细菌培养法与聚合酶链式反应法对细菌性阴道炎辅助诊断的价值

邓波，邱振华，叶小媚

（1.广东省高州市人民医院 检验科，广东 高州 525200；2.广东省高州市第二人民医院 检验科，广东 高州 525200）

细菌性阴道炎是妇科临床上十分常见的病症类型，阴道菌群失调导致其他致病菌大量繁殖是该病症的主要治病原因。曾有相关研究显示该病症临床发病率较高，若未能得到有效控制则极有可能导致炎症入侵子宫或盆腔，甚至会导致患者不孕[1]。尽早确诊并予以积极治疗是提高该病症治疗效果的关键。本次研究将以随机选取本院2013年12 月-2015 年5月接受治疗的120例细菌性阴道炎患者为研究对象，探究细菌培养法与PCR法对细菌性阴道炎的辅助诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取本院2012年12月-2015年5月接受治疗的120例细菌性阴道炎患者为研究对象，所有患者经临床确诊为细菌性阴道炎，均进行阴道分泌物采集，对120例患者分别采用细菌培养检验法和聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）检验法。患者年龄22～43岁，年龄中位数32.5岁。所有患者均存在白带增多、异味以及外阴瘙痒等临床症状。排除标准：处于妊娠期或哺乳期的患者；存在严重其他脏器疾病的患者；半个月内曾进行过抗感染治疗的患者；半个月内有过性生活的患者以及不能配合医护人员完成本次研究的患者。

1.2 方法

细菌培养法：将待检标本取出，放置到专用培养基内，在37℃二氧化碳（CO2）孵箱内培养48 h。待菌落长成后，将其中呈半透明、滴露状及灰色并光滑的菌群取出。并依据相关检测标准进行生化鉴定。

聚合酶链式反应检验法：采集1 000 μl含有无菌盐水的阴道分泌物，将其放置在离心管内进行离心处理，离心时间为10 min，采用12 000 r/ min。离心处理完成后则可将上清液去除，之后把碱性裂解液加入到沉淀当中，震荡混匀，放置在干式金属恒温仪内进行孵育，干式金属恒温仪稳定设定为60℃，孵育时间控制在10～15 min，之后采用12 000 r/min的转速进行离心，离心时间为10 min。将上清液取出制作脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid, DNA）模板，并进行PCR扩增，在进行扩增过程汇总要进行阴性对照。向其中加入双蒸馏水、反应缓冲剂、引物及DNA模板等，反应条件设定为94℃ 60 s，37℃ 60 s，72℃ 120 s。之后采用PCR仪进行循环。

1.3 判断标准

①细菌培养阳性评定标准：培养基上有典型菌落，生化鉴定为目的菌落则为阳性；②PCR法阳性评定标准：条带宽度＜1 mm，边缘整齐，在预期碱基大小范围内，背景上无药斑及引物二聚体，若出现超出预期碱基大小范围的其他条带均为假阳性[2]。阳性率=有病例数/总病例数×100%。

1.4 统计学方法

本次研究中所涉及数据均应用SPSS 19.0软件进行统计学分析。计数资料以百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验；等级资料采用Wilcoxon秩和检验，两两比较采用Nemenyi法。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者检查结果阳性率比较

PCR法检出阳性率明显优于细菌培养法，两种方法检测阳性率比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者检查结果阳性率比较 例

2.2 两种检验方法所得阳性菌分布情况比较

两种检测方法所得阳性菌中尤以阴道加德纳菌的检出率最高，见表2。

表2 两种检验方法所得阳性菌分布情况比较 例（%）

3 讨论

健康女性阴道内存在多种正常菌群，若阴道内pH值出现异常（低于3.8或超过4.4）则可能致使菌群失调，从而导致正常菌群成为致病菌。相关临床研究显示导致女性出现阴道感染最为常见的致病菌通常为肠球菌、阴道加德纳菌、葡萄球菌以及链球菌等[3]。本次研究结果也显示阳性菌中尤以阴道加德纳菌的检出率最高。早期进行检测确定病菌群对提高细菌性阴道炎的临床治疗效果、改善患者预后质量均具有积极意义。目前临床用于细菌性阴道炎辅助诊断的方法多以细菌培养法、PCR法为主。

细菌培养法曾是临床诊断细菌性阴道炎的金标准，但该种检测方法操作复杂且对检验环境的要求较高，检验时间较长，故近年来逐渐被PCR法所取代。大量临床研究结果证明PCR法的检验灵敏度及特异性更高，且操作简单，检验时间短，更具临床推广应用价值[4-5]。上述研究结果在本次研究中也有明显体现，本次研究结果显示PCR法的临床检出阳性率为81.67%明显高于细菌培养法。上述研究结果证明细菌培养法与PCR法中后者的检验准确率更高，其对于细菌性阴道炎病的辅助诊断价值更为理想，且该种检测方法更为方便快捷，值得在细菌性阴道炎的临床诊断工作中加以推广应用。

[1]刘雪梅, 唐正宇, 谢良依. 应用多重PCR检测细菌性阴道炎支原体[J]. 当代医学, 2013, 29(12): 147-148.

[2]景晓敏. PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的对比研究[J]. 医药论坛杂志, 2014, 35(10): 84-85.

[3]邓石雄, 刘映云. 细菌培养法与PCR法对细菌性阴道炎辅助诊断的价值[J]. 海南医学, 2015, 9(14): 2164-2165.

[4]姚虹, 吕治, 阎东辉. 实时荧光定量PCR检测阴道加德纳菌的方法及其临床应用[J].中国医刊, 2013, 48(11): 70-72.

[5]华玲. PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果对比 [J]. 中外医学研究, 2015, 17(2): 50-51.