早产儿B族链球菌带菌情况研究

2016-03-15刘婉文

实用临床医药杂志 2016年1期

早产儿B族链球菌带菌情况研究

刘婉文

(广东省佛山市南海区人民医院, 广东佛山, 528200)

关键词:早产儿; B族链球菌; 带菌情况; 耐药性

B族链球菌也称为无乳链球菌，是β溶血性革兰染色阳性链球菌中的一种，在细菌分类学上属于芽孢杆菌纲、链球菌科，经常寄生于妊娠期女性的下消化道和泌尿生殖道[1]，是引起妊娠期女性及新生儿侵袭性感染的主要病原菌之一[2-5]。近年来，国内外对GBS进行了大量研究，对于GBS带菌情况方面的研究，国内报道主要集中在孕产妇的带菌情况，关于新生儿GBS的带菌情及带菌率鲜有报道[6]。本研究中作者选择胎龄为28～37周的早产儿201例为研究对象，探讨早产儿GBS带菌情况、与产妇相关情况的关系及GBS的耐药情况，为临床合理用药提供参考。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2014年6月—2015年7月入住佛山市南海区人民医院生产的胎龄为28～37周的早产儿201例为研究对象，其中男106例，女95例；胎龄28～32周的92例，胎龄33～37周的为109例，平均胎龄33.4周；产妇年龄在23～46岁，平均年龄31.8岁；所有产妇均无明显的全身性疾病。

1.2方法

1.2.1GBS培养实验设计：早产儿出生后15 min内，使用COPAN eSWAP采集包分别于新生儿咽部、耳道部、脐根部、腋窝部和腹股沟部采集标本快速送检；漩涡震荡均匀后，用0.3 mL接种于增菌肉汤让GBS增菌，待增菌肉汤变黄后采用改良GBS显色血琼脂，于5% CO2环境中培养，培养18～24 h后使用改良GBS显色血琼脂上挑取桔红色菌落，进行快速识别筛选，生化鉴定后对GBS进行药敏试验。

1.2.2增菌肉汤备制方法：采用30 g的胰酪蛋白胨，15 g的磷酸氢二钾，10 g的氯化钠和16 mg的溴甲酚紫，加入蒸馏水至1 L, 将其pH值调至7.4后，将其置121 ℃的灭菌器内灭菌15 min后，加入15 g的葡萄糖，0.2 μg/mL的甲紫、15 μg/mL的萘啶酸、6 μg/mL的多黏菌素和50 mL的胎牛血清，混匀后制成增菌肉汤，将其分装于2 mL的无菌管中，置于-20℃的环境中保存备用。

1.2.3改良GBS菌落显色实验方法：采用35 g的胰酪蛋白胨，20 g的未改性米淀粉，5 g的酵母浸膏，30 mL的马血清，105 g的NaCl和20 g的l号琼，加入蒸馏水使体积至1 L，将其pH值调为7.4，采用高压灭菌后置于冰箱中保存备用，使用时需在厌氧环境、35 ℃环境温度下培养8～18 h后观察结果。

1.3观察指标

① GBS阳性率: GBS培养液颜色由紫变黄或穿莉线周围出现明显桔红色区者为阳性，阳性率=阳性例数/受检患者数; ② 新生儿GBS带菌情况与产妇相关情况的关系：产妇年龄、孕周、分娩方式、有无流产史、有无阴道炎症、有无宫颈炎症、有无菌尿症、有无胎膜早破以及产妇产前体温; ③ GBS的耐药性：GBS菌株对庆大霉素、复方新诺明、头孢呋辛、头孢嘧啶、卡那霉素、青霉素、氨苄青霉素、阿莫西林、替卡西林以及苯哇青霉素的敏感性和耐药性。

1.4统计学处理

采用SPSS 18.0统计学软件进行数据处理，均以计数资料用%表示，χ2检验，以α=0.05为检验标准，当P<0.05为差异有统计学意义，说明该因素与早产儿GBS带菌情况有明显的相关性。

2结果

2.1本组早产儿GBS带菌情况

本研究201例早产儿中，GBS阳性的30例，阳性率14.93%(30/201)；菌株直径3～4 mm，主要为Ⅲ型和Ⅰa型菌株，分别占56.67%(17/30)和26.67%(8/30)，其他如Ⅰb/c型、Ⅱ型、Ⅳ型、Ⅴ型等菌株共5株，占16.67%(5/30)。

2.2早产儿GBS带菌与产妇相关情况的关系

带GBS早产儿与产妇流产史、阴道炎症、宫颈炎症、菌尿症有明显的相关性，与产妇年龄、孕周、分娩方式、胎膜早破无明显的相关性，见表1。

表1　早产儿GBS带菌与产妇相关情况的关系

与同一指标的另一项比较，*P<0.05。

2.3本组30株GBS菌株药敏试验结果

对检出的30株GBS菌药敏试验结果显示, GBS菌株对青霉素和氨苄青霉素高度敏感，敏感性均为100%；其次为头孢嘧啶(96.67%)和头孢呋辛(93.33%); GBS菌株对苯哇青霉素的耐药性最高，为93.33%，其次为庆大霉素和卡那霉素，分别为86.67%和73.33%。见表2。

表2　本组30株GBS菌株药敏试验结果[n(%)]

3讨论

B族链球菌(GBS)是人类致病菌之一。这一观点早在1938年Fry在报告中就有所提及，他报告了3例感染GBS引起产后内膜炎的死亡病例。经过国内外学者[7-9]多年的研究，GBS是人类致病菌的观点得到进一步证实，可以引起新生儿败血症、新生儿脑膜炎、新生儿肺炎以及孕妇感染等。相关流行病学研究[10]显示，有10%～30%的孕妇伴有GBS感染情况，而其中有40%～70%的孕妇在分娩过程中会将GBS传递给新生儿[11-12]。GBS作为芽孢杆菌纲、乳杆菌目下的链球菌属，以妊娠期女性的下消化道和泌尿生殖道为主要的寄生场所，根据其表面表达的荚膜多糖(CPS)的特异性，可将其分为Ⅰa型、Ⅰb/c型、Ⅰa/c型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ性Ⅴ型和Ⅵ型等至少8种血清类型，而其中的Ia型和III型在人体感染中比较常见，是造成脑膜炎以及败血症的主要GBS菌型。GBS感染危害较大，如果不及时进行科学的治疗，可能引起患者死亡[13]。

国内学者研究报告[14-15]显示，妊娠孕妇GBS带菌率在7.5%～13%。目前国内关于新生儿GBS带菌情况方面的报告比较少，大多数学者都集中于研究妊娠期孕妇GBS带菌情况。本研究显示，201例早产儿中GBS阳性的30例，阳性率14.93%(其中菌株直径约3～4 mm，主要为Ⅲ型和Ⅰa型菌株)，阳性率略高于国内相关报告。这可能与本研究中采用的增菌肉汤以及多部位联合检测有关。本研究中，作者按照胰酪蛋白胨: 磷酸氢二钾: 氯化钠: 溴甲酚紫=30 g∶15 g∶10 g∶16 mg的比例配制GBS增菌肉汤增菌，能一定程度上提高GBS检出率，本配方在37 ℃孵育5 h前GBS培养液颜色显示为紫色，5 h后由紫色变为黄色，为GBS阳性。实验中作者在早产儿出生后15 min内于新生儿咽部、耳道部、脐根部、腋窝部和腹股沟部采集标本快速送检，标本的及时采集与多部位联合检测无疑提高了检测的阳性率[16-17]。

早产儿带菌情况与产妇相关情况具有一定的相关性[18]。本研究中，产妇有流产史与无流产史、有阴道炎症与无阴道炎症、有宫颈炎与无宫颈炎、有菌尿症与无菌尿症早产儿GBS带菌情况比较，χ2值分别为6.15、5.68、11.41、5.89(P均<0.05)，提示早产儿GBS带菌与产妇流产史、阴道炎症、宫颈炎症、菌尿症有明显的相关性，有以上症状的早产儿GBS带菌率高；产妇年龄38岁或38岁以上与38岁以下、孕周低于32周与高于32周、自然分娩与剖宫产、有胎膜早破与无胎膜早破情况早产儿GBS带菌情况比较，χ2值分别为0.43、0.49、2.74、0.26(P均>0.05), 提示孕妇年龄、孕周、分娩方式、有无胎膜早破与早产儿GBS带菌情况无明显的相关性[19-20]。

近年来，随着各种抗菌素的大量使用，GBS耐药性有明显的增高趋势。有研究显示，在美国及加拿大地区, 1998年GBS对红霉素的耐药性为7%, 到2001年上升到25%，到2003年已经上升到37%；而在中国东部沿海地区，GBS对红霉素的耐药性超过了40%, 对林可霉素的耐药性也超过了25%。本研究中对检出的30株GBS菌药敏试验结果显示，GBS菌株对青霉素和氨苄青霉素高度敏感，敏感性均为100%，其次为头孢嘧啶(96.67%)和头孢呋辛(93.33%); GBS菌株对苯哇青霉素的耐药性最高，为93.33%, 其次为庆大霉素和卡那霉素，分别为86.67%和73.33%。临床上，对于早产儿GBS感染者，应该根据药敏试验合理使用抗生素，提高治疗效果[21-22]。

综上所述, GBS可能是该地区新生儿感染的重要致病菌，新生儿GBS带菌与产妇的流产史、阴道炎症、宫颈炎症、菌尿症有很大的相关性；采用增菌肉汤、多部位联合检测以及使用改良GBS菌落显色实验方法可以提高GBS检出率。

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收稿日期:2015-09-16