瘤组织血管的生成可发挥抗肿瘤作用［5－6］。VEGF又称血管渗透因子或血管增殖因子，是一种特异性作用于血管内皮细胞的多功能生长因子，人类VEGF基因位于染色体的6p21，全长28 kb。编码VEGF的基因长约14 kb，由8个外显子和7个内含子构成［7］。VEGF可以特异作用于血管内皮细胞，可诱导血管形成，增加血管通透性，促进血管内皮细胞分裂与增殖，在胚胎发育、创伤愈合、肿瘤生长与转移过程中具有重要作用。VEGF蛋白表达随肿瘤生物学行为恶性潜能的增加而显著增加［8－9］，是被用于检测肿瘤血管生成对抗血管生成药物敏感性的常用指标［10－11］。

研究表明，VEGF抑制剂可显著减缓荷瘤动物体内的骨肉瘤组织生长速度，同时会降低肺转移的骨肉瘤瘤体内的血管密度，缩小肿瘤体积、降低肿瘤侵袭能力［12］。而直接应用VEGF单克隆抗体可抑制荷瘤小鼠肿瘤生长和转移［13］。Gordon等［11，14］通过静脉输注VEGF单克隆抗体治疗晚期肿瘤患者，结果发现患者体内肿瘤均不同程度受到抑制。

本实验免疫组化结果表明，VEGF在骨肉瘤和骨转移瘤中表达水平均显著高于正常组织( P＜0. 01)，说明无论是原发性还是转移性肿瘤中VEGF的高表达并非偶发事件。另外一个方面，不同组织学分型骨肉瘤中VEGF表达水平无显著差异提示VEGF的表达水平在各型肿瘤中均高表达但是并不具备特异性，提示VEGF可能是对不同恶性肿瘤发生发展都起到比较重要的作用。综上所述，VEGF可作为骨肉瘤及骨转移瘤的诊断、治疗以及预后判断的一个新指标。

参考文献

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(学术编辑:冯刚)

论著

Analysis of the level of vascular endothelial growth factor expression in osteosarcoma and bone metastatic neoplasm

Maitiaili·Buaijiaer Hasimu，BAI Jing-ping，JIANG Ren-bing
( Department of Bone and Soft Tissue，Cancer Hospital Affiliated to Xinjiang Medical University，Urumchi 830000，Xinjiang，China)

【Abstract】Objective: To explore the level of vascular endothelial growth factor expression in osteosarcoma and bone metastatic neoplasm.Methods: Tumor tissue specimens from 34 patients with osteosarcoma and 16 patients with bone metastatic neoplasm and tissue specimens from patients with simple fracture ( control group) were enrolled for detecting the levels of VEGF expression of 3 kinds by using immunohistochemistry and analyzing the differences of VEGF expression in different bone tissues.Results: The levels of VEGF were higher in patients with osteosarcoma and bone metastatic neoplasm than that in control group，with statistical significance ( P＜0. 01).There was no statistical difference in the level of VEGF expression between tumor tissues of osteosarcoma and bone metastatic neoplasm( P＞0. 05) and no significant difference in the positive VEGF expression among different histological classification of osteosarcoma ( P＞0. 05).Conclusion: VEGF is expressed highly in tumor tissues of osteosarcoma and bone metastatic neoplasm.Moreover，no difference is found in different types of bone tumor tissues and the VEGF expression among different histological classification of osteosarcoma.

【Key words】Osteosarcoma; Bone metastatic neoplasm; Vascular endothelial growth factor

作者简介:买买提艾力·哈斯木( 1978－)，男，副主任医师。E-mail: maimaitiailihasimu@126.com

基金项目:新疆自治区卫生厅青年基金( 2012Y07)

收稿日期:2015－04－08

doi:10. 3969/j. issn. 1005-3697. 2016. 01.11

【文章编号】1005-3697( 2016) 01-039-03

【中图分类号】R738

【文献标志码】A