780例遗传咨询者外周血染色体核型分析

朱蕊，曾爱群，杜晶春

(1.广州医科大学附属第一医院妇产科，广东 广州 510120；2.广州医科大学金域检验学院，广东 广州 510182)

780例遗传咨询者外周血染色体核型分析

朱蕊1，曾爱群1，杜晶春2

(1.广州医科大学附属第一医院妇产科，广东 广州 510120；2.广州医科大学金域检验学院，广东 广州 510182)

目的 探讨外周血染色体核型分析在染色体病诊断中的价值。方法对2013年1月至2015年8月期间来我院进行遗传咨询的780例患者行外周血染色体核型分析。结果780例患者中共检出异常核型30例，异常核型检出率为3.85%，其中染色体数目异常12例，染色体结构异常18例，新生儿表现异常、生长发育异常和不孕不育中以染色体数目异常为主，不良孕产史中以染色体结构异常为主。结论外周血染色体核型分析对染色体病导致的新生儿表现异常、生长发育异常、不孕不育和不良孕产史等疾病的诊断具有重要价值。

遗传咨询；外周血；染色体核型；诊断

染色体病是一类由于染色体数目或结构异常而导致的目前还无法根治的疾病，其对个体自身发育和生育后代都有重要影响[1]。外周血染色体检查是确诊染色体病，进而指导临床诊断和优生优育的重要手段之一[2]。本文主要对近年来在我院进行遗传咨询的780患者的外周血染色体核型分析结果和临床资料进行总结，报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年1月至2015年8月来本院进行遗传咨询并行外周血染色体核型分析的患者共780例，按就诊原因分为新生儿表现异常组、生长发育异常组、不孕不育组和不良孕产史组。

1.2 方法

1.2.1 外周血淋巴细胞培养 用肝素提前润湿的5 mL注射器无菌操作抽取2 mL静脉血并混匀，在超净工作台内将0.6 mL全血标本加入外周血淋巴细胞培养瓶内(一生骏，广州白云山拜迪生物医药有限公司)，将接种后培养瓶置于37℃、5%CO2培养箱中培养72 h。

1.2.2 染色体G显带 在收获细胞前2 h加入1µg/µL秋水仙素溶液200µL，将细胞悬液移入15 mL离心管中，2 000 r/min，室温条件下离心5 min，弃上清后加入8 mL 75 mmol/L的KCl低渗液，吹打均匀后置于37℃水浴箱20 min，取出离心管加入新鲜配制的固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)0.5 mL预固定10 min，2 000 r/min离心5 min，弃上清后加入新鲜配制的固定液8 mL，轻轻吹打混匀后室温放置10 min，2 000 r/min离心5 min，弃上清后重复固定1次，最后用少许固定液重悬细胞。吸取2～4滴细胞悬液均匀滴于洁净湿润载玻片上(每份标本制片2～3张)，置入鼓风干燥箱80℃干燥处理2 h后，取出自然冷却至室温，再放入50 mL 0.05%的胰蛋白酶溶液中消化15 s左右，姬母萨染液处理3～8 min，室温放置干片后分析。

1.2.3 染色体核型分析 在油镜下计数20～30个中期分裂相核型，分析5个显带良好的核型，画图分析拍照3个核型，如果是嵌合体，计数100个或200个核型以确定其比例。

2 结 果

2.1 遗传咨询者特点和异常核型检出率 本次统计时间段内共有780例患者进行了外周血染色体核型检查，按其就诊原因主要分为新生儿表现异常19例，生长发育异常34例，不孕不育229例和不良孕产史497例，另外有一例是在检查出儿子不育后发现其父亲有相同核型故单列为其他组。780例患者中共检出异常核型30例，异常检出率为3.85%，见表1。

表1 780例遗传咨询者分类及异常染色体检出率

2.2 异常核型分布特点 30例异常核型中，染色体数目异常12例，结构异常18例，新生儿表现异常、生长发育异常和不孕不育中以染色体数目异常为主，不良孕产史中以染色体结构异常为主，具体分布和每种异常核型情况及相关临床表现见表2和表3。

表2 30例异常染色体核型分类(例)

表3 30例异常染色体核型及主要临床表现

3 讨 论

本研究结果显示，外周血染色体核型异常检出率在新生儿表现异常组和发育异常组中最高，这一结果与这两组患者通常表现出较明显的外部表型特征有一定关系，新生儿染色体异常主要为21-三体。目前21-三体综合征还不能彻底根治，仅限于对症治疗[3]，该病发病率高且患者存活时间长，一旦出生将会给家庭和社会带来沉重的负担，这一结果也提示做好优生遗传咨询和产前筛查及诊断工作的重要性。生长发育异常主要与性染色体异常有关，从本研究中发现的8例异常核型可以看出该类患者主要是X染色体的数目或者结构发生改变，如数目减少、增多、部分缺失、臂间倒位等，从而影响到第一性征和第二性征的发育，男女均有可能受到影响，造成原发性闭经、先天卵巢发育不全、男性乳房发育等。

不孕不育的原因多种多样，染色体异常是其中重要原因之一。229例不孕不育就诊患者中共检出染色体异常者5例，异常检出率为2.18%，这与相关报道基本一致[4]。其中女性1例，主要表现为X染色体嵌合型，男性4例，其中1例表现为Y染色体短臂p11.3长度增加，其父亲有相同染色体，疑为正常；1例表现为X染色体增加伴Y染色体短臂p11.3长度增加；1例表现为X染色体增加伴正常核型嵌合；1例表现为单纯X染色体增加核型。值得注意的是47,XXY核型在发育异常组和不孕不育组中均有出现，该类核型又被称为Klinefelter综合征[5]，主要是由于父母的生殖细胞在减数分裂形成精子或卵子的过程中，性染色体发生不分离引起的，该类个体多数呈现男性外貌，在儿童期无明显异常，进入青春期或成年期时常出现异常，如乳房发育、睾丸显著缩小、无精子和不孕不育等。

497例不良孕产史患者中共检出异常核型12例，异常检出率为2.41%，其中平衡易位8例，臂间倒位2例，染色体部分缺失2例。平衡易位携带者和臂间倒位携带者一般无遗传物质的丢失，所以个体表型正常，但由于涉及到两条染色体的异常故其产生正常配子的概率小，易发生流产、死胎和畸形儿等。

综上所述，染色体异常是导致新生儿表现异常、生长发育异常、不孕不育及不良孕产史等疾病的重要原因之一，及时进行外周血染色体核型分析对指导临床诊断和开展优生优育具有重要意义。

[1]陈海伟,杨丹.人类染色体病研究进展[J].赤峰学院学报(自然科学版),2012,28(2):113-117.

[2]唐芳,陶晓海,卢航,等.染色体异常、染色体多态性与生殖异常的相关性分析[J].海南医学,2015,26(16):2379-2381.

[3]王玉丰,羊轶驹,林玲,等.三亚地区新生儿唐氏综合征流行病学调查及相关发病因素研究[J].重庆医学,2015,44(2):235-236.

[4]周静,惠伟戎,许争峰.南京地区4335例遗传咨询者外周血染色体核型分型[J].中国优生与遗传杂志,2012,20(9):28-30.

[5]张正果,陈斌.Klinefelter综合征研究的新进展[J].中国优生与遗传杂志,2010,18(10):7-9.

Analysis of the peripheral blood chromosomal karyotype from 780 genetic consultants.

ZHU Rui1,ZENG Ai-qun1, DU Jing-chun2.1.Department of Gynecology and Obstetrics,the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, Guangzhou 510120,Guangdong,CHINA;2.Kingmed College of Laboratory Medicine of Guangzhou Medical University, Guangzhou 510182,Guangdong,CHINA

Objective To evaluate the role of peripheral blood chromosomal karyotype analysis in disease diagnosis of chromosomal disorder.MethodsThe cytogenetic karyotype of peripheral blood derived from 780 genetic counseling cases were analyzed during January 2013 to August 2015.ResultsThere were 30 cases of chromosomal aberrations to be detected and the abnormal rate was 3.85%,including 12 cases of numeric aberrations and 18 cases of structural aberrations.In neonatal disorder group,developmental disorder group and infertile group,the main type of chromosomal aberrations was the numeric abnormality,and it was mainly structural abnormality in the abnormal gestation and birth group.ConclusionThe detection of the peripheral blood chromosomal karyotype may play an important role in the diagnosis of neonatal disorder,developmental disorder,infertility and abnormal gestation and birth.

Genetic counseling;Peripheral blood;Chromosomal karyotype;Diagnosis

R394

A

1003—6350（2016）14—2249—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.14.005

2016-02-19)

广东省广州市属高校科研项目(编号：1201430338)

杜晶春。E-mail：hndjc@aliyun.com