1例微粒子化学发光免疫技术测定梅毒螺旋体抗体假阳性分析

于淼琛，程艳杰

(大连医科大学附属第一医院检验科，辽宁大连 116011)



·个案与短篇·

1例微粒子化学发光免疫技术测定梅毒螺旋体抗体假阳性分析

于淼琛，程艳杰△

(大连医科大学附属第一医院检验科，辽宁大连 116011)

化学发光； 微粒子； 梅毒螺旋抗体

近年来，梅毒假阳性报道日益增多，给患者及家属带来很多困扰，容易引起家庭纠纷及医疗纠纷。笔者用微粒子化学发光免疫技术测定梅毒螺旋体抗体假阳性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 女，21岁，5年前体检发现先心病(动脉导管未闭)。心脏超声：多普勒探及大动脉水平连续性左向右分流，门诊就诊建议可择期手术。既往史：否认肝炎、心脏病史，否认高血压，否认手术、创伤、输血史。无化学性物质、放射性物质、有毒物质接触史，无吸毒史，无吸烟、饮酒史，无冶游史。无婚育史。否认家族性遗传病、传染病史。

1.2 仪器与试剂 本次试验微粒子化学发光免疫技术采用美国雅培公司全自动微粒子学发光仪Architect I-2000 System 及配套试剂、校准品、质控品；金标方法试剂购自杭州艾博生物医药；酶联免疫吸附测定(ELISA)采用北京万泰生物药业有限公司产品和珠海丽珠生物药业有限公司产品；快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)采用上海科华生物技术有限公司产品；梅毒明胶颗粒凝集试验(TPPA)试剂购自日本富士株式会社；微粒子化学发光免疫技术采用罗氏自动电化学发光免疫分析系统Cobas 601及配套试剂、校准品、质控品。

1.3 方法 清晨空腹以真空采血管按要求定量采血检测血常规、生化指标、梅毒螺旋体抗体及自身免疫疾病相关指标，按常规操作分离血清，无溶血、乳糜及黄疸等。

2 结 果

实验室检测结果：血常规、生化肝、肾功能指标正常；雅培微粒子化学发光免疫技术测定梅毒螺旋体抗体阳性(双测试信号强度与临界值之比S/CO值分别9.90、9.95)；金标方法复查梅毒螺旋体抗体结果为阴性。

检测结果为临床少见模式，引起注意。笔者用金标方法复查梅毒螺旋体抗体，结果为阴性；再用ELISA检测梅毒螺旋体抗体，结果显示梅毒螺旋体抗体阴性，双孔测试信号强度与临界值之比S/CO值分别为：万泰ELISA为0.071、0.073；丽珠ELISA为0.059、0.057；RPR阴性；TPPA阴性；罗氏Cobas 601阴性，双测试信号强度与临界值之比S/CO值分别0.84、0.85；检测结果与金标方法检测结果基本一致。

抗核抗体及抗核抗体滴度均为阴性、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、免疫球蛋白E、免疫球蛋白G亚型4指标正常；补体成分C3、补体成分C4指标正常；抗链球菌溶血素O、类风湿因子、C反应蛋白指标正常。

3 讨 论

近年来，梅毒假阳性报道日益增多，给患者及家属带来很多困扰，容易引起家庭纠纷及医疗纠纷。有文献报道，老年人(60岁以上)、风湿免疫系统性疾病、恶性肿瘤可作为独立影响因素而造成梅毒血清学生物假阳性[1]。而此患者年仅21岁，经入院系列检查及免疫检测指标分析，无风湿免疫系统性疾病及恶性肿瘤，与临床及患者沟通后,发现患者无梅毒临床症状、不洁性生活史和既往史。进行跟踪调查，也未出现梅毒症状。为慎重报告梅毒螺旋体抗体结果，采用金标法、ELISA双试剂盒(不同厂家)、RPR、TPPA、罗氏电化学微粒子发光免疫技术等5种方法复检，其检测结果均为阴性。因此，认为雅培化学微粒子发光免疫技术检测结果与临床症状不符或疑似假阳性。

目前，国内检测梅毒螺旋体抗体的主要方法包括：ELISA、RPR、TPPA、微粒子化学发光免疫技术等。其中，雅培公司的全自动免疫分析仪采用微粒子化学发光免疫技术，其测定梅毒螺旋体抗体原理为：标本与包被有重组抗原(TpN15、TpN17和TpN47)的微粒子及稀释液混合后，标本中的抗体同微粒子上包被的梅毒抗原结合，通过清洗程序后，加入吖啶酯标志物，洗涤后加入预激发液和激发液后，测定反应液的相对发光强度，根据临界值判断样品中是否含有梅毒螺旋体特异性抗体[2]。

用基因重组表达得到多肽抗原，再用人血清清蛋白与之联接，合成后的多肽一般不作提纯，直接作为试剂抗原使用[3]。如片段过长，非特异性反应增高，即出现不符合；同时微粒子化学发光免疫技术所用的重组抗原可能包含引起不符合的序列使检测结果为不符合。此外，重组抗原存在不纯问题，且使用人血清清蛋白，增加了意外假阳性抗原位点的可能[4]。患者标本中，有可能含有干扰免疫测定导致不符合的干扰因素，干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高水平的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、交叉反应物质等[5]。

该样本用微粒子化学发光免疫技术检测结果呈阳性，与其他检测方法均不符，实属少见。在排除外在影响因素情况下，主要考虑患者样本自身由交叉反应物质、某些自身抗体或试剂因素造成，即血清中存在与固相和液相交叉反应的物质。但是笔者排除了类风湿因子、自身抗体、甲胎蛋白的影响，具体原因尚不清楚，有待进一步研究。此类报告应结合临床症状、是否有不洁性生活史及既往史等现实状况，慎重审发报告。如若错发阳性结果，会给患者及家人带来极大伤害，应引起注意。

[1]冯文莉,刘兵,高谨,等.住院患者梅毒血清学生物假阳性的相关因素分析[J].中国药物与临床,2015,15(6):815-818.

[2]郭慧娟,尚晓泓.微粒子化学发光法检测梅毒螺旋体抗体阳性结果分析[J].检验医学与临床,2011,8(20):2444-2445.

[3]傅均星,周潇,曾铁兵.基因重组抗原ELISA法在梅毒螺旋体抗体检测中的评价[J].南华大学学报(医学版),2004,32(3):305-306.

[4]王柳溪.TP-ELISA法检测老年人梅毒螺旋体抗体易产生假阳性原因分析[J].医学理论与实践,2008,21(9):1085-1086.

[5]Ismail AA.A radical approach is needed to eliminate interference from endogenous antibodies in immunoassays[J].Clin Chem,2005,51(1):25-26.

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.22.062

C

1673-4130(2016)22-3235-02

2016-04-17

2016-06-26)

△通讯作者,E-mail：2845662180@qq.com。