顶空气相色谱法测定琥珀酸索非利新原料药中残留溶剂含量

杨 晨， 任凤英， 王 炜， 黄 啸， 苟小军， 陈 林， 李江红， 石克金

(成都大学 四川抗菌素工业研究所 抗生素研究与再评价四川省重点实验室， 四川 成都 610052)

顶空气相色谱法测定琥珀酸索非利新原料药中残留溶剂含量

杨 晨， 任凤英， 王 炜， 黄 啸， 苟小军， 陈 林， 李江红， 石克金

(成都大学 四川抗菌素工业研究所 抗生素研究与再评价四川省重点实验室， 四川 成都 610052)

采用Agilent DB-624毛细管柱色谱柱，FID检测器，DMF为溶剂，建立了顶空气相色谱法同时测定琥珀酸索非利新原料药中乙醇、丙酮、乙酸乙酯、异丙醚、二氯甲烷、甲苯6种残留溶剂的分析方法.结果显示，6种残留溶剂在各自的浓度范围内呈现良好的线性关系(分别为r=0.9997～0.9999，n=6)，最低检出限范围为0.147～0.871 μg；平均添加回收率为98.64%～101.79%(RSD为0.26%～1.58%,n=3).方法简单、灵敏、可靠，适用于琥珀酸索非利新原料药中残留溶剂的分析检测.

气相色谱法；顶空采样；残留溶剂；琥珀酸索非利新

0 引 言

琥珀酸索非利新(solifenacinsuccinate)，化学名为((3R)-1-氮杂二环[2.2.2]辛烷-3-基(1S)-1-苯基-3,4-二氢异喹啉-2-(1H)-羧酸酯琥珀酸盐)，商品名为卫喜康，是一种选择性毒蕈碱(M)受体拮抗剂，适应症为治疗尿频与尿失禁等[1-2].由于琥珀酸索非利新原料药在制备过程中使用了有机溶剂，如乙醇、丙酮、乙酸乙酯、异丙醚、二氯甲烷、甲苯等，而根据《中国药典》2010年版二部附录VIII P残留溶剂测定法的指导原则和人用药品注册技术规范国际协调会(ICH)提出的残留溶剂指导原则，这些溶剂均被列为药品必须限制的第二、三类有机溶剂[3].因此，为保证药品质量和用药安全，对琥珀酸索非利新原料药进行有机溶剂的残留量检测十分重要[4-5].本实验采用气相色谱顶空进样系统对琥珀酸索非利新残留溶剂进行分析和测定，所建方法简单灵敏，重现性好，准确度高，对控制药品质量可起到关键作用.

1 仪器、材料和方法

1.1 仪 器

实验所用仪器包括：配备火焰离子化检测仪(FID)检测器的Agilent 7890A型气相色谱仪(含Agilent G1888顶空进样器，美国安捷伦公司)；Sartorius BP211D型分析天平(德国赛多利斯)；KQ-100B型超声波清洗仪(昆山超声仪器有限公司).

1.2 材 料

实验所用材料包括：琥珀酸索非利新(批号，140901、140902、140903)，由成都大学四川抗菌素工业研究所抗感染药物实验室合成，纯度≥99.0%；其余所用试剂均为分析纯，由成都市科龙化工试剂厂生产.

1.3 方 法

1.3.1 色谱条件.

实验的色谱条件为：色谱柱为Agilent DB-624毛细管柱色谱柱(30 m×0.53 mm×3.0 μm)；氢火焰离子化检测器(FID)，温度为250 ℃；程序升温，50 ℃保持5 min，然后以10 ℃·min-1的速率升温至220 ℃；分流进样，分流比为5∶1，进样口温度为200 ℃；载气为氮气，流速为3.0 mL·min-1；顶空进样，顶空平衡温度为80 ℃，顶空平衡时间为20 min，定量环温度为90 ℃，转移管温度为100 ℃；进样体积为1.0 mL.

1.3.2 对照品溶液配制.

分别取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、异丙醚、二氯甲烷和甲苯各适量，精密称定，加DMF配制成贮备液.分别取各贮备液适当体积混合后，用DMF稀释成每1 mL中含乙醇0.25 mg、 丙酮0.25 mg、 乙酸乙酯0.25 mg、 异丙醚0.10 mg、 二氯甲烷0.03 mg、 甲苯0.0445 mg的溶液，制得对照品溶液.实验时，精密量取对照品溶液2 mL，置于10 mL顶空瓶中，密封.

1.3.3 供试品溶液配制.

分别取3批样品约0.1 g，精密称定，置10 mL顶空瓶中，精密加入DMF 2.0 mL使之溶解，密封，制得供试品溶液.

2 结果与讨论

2.1 分离条件选择

实验中，采用了3种不同极性色谱柱(HP-5，PEG-20M, Agilent DB-624)对6种残留溶剂进行考察，结果发现，琥珀酸索非利新原料药中残留溶剂及对照溶液采用DB-624色谱柱后分离效果好，对照溶液与样品中残留溶剂都能达到基线分离，结果如图1所示.

1.乙醇；2.丙酮；3.二氯甲烷；4.异丙醚；5.乙酸乙酯；6.甲苯

图1 对照溶液(A)与样品(B)色谱图

2.2 线性关系、检出限及定量限

分别取乙醇、丙酮、乙酸乙酯、异丙醚、二氯甲烷和甲苯各适量，精密称定，加DMF配制成贮备液.分别取各贮备液适当体积混合后，用DMF稀释成每1 mL中含乙醇1.00 mg、丙酮1.00 mg、乙酸乙酯1.00 mg、异丙醚0.40 mg、二氯甲烷0.12 mg和甲苯0.178 mg的溶液，制得标准溶液I.精密量取标准溶液I，用DMF依次稀释2倍、4倍、10倍、20倍和40倍，得标准溶液II、III、IV、V和VI.精密量取标准溶液I、II、III、IV、V、VI各2 mL，分别置于10 mL顶空瓶中，密封，按“1.3.1”项下色谱条件测定.以对应溶剂的浓度和峰面积计算线性关系.将对照品溶液(标III)多次稀释，并在以上色谱条件下进行测定，以信噪比为3时，计算最低检出限(LOD),以信噪比为10时，计算定量限(LOQ)，结果见表1.

表1 6种溶剂的线性关系、检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)

残留溶剂线性方程r线性范围/μg·mL-1LOD/μgLOQ/μg乙 醇丙 酮乙酸乙酯异丙醚二氯甲烷甲 苯y=1687x+6.8732y=4464.9x-16.883y=3232.4x-8.2413y=17206x-20.573y=1407.4x-0.611y=3746.7x-1.11970.99980.99970.99990.99980.99980.999925.06～1002.225.18～1007.424.97～998.710.05～402.13.01～120.44.46～178.50.1550.2830.3930.1470.8710.5630.4750.8051.2140.5132.6251.886

2.3 精密度实验

分别精密量取对照品溶液(标III)2 mL，置于10 mL顶空瓶中，密封，按“1.3.1”项色谱条件顶空进样6次.结果测得：乙醇RSD为1.03%，丙酮RSD为0.73%，乙酸乙酯RSD为0.87%，异丙醚RSD为0.98%，二氯甲烷RSD为1.63%，甲苯RSD为0.73%.结果表明，该色谱条件下仪器精密度良好.

2.4 回收率实验

称取批号140901样品0.1 g，精密称定，置于10 mL顶空瓶中，精密加入对照品溶液2 mL，密封，超声10 min使溶解，计算回收率，结果见表2.

表2 回收率实验结果

(续前表)

残留溶剂原有量/μg加入量/μg测得量/μg回收率/%平均回收率/%RSD/%异丙醚01616.33102.07 01616.21101.34101.420.61 01616.13100.84 02019.5197.57 02019.7698.7998.641.01 02019.9199.55 02423.5298.02 02423.6898.6698.931.09 02424.03100.12二氯甲烷04.84.7999.69 04.84.7498.7798.870.79 04.84.7198.15 065.9098.27 065.9198.5298.850.80 065.9999.75 07.27.1999.79 07.27.1098.5699.731.14 07.27.26100.82甲 苯07.127.14100.25 07.127.13100.1899.860.62 07.127.0699.14 08.98.8999.94 08.98.8599.4799.760.26 08.98.8999.88 010.6810.68100.03 010.6810.75100.62100.080.52 010.6810.6499.59

2.5 样品测定

精密称取3批样品(批号，140901、140902、140903)0.1 g置10 mL顶空瓶中，精密加入DMF 2.0 mL，混匀，密封，按“1.3.1”项色谱条件顶空进样，记录色谱图和峰面积，以外标法计算3批样品中的残留溶剂含量，结果见表3.

表3 琥珀酸索非利新原料药残留溶剂的分析结果

注：“..."表示未检出.

表3数据显示，3批样品中的残留溶剂含量均在限度以下.

3 结 论

本研究建立了采用顶空气相色谱法测定琥珀酸索非利新原料药中6种残留溶剂的方法.方法简便快速、灵敏准确，可完全满足对琥珀酸索非利新原料药进行质量控制的需要.

[1]陈潇雨.琥珀酸索利那新治疗前列腺电切术后膀胱过度活动症的临床观察[J].现代泌尿外科杂志,2014,19(10):670-672.

[2]呙林杰,李成龙,汪涛,等.琥珀酸索利那新片治疗和预防双J管患者下尿路症状[J].长江大学学报(自科版),2013,10(21):12-13.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京:中国医药科技出版社,2015.

[4]肖林霞,李宏伟,于红光,等.气相色谱法测定宠物饲料中丙三醇、丙二醇、二甘醇研究[J].成都大学学报(自然科学版),2013,32(2):128-130.

[5]鲁刚,宗万里.基于毛细管气相色谱法的花色蛤中扑草净残留量测定[J].成都大学学报(自然科学版),2015,34(4):336-338.

Determination of Residual Solvents in Raw Material Drug of Solifenacin Succinate by Head-space Gas Chromatography

YANGChen,RENFengying,WANGWei,HUANGXiao,GOUXiaojun,CHENLin,LIJianghong,SHIKejin

(Antibiotics Research and Reevaluation Key Laboratory of Sichuan Province,Sichuan Industrial Institute of Antibiotics, Chengdu University, Chengdu 610052， China)

The paper is going to establish the head-space gas chromatography for the determination of residual solvents of ethanol,acetone,ethyl acetate,isopropyl ether,dichloromethane,toluene in raw material drug of solifenacin succinate.Agilent DB-624 capillary column is used,with FID as detectorand DMF as the solvent.The results show that linear responses are obtained for the 6 residual solvents in their respective concentration ranges (r=0.9997～0.9999,n=6),and the limits of detection are 0.147～0.871 μg.The average recoveries are 98.64%～101.79%(RSD=0.26%～1.58%,n=3).The conclusion drawn from the paper is that the method is simple,sensitive,and accurate for the analysis and determination of residual solvents in raw material drug of solifenacin succinate.

Gas Chromatography(GC);head-space sampling;residual solvents;solifenacin succinate

1004-5422(2016)04-0321-03

2016-10-18.

成都大学校科技发展基金(2015XJZ08)资助项目.

杨 晨(1983 — )， 男， 硕士， 助理研究员， 从事药物质量控制技术研究.

O657.7+1；TQ460.72

A