三联体亲子鉴定案件突变分析

陈海英 赵 蕾

（1.赣州市公安局司法鉴定中心，江西赣州341000; 2.公安部物证鉴定中心，北京100038）

三联体亲子鉴定案件突变分析

陈海英1赵 蕾2

（1.赣州市公安局司法鉴定中心，江西赣州341000; 2.公安部物证鉴定中心，北京100038）

对12例不符合遗传规律的三联体亲子鉴定案例进行检验，分析其对亲子鉴定案件结果的影响及解决方法。收集678例亲子鉴定中12例均只存在一个STR基因座突变的案件血液样本，采用三种不同的扩增试剂检测，分析突变来源并计算其父权指数。11例均为一步突变，第12例则在D 21S11基因座疑父与子代存在三步突变，经过增加体系，其共有7个STR基因座与子代不符合遗传关系。对于亲子鉴定中出现少数基因座不符合遗传规律时，需要综合分析，必要时应增加检测基因座的数量，避免亲子关系的误判。

STR突变亲子鉴定

短串联重复序列（short tandem repeat, STR）是目前使用最广泛的遗传标记，因其多态性丰富，扩增片段长度短，广泛地应用于法医物证鉴定中[1]。STR多态性片段长度<400bp，易于扩增。但STR位于人类基因组高变区，突变率较高，在亲子鉴定中不容忽视。本文采用IdentifilerTMPlus试剂盒（美国ABI公司）检验的678例三联体亲子鉴定中的12例均只存在一个STR基因座突变的案件中的基因突变进行统计分析。

1 材料和方法

1.1 样本和DNA提取

678例三联体亲子鉴定案例样本，取自赣州司法鉴定中心和赣州市公安局日常检验和检案中的样本。均采用Chelex-100法提取模板DNA，4℃保存。

1.2 DNA扩增与检测

采用IdentifilerTMPlus试剂盒（美国ABI公司）、MicroreaderTM21 ID System和MicroreaderTM23sp ID System扩增试剂对样本进行复合扩增。扩增产物在3130XL型遗传分析仪（美国ABI公司）上进行毛细管电泳分型。

1.3 TR基因座突变来源分析

按照文献［2］的方法判断突变来源。在父亲或母亲的等位基因中，根据这两个等位基因与新等位基因的差异来确定，差异小的定为新等位基因的来源，若差异相同，则无法确定来源，因此可将突变类型分为“来自父亲”、“来自母亲”和“无法确定”3类。

2 结果

2.1 IdentifilerTMPlus试剂盒检测

在678例三联体亲子鉴定中，仅通过Identi⁃filerTMPlus试剂盒检测后存在一个STR基因座不符合遗传规律的共12例。

2.2 突变来源和突变步数分析

分析上述12例亲子鉴定中发生突变的STR分型数据，前11例均为一步突变，其中9例突变来自父亲，2例突变为无法确定突变来源。第12例则在D21S11基因座上生母分型确定的前提下，子代在疑父分型中无法找到来源。

2.3 MicroreaderTM试剂盒检测

采用苏州阅微基因技术有限公司生产的Mi⁃croreaderTM21 ID System和MicroreaderTM23sp ID System扩增试剂对12例亲子鉴定样本进行进一步检测，检测基因座达到39个STR基因座，前11例案件样本经过检验其增加的STR基因基因座均符合遗传关系，第12例案件样本经过检验，其中疑父在D21S11、PentaE、D10S1435、D17S1290、D3S3045、D15S659、D7S3048等7个STR基因座与子代不符合遗传关系。

3 讨论

DNA分子结构为双螺旋结构。在DNA复制的过程中，其新生链和模板链分离时，在STR基因座的重复区域发生碱基错配形成一个或数个重复区域的环状结构，继而出现新生链比模板链延长或缩短，表现为增加或减少1个（或数个）重复单位。复制滑链错配通常发生在重复次数较多、串联排列的正向重复序列中[3]，故其突变率较大。

在日常检案中，对于STR基因座突变这一现象，不应套用定性思维，认为突变基因座数量少于3个则按照突变考虑而给出不排除亲子关系结论。如笔者在近几年采用IdentifilerTMPlus试剂盒检验的678例三联体亲子鉴定中统计出的12例只存在一个STR基因座突变的案件，依据GA/T965-2011《法庭科学DNA亲子鉴定规范》计算其累计父权概率，其中11例案件的父权概率大于0.9990，并且在增加系统检验后其增加的STR基因基因座均符合遗传关系，故给出肯定结论；而另1例案件，增加系统检验后发现共有7个STR基因座疑父与子代不符合遗传关系，因此可以排除D21S11为突变所致。

STR基因座等位基因突变普遍存在，为避免错误的排除亲权关系。在日常检案的亲子关系判定中，必需考虑所有符合遗传关系和不符合遗传关系的基因座分型，计算其父权概率，看是否能达到“支持”或“排除”的结果。在给出肯定结论时，父权概率要达到或大于0.9990；在给出否定结论时，必须有3个以上或更多的基因座违反孟德尔遗传规律[4]。必要时应增加STR基因座或结合其他遗传标志进一步确认，从而保证检验结果的科学性和正确性。

［1］邓志辉，吴国光，程良红，等.13个STR基因座在亲子鉴定案例中的基因突变观察［J］.中国法医学杂志，2003，18（3）：150-153.

［2］赵珍敏，柳燕，林源.IdentifilerTM系统在亲子鉴定中的突变观察和分析［J］.法医学杂志，2007，23（4）：290-293.

［3］李茜，程良红，魏天莉，等.亲子鉴定中STR基因座的基因突变分析［J］.中国法医学杂志，2008，23（6）：394-396.

［4］伍新尧，李建金，伍祥林，等.单亲案的亲权概率的计算及认定标准［J］.中国法医学杂志，2000，S1(1).