PCV2和PRRSV对猪瘟疫苗的免疫抑制作用和预防控制试验

王耀帮，詹伟慧，麻秋霞，吴永平，陈伟南，胡海涛

(1.缙云县畜牧兽医局，浙江缙云 321400； 2.缙云县白力岙猪场)



PCV2和PRRSV对猪瘟疫苗的免疫抑制作用和预防控制试验

王耀帮1，詹伟慧1，麻秋霞1，吴永平2，陈伟南1，胡海涛1

(1.缙云县畜牧兽医局，浙江缙云 321400； 2.缙云县白力岙猪场)

摘要：PCV2和PRRSV是影响猪瘟防疫中最重要的免疫抑制因素。以1∶32为免疫抗体合格率，两毒自然感染猪，用2倍量的猪瘟脾淋苗，于30日龄首免、44日龄二免，72日龄时用4倍量强免，经87日龄、102日龄采血检测，其抗体合格率仍为零。若以PCV 2型灭活疫苗和猪蓝耳病灭活疫苗对仔猪进行免疫保护，即可明显提高猪瘟免疫合格率至90﹪以上。基于两病毒对猪瘟弱毒疫苗的免疫抑制作用，设计以猪瘟免疫抗体反应为指示系统：用免疫球蛋白PCV2-PRRSV-RRPSV- IgG和猪瘟苗对仔猪进行免疫，在猪瘟疫苗末免3周后采血检测，其抗体合格率达到100%。

关键词：PCV2；PRRSV；免疫抑制因素；猪

猪瘟的免疫效果与其免疫抗体水平密切相关，当猪瘟受免猪的抗体滴度在1∶32～1∶64时攻毒可获得100%保护，当抗体水平降至1∶8以下时则完全不能保护[1]。然而当受免猪遭受猪圆环病毒(PCV2)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染时，则可抑制其免疫抗体的产生。

有关猪PCV2和PRRSV对猪瘟疫苗的免疫抑制作用，曾有专家学者研究指出，经PRRSV感染的SPF猪对猪瘟弱毒疫苗的免疫效果不佳，猪瘟抗体水平明显低于对照猪[2]，且两毒均能干扰猪瘟疫苗的免疫效果，导致猪群猪瘟抗体水平下降或严重不足[3]。

笔者为探讨有效提高猪瘟疫苗免疫质量的途径，特进行PCV2和PRRSV对猪瘟疫苗的免疫抑制作用和预防控制试验，现将试验结果简要介绍如下，供参考。

1材料与方法

1.1试验动物试验在缙云县某规模猪场进行，选择无PCV2和PRRSV疫苗免疫史的20日龄仔猪80头。远离该试验场，经PRRSV抗体、抗原检测为双阴性试验猪10头(供对照试验用)。

1.2供试疫苗猪瘟脾淋苗(杭州某生物药厂生产)，口蹄疫合成肽疫苗(上海某生物医药有限公司生产)，PCV2灭活疫苗(哈尔滨维科生物技术开发公司生产)，PRRSV灭活疫苗(NVDC-JXA1株，杭州某生物药厂生产)。

1.3检测试剂盒PCV2型抗体酶联免疫检测试剂盒(北京某动物防疫技术有限公司生产)，LSI PRRSV抗体检测试剂盒(法国产品)，PRRSV通用RT-PCR检测试剂盒(北京某动物防疫技术有限公司生产)。

1.4免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG(由实验室自备)，球蛋白含量113 mg/mL。PCV2-IgG效价1∶1280，PRRSV-IgG效价1∶1600。

1.5试验设计

1.5.1PCV2和PRRSV对猪瘟免疫的抑制试验试验设Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ、Ⅳ组，每组供试仔猪10头。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组为超免组；Ⅳ组为健康对照组(远离试验场，经猪普蓝PCR和猪蓝耳抗体检测双阴猪)。仔猪于25日龄、30日龄分别采集自身及相应母猪静脉血检测母源抗体(选择较适免疫时间)。第Ⅲ组为猪零日龄2头份猪瘟脾淋苗超免；第Ⅰ、第Ⅱ、第Ⅳ组猪30日龄首免，同时分点肌注猪瘟脾淋苗2 mL/头，O型口蹄疫合成肽苗2 mL/头。各组以首免相同剂量于44日龄二免，72日龄时以猪瘟4倍剂量三免，首免后7 d，14 d，28 d，二免后28 d，三免后14 d，28 d采血分离血清，用正向间接血凝法检测猪瘟抗体效价，以5log2为合格。

1.5.2PCV2和PRRSV灭活苗提升(两毒受感猪)猪瘟免疫的效果试验试验设4组，每组仔猪10头，免疫程序：第1、2、3组仔猪均于21日龄首免，每头肌注1 mL，首免3周后二免。第1组：30日龄首免猪瘟脾淋苗肌注2 mL，58日龄二免肌注2 mL；35日龄首免高致病性蓝耳病灭活苗2 mL，58日龄二免2 mL。第2组：30日龄分点肌注高致病性蓝耳病灭活苗、猪瘟脾淋苗和O型口蹄疫合成肽苗各2 mL，58日龄二免各2 mL。第3组：30日龄首免猪瘟脾淋苗、O型口蹄疫合成肽苗各2 mL， 58日龄二免各2 mL。第4组：30日龄首免高致病性猪蓝耳病灭活苗、猪瘟脾淋苗各2 mL，58日齡二免各2 mL。各组于二免2-3周后采血分离血清，采用正向间接血凝法检测猪瘟抗体水平。

1.5.3免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG的抗毒效果试验以两毒受感猪的猪瘟免疫抗体反应为指示系统，设试验组和对照组，每组供试仔猪10头。免疫程序：30日龄首免球蛋白2 mL/头，35日龄首免猪瘟脾淋苗1 mL/头，40日龄二免免疫球蛋白2 mL/头，56日龄二免猪瘟脾淋苗1 mL/头；对照组除不用免疫球蛋白外，猪瘟免疫方法与试验组相同。各组于二免2-3周后采血分离血清，采用正向间接血凝法检测猪瘟免疫抗体水平。

2结果与分析

2.1PCV2和PRRSV对猪瘟防疫的免疫抑制作用详见表1、图1。

表1　PCV2和PRRSV对猪瘟免疫的效果检测

注：表中效价为每组的10个样本平均数。第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ试验组对应母猪的母源抗体分别为11，7， 10，因母猪是以8倍量猪瘟疫苗进行免疫，故母源抗体较高。

图1　PCV2和PRRSV对猪瘟免疫的抑制作用

由表1、图1可见，首免时第Ⅱ组的母源抗体效价为1∶16，是较适首免时间。但经二免2周后检测，其效价却低于其他各组，当发现Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ三组二免2周后效价下降时，采用加大疫苗剂量(4倍量)进行第3次免疫时，Ⅱ组抗体效价仍继续下降，而同期应用疫苗、剂量和免疫程序相同的Ⅳ组(对照组)则得到了满意的免疫效果。试验中低下的抗体状况与母源抗体、首免时间、疫苗质量、应用剂量、疫苗组合、免疫次数、免疫方法无关，似由PCV2、PRRSV的免疫抑制因素存在。

2.2PCV2和PRRSV灭活疫苗提升(两毒受感猪)猪瘟免疫的效果试验详见表2。

表2　猪瘟免疫抗体变化对比

由表2可见，第1组猪瘟抗体效价最高(9.3log2),第2组次之(9log2),第3组最低(2.9log2)，组间差异显著(P<0.05)。

2.3免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG抗毒效果试验详见表3。

表3　免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG抗毒效果

由表3可见，免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG抗毒效果显著，试验组猪瘟抗体合格率达100%，对照组则为0。

3小结与讨论

3.1PCV2和PRRSV是影响猪瘟免疫效果的最重要免疫抑制因素，由此持续感染引起的免疫抑制值得高度重视[4]，笔者认为102日齡内两毒感染猪，如以常规用量的猪瘟弱毒苗进行免疫，其抗体合格率仍可能为0。

3.2增加免疫次数，加大免疫剂量，然而免疫抗体水平依然低下的免疫耐受现象[5]，是当地猪群自然感染PCV2和PRRSV后的主要病理特征，以免疫抑制为主征的隐性感染虽较难发现，但其感染率之高，却大有超过有关资料介绍的自然感染率达75%之势[6-7]。

3.3试验表明，PCV2和PRRSV自然感染猪的猪瘟抗体水平与猪蓝耳病灭活苗免疫与否呈正相关，应用者免疫效果良好，反之则效果不佳。由此可推断，猪蓝耳病灭活疫苗和免疫球蛋白PCV2,PRRSV-IgG可为净化被PRRSV污染的环境发挥重要作用。

参考文献

[1]蔡宝祥．家畜传染病(第4版)[M]．北京：中国农业出版社，2006；203.

[2]杨汉春，猪免疫抑制性疾病的流行特点与控制对策[J]中国畜牧兽医，2004，31(5)：42.

[3]赵坤，李培庆，李敬玺等，猪免疫抑制综合症的发生与防制 [J]．安徽农业科学，2005，33(11)：2074-2075.

[4]曲祖乙，李冰主编.猪瘟[M]．猪病防治技术，北京：中国农业出版社，2010，31.

[5]刘健，潘鸿昌，么忠生 导致猪免疫抑制的因素及其防制对策[J]中国猪业进展，2008，188.

[6]文萍萍，陈代平，李金海等，猪瘟脾淋苗、O型口蹄疫和猪蓝耳病灭活苗两两联合应用的免疫效果观察[J]．四川畜牧兽医，2010，37(1)：24.

[7]杨治齐，不同免疫剂量与次数对猪瘟抗体水平影响[J]畜牧兽医杂志，2011，30(1).

农业部启动全国兽药(抗菌药)综合治理五年行动

最近，为进一步规范兽用抗菌药生产、经营和使用，全面提升兽用抗菌药滥用及非法兽药管控能力，促进养殖业持续健康发展，努力确保不发生重大动物产品质量安全事件。农业部印发《全国兽药(抗菌药)综合治理五年行动方案(2015-2019年)》，将利用五年时间开展系统全面的综合治理行动，严厉打击违法违规行为。

治理行动以突出问题整治为核心，以落实主体责任为重点，以转变养殖方式为根本，以群众满意为目标，实施系统、全面的综合治理。

一是明确工作目标，通过五年的综合治理，主体责任进一步落实，生产经营使用行为进一步规范，政府监管水平进一步提升，畜禽标准化养殖率、水产健康养殖率明显提高，生产方式加快转变。假劣兽药生产经营行为得到有效遏制，兽用抗菌药质量合格率达到97%以上、动物产品(含水产品)兽药残留监测合格率保持在97%以上、违法违规行为线索处理率达100%、行政处罚案件信息公开率达100%。

二是明确治理重点，以风险隐患高、事故易发多发、问题突出的4类区域、7类产品和7类对象为重点，集中力量治理违法违规行为，形成高压严打态势。

三是明确治理任务，提出集中清缴、加强兽用抗菌药生产经营使用监管、加大非法兽药办案力度、推进标准化和健康养殖、强化长效机制建设等9大任务。

四是明确保障措施，要求各地农业(畜牧兽医、渔业)部门加强领导、落实责任、强化配合、广泛宣传，为综合治理提供有力保障。

《浙牧》摘

中图分类号：S858.28

文献标识码：A

文章编号：1005-7307(2016)01-0008-003

作者简介：王耀邦(1958-)，男，高级兽医师，主要从事兽医防疫检测工作，E-mail:Jywyb01@163.com

收稿日期：2015-07-08