使用快速实验室诊断技术进行病原体检测的价值与存在的问题

张 鑫 杨广燕 韩声迁 耿 霞

快速实验室诊断技术主要是指免疫渗滤试验法、免疫层析试验法等固相膜免疫检测法，其内容涉及细菌学、免疫学及分子生物学等范畴。快速实验室诊断技术主要用于检测患者呼吸系统、消化系统、泌尿系统及生殖系统等系统所感染的细菌、病毒、支原体、寄生虫等病原体[1]。随着社会的发展、医学技术的进步，我国居民所感染的细菌、病毒、支原体、寄生虫等病原体的种类也在逐渐增多。快速确认患者感染的病原体有利于临床医师准确地判定其病情，为其制定合理的治疗方案。目前，使用快速实验室诊断技术诊断传染病已经成为医学工作者研究的重点。近几年，我实验室使用快速诊断技术对感染性疾病患者进行了病原体检测，获得了很好的效果，显著降低了患者病情的误诊率及漏诊率。本文主要对使用快速实验室诊断技术的原理、优点及存在的问题进行了总结，以供相关医学工作者参考和借鉴。

1 胶体金免疫层析快速诊断技术

胶体金免疫层析快速诊断技术能将特异性抗原或抗体以条带样固定在硝酸纤维膜上，将乳胶微球等可显色的标记物吸附在结合垫上。在使用胶体金免疫层析快速诊断技术进行病原体检测时，检测人员需将样品加到试纸条的一端，使样品能够通过毛细作用前移，并溶解固化，与结合垫上的标记物形成复合物，移动至固定抗原或抗体区域，发生特异性结合，并被截留、显色[2]。胶体金免疫层析快速诊断技术具有操作简便、检验的速度快、灵敏度和特异度高、试剂和样品的用量较小等优点[3]。使用该技术进行病原体检测一般在10～15分钟之内便可完成，其检测结果直观，可作为临床医师诊断患者病情的直接依据[4]。因此，该检测方法在临床上得到了较快的发展和广泛的应用。

胶体金免疫层析快速诊断技术在临床上可用于定性诊断病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫病等传染性疾病及肿瘤，也可用于定量诊断机体的激素水平、心血管疾病中心肌酶标志物的水平等。该技术可用于进行流行病普查或快速诊断急重症。

2 蛋白质组快速诊断技术

2.1 蛋白质组双向电泳技术

蛋白质组双向电泳技术主要是将样品通过蛋白质溶解与细胞裂解技术将非蛋白质成分去除，并依据不同的蛋白质电点特性进行分阶段分离的一种技术。其中第一相为等电聚焦电泳，第二相为基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。该技术是一项优质的二维分离技术。临床医师可依据不同的双向电泳技术建立细胞或特定组织的双向电泳数据库和蛋白质组图谱，并进行图像分析[5-6]。

2.2 电喷雾质谱（ESI-MS）技术与质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术

ESI-MS与MALDI-TOF-MS是一类“软电离”技术，可在电离的过程中有效地保留分子的完整性，是一种比较理想的对蛋白质进行鉴定的核心检测技术。该技术可依据电场将液相多肽样品进行离子化处理，并利用基质吸收激光的能量，使固相多肽样品离子化，从而测得肽段离子参数，得到相对完整的蛋白质分子量，实现对蛋白质的鉴定[7-8]。

蛋白质组双向电泳技术和ESI-MS与MALDI-TOF-MS技术均利用了大多数疾病的患者都会出现特异性蛋白生物标志的特点来诊断疾病。使用这两项技术进行病原体检测的灵敏度和特异度较高。该技术可用于诊断前列腺癌、卵巢癌、白血病、心血管疾病、肝胆疾病及肺结核等疾病。

3 使用快速实验室诊断技术进行病原体检测时存在的问题

在使用快速实验诊断技术检查病原体时，检测仪器的质量、试纸的质量、检测人员的技术都严重影响着检测的结果。其中任何一项因素出现偏差，都有可能导致检测结果出错。因此，相关的医疗卫生部门应尽量选择质量较好的仪器和设备进行病原体检测。同时，相+ 关的医疗卫生部门还需要定期对检测人员进行培训和考核，以提高其专业素质及对检测知识的认知水平，能够严格遵守相关的操作规范和流程完成检测工作，从而有效地提高检测结果的准确率[9-10]。在采用快速实验室诊断技术对患者进行相关的检测时，应根据为其采集样品基质形式（如痰液、血清、血液、尿液及固体组织等）的不同应用不同的试纸条、样品垫及结合垫等检测物品，以免样品的粘稠度及酸碱度对检测结果造成影响。

4 小结

快速实验室诊断技术是临床上常用的诊断技术，在进行病原体检测方面具有较高的准确率。临床实践证实，使用快速实验室诊断技术进行病原体检测能快速确认患者感染的病原体，有利于临床医师准确地判定其病情和为其制定合理的治疗方案。同时，使用快速实验室诊断技术检测病原体还具有操作简单、得出实验结果的速度快等优点。目前，临床上主要使用胶体金免疫层析快速诊断技术、蛋白质组快速诊断技术等实验室快速诊断技术进行病原体检测。快速实验室诊断技术的应用在一定程度上缓解了基层医院诊断疾病困难、误诊率高及漏诊率高等问题。需要注意的是，用快速实验室诊断技术进行病原体检测时，可受到检测仪器的质量、试纸的质量、检测人员的技术等因素的影响。相关的医疗卫生部门应尽量选择质量较好的仪器和设备进行病原体检测，并定期对检测人员进行培训和考核，以有效地提高检测结果的准确率。

总之，胶体金免疫层析快速诊断技术、蛋白质组快速诊断技术等快速实验室诊断技术在进行病原体检测方面具有较高的应用价值，值得在临床上推广应用。

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