家畜布氏杆菌病的检疫方法

孟庆彤　王美玲　辽宁省彰武县动物疫病预防控制中心　123200



家畜布氏杆菌病的检疫方法

孟庆彤王美玲辽宁省彰武县动物疫病预防控制中心123200

布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的人畜共患传染病。该病在家畜中以羊、牛、猪最易感，造成患病家畜生殖器官和胎膜发炎，引起流产、不育和各种组织病变，患病公畜则表现为关节炎和睾丸炎。人感染后的表现较为复杂，大多出现波浪热、关节疼痛、睾丸炎及子宫内膜炎等症状。

1　流行病学

该病的传染性极强，易感动物范围很广，羊、牛、猪、牦牛、鹿、骆驼、野猪、马、狗、狐、狼、野牛、野兔、猴、羚羊、鸡、鸭及一些啮齿动物均能感染，而羊、牛、猪最易感。传染源是病畜及带菌动物，主要感染途径是消化道，即通过污染的饲料与饮水而感染，也能通过皮肤、结膜和交配等感染。人接触病畜及其产品，如接产、饮用病畜生乳或制品、食用未经煮透的病畜肉等都能感染。

2　活体检疫

母畜最显著的症状是流产，可发生于妊娠期任何阶段，但牛常发生于怀孕后的6～8个月、羊3～4个月、猪1～ 3个月。流产前精神和食欲不振，阴唇和乳房肿胀，阴道黏膜红肿，流出不洁的分泌物。流产后胎衣往往停滞，胎儿死亡，常发生子宫炎，长期不愈，屡配不孕，失去生育能力。公畜发病的症状是睾丸炎和副睾炎。

3　肉尸检疫

该病的明显病变在子宫、胎儿及胎衣。胎衣呈黄色胶冻样浸润，有的部位覆有纤维素片和脓液，有的增厚并有出血斑点。胎儿呈现败血症变化。胃特别是第四胃有淡黄色或白色黏液絮状物。淋巴结、脾脏和肝脏呈现不同的肿胀，出现散在坏死灶。公畜睾丸和副睾有炎性坏死灶和化脓灶。该病的明显症状是流产，但是弯杆菌病、胎儿滴虫病、钩端螺旋体病、乙型脑炎、衣原体病、猪细小病毒病和蓝耳病都能发生流产，因此必须通过实验室检验与之鉴别。

4　实验室检验

布氏杆菌病检疫的检验方法有病原学检查和血清学检查两种。动物检疫常采用的血清学方法有虎红平板凝集试验、乳牛布氏杆菌病全乳环状试验、试管凝集试验和补体结合试验等。前两者主要用于动物检疫的筛选，后两者主要用于布氏杆菌病的定性。

（1）虎红平板凝集试验。适用于各种家畜布氏杆菌病筛选试验。出现阳性反应的血清样品，应根据情况进行试管凝集试验或补体结合试验，或布氏杆菌病其他诊断试验确定。材料准备。准备好虎红抗原 （由兽医生物药品厂供应），按说明书使用。抗原宜在4～15℃冰箱保存，不能冻结。其外观应呈玫瑰红色的悬浮液，有凝集者弃之。使用前充分摇匀，置室温中30～60分钟。标准阴、阳性血清由兽医生物药品厂供应。被检血清须新鲜、无溶血、无腐败现象，保存期不超过15日。

实验方法。取一洁净的玻璃板，画成20mm×20mm的方格。每一格分别滴入被检血清约0.03mL，然后在被检血清旁滴加虎红抗原0.0mL（使用时先将抗原瓶摇动，使之均匀悬浮），用牙签或小棒搅动血清和抗原，使抗原液混合。于4分钟内观察结果。

结果判定。如果在4分钟内出现肉眼可见的凝集现象者判为阳性，否则判为阴性。

（2）乳牛布氏杆菌病全乳环状试验（MRT）。该方法适用于乳牛场泌乳母牛布鲁氏菌病的监测和筛选试验。受检乳必须为新鲜的全脂乳。对患有乳房疾病的乳汁、加工处理后的牛乳、腐败变质和冻结过的乳不能使用。采集乳样时应将母畜的乳房用温水洗净，再用纱布擦干，然后挤于洁净的器皿中。夏季应于当天检查，若保存于2℃，7天内仍可使用。

材料准备。事先准备好布氏杆菌病全乳环状抗原（由兽医生物药品厂供应）。目前我国生产的全乳环状反应抗原有两种，一种是苏木素染色抗原，呈蓝色；另一种是四氮唑染色抗原，呈红色。试验结果均按乳脂和乳柱的颜色判定。其他器材包括凝集试验管、试管架、吸管、微量加样器和水浴箱等。

实验方法。取乳样1mL加入灭菌凝集试验管。将全乳环状抗原充分摇荡均匀后取1滴（约50uL）加入乳样中充分混匀，置37～38℃水浴中60分钟。取出后勿振荡，立即按乳脂和乳柱的颜色进行判定。

结果判定。乳柱上层乳脂形成红色或蓝色环带、乳柱白色、分界分明的为强阳性反应。乳脂层的环带虽呈红色或蓝色，但不显著，乳柱略带颜色为阳性反应。乳脂层的环带颜色较浅，但比乳柱颜色略深为弱阳性反应。乳始层环带不明显，与乳柱分界不清，乳柱不褪色为疑似反应。乳柱上层无变化，乳柱颜色均匀为阴性反应。脂肪较少或无脂肪的乳样呈阳性反应时，菌体呈凝集现象下沉管底，判定时以乳柱的反应为准。

由于布氏杆菌病是人畜共患病，是威胁畜牧或兽医从业者的一种严重的职业病，必须引起重视，在生产中要做好该病的检疫工作，及时淘汰感染和发病动物，并注意做好自身的防护工作。