FLT3基因突变在急性早幼粒细胞白血病中的临床意义

许惠丽

·临床医学·

FLT3基因突变在急性早幼粒细胞白血病中的临床意义

许惠丽

目的探析FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因突变在急性早幼粒细胞白血病(APL)中的临床意义。方法40例APL患者骨髓标本,使用DNA酶切、RT-PCR以及PCR等技术检测FLT3基因D835突变(FLT3-D835)和FLT3基因内部串联重复(FLT3-ITD),并分析其与患者临床疗效和表现的关系。结果APL患者外周血白细胞(WBC)的阳性率,FLT3-ITD突变型患者高WBC(HW)比例明显高于FLT3-ITD野生型(P＜0.05)；FLT3-D835突变型患者HW比例与FLT3-D835野生型比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论FLT3-ITD突变型的所有患者,都具备高外周血WBC计数,但在FLT3-ITD野生型患者中,只有少数患者是高外周血WBC计数。

急性早幼粒细胞白血病；FMS样酪氨酸激酶3；基因突变

早幼粒细胞白血病-维甲酸受体α(PML-RARα)融合基因被认为是APL发生的重要机制,选用全反式维甲酸(ATRA)靶向治疗能使大部分APL患者获得完全缓解(CR),若对ATRA进行单独使用,则不能让全部APL患者获得长期无病生存［1］。所以,本文通过分析FLT3-D835、FLT3-ITD突变和APL患者临床表现与治疗关系,阐述FLT3基因突变在APL中的临床意义,现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年1～12月本院收治的40例APL患者为研究对象,其中男24例,女16例,年龄15～57岁,平均年龄(30.12±9.25)岁。通过骨髓细胞形态学检查,可确诊为APL。按照FLT3突变可分为FLT3-ITD野生型(32例)与FLT3-ITD突变型(8例),同时还可分FLT3-D835野生型(32例)与FLT3-D835突变型(8例)。外周血WBC计数≥10×109/L为HW,WBC＜10×109/L为低WBC(LW)；早幼粒细胞和骨髓原细胞之和≥80%为高含量(HB),＜80%为低含量(LB)；出血症状可分为0、1、2级,0、1级又合称为A级(BA),2级则称为B级(BB)。

1.2方法 分析FLT3-ITD突变,设计引物12R与11F,基因组DNA的扩增可采用PCR技术,并对FLT3-ITD突变进行分析。1*PCR反应缓冲液是PCR扩增体系,2.0 mmol/L MgCl2,基因组DNA 1 μg,0.2 mmol/L dNTPs,12R与11F引物各25 pmol,2.5 U的Tap DNA聚合酶,至终灭菌双蒸水体积50 μl。反应体系在94℃反应5 min后,再按72℃2 min,55℃1 min,94℃45 s程序增扩35个周期,而后在72℃继续加长2 min。增扩后,把2.0%琼脂糖凝胶电泳融入到5 μl PCR产物后,对其进行分析。

1.3统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

APL患者外周血WBC的阳性率,FLT3-ITD突变型患者HW比例明显高于FLT3-ITD野生型(P＜0.05);FLT3-D835突变型患者HW比例与FLT3-D835野生型比较差异无统计学意义(P＞0.05)。FLT3突变型与野生型HB、BB、CR率比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

表1 APL患者FLT3基因突变和临床关系［n(%)］

3 讨论

本文应用PCR技术,以40例APL患者为研究对象,探析了FLT3基因突变以及患者临床疗效与表现的关系。结果表明,8例具有FLT3-ITD突变,8例具有FLT3-D835突变。在FLT3-ITD突变型的8例患者中,均具备高外周血WBC计数,但在FLT3-ITD野生型患者中,只有2例具备高外周血WBC计数,通过上述可知,外周血WBC计数和FLT3-ITD突变具有相关性。通常FLT3-ITD突变APL患者具备高外周血WBC计数的原因主要包括FLT3酪氨酸激酶近膜区氨基酸序列,该序列串联将会导致近膜区产生重复,从而对激酶活性产生抑制,进而激活下游的信号传导通路,比如PI3K/AKT、RAS/MAPK以及STAT5等,并激活酪氨酸激酶,最终造成的细胞凋亡抑制与过度增殖有关［2-4］。

本研究显示,FLT3野生型和突变型患者CR率比较差异无统计学意义(P＞0.05),此结果可能和FLT3突变样品数不足有关。

［1］袁燕慧,欧阳建,陈兵,等.FLT3基因内部串联重复突变在急性早幼粒细胞白血病中的临床意义.白血病: 淋巴瘤,2015,24(4):220-223.

［2］程辉,邱慧颖,高磊,等.急性早幼粒细胞白血病41例分子生物学特征及其临床意义.白血病: 淋巴瘤,2013,22(5):275-277.

［3］王迎,魏辉,刘兵城,等.三种PML/RARA亚型急性早幼粒细胞白血病临床特点对比分析.山东医药,2015,55(27):7-10.

［4］朱化超.FLT3-ITD基因在急性髓细胞白血病患者中的突变及对预后影响分析.临床血液学杂志,2015,28(3):392-396.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.08.017

2016-01-14］

467000 河南省平顶山市第一人民医院血液科