HPLC法测定头孢呋辛酯中高分子聚合物含量

陈 慧

( 江西省上饶市立医院， 江西 上饶 334000)

HPLC法测定头孢呋辛酯中高分子聚合物含量

陈 慧

( 江西省上饶市立医院， 江西 上饶 334000)

目的 考察高效液相测定法用于头孢呋辛酯中高分子聚合物测定的可行性。方法 色谱柱：聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物的填充色谱柱，检测波长：280 nm，进样量：20 μL；流动相：0.032 mol/L LiBr溶液;流量为0.30 mL·min-1。结果 头孢呋辛酯色谱条件经方法学考察均符合要求，在0.005 4～1.532 2 mg·mL-1范围内,溶液质量浓度与聚合物峰面积呈线性相关，回归方程为：y=64 217x-41 214(r=0.999 6)。结论 头孢呋辛酯中高分子聚合物浓度可用高效液相色谱的方法测定，所采用的方法准确可靠，可考虑用于头孢呋辛酯及其类似物的高分子聚合物测定。

头孢呋辛酯；高分子聚合物；高效液相

β-内酰胺类抗生素是目前使用最为广泛的抗感染药物，其常见的不良反应是过敏反应，多年来的研究已证明引发该过敏反应的过敏原不是抗生素本身，而是其中的高分子杂质，有时甚至会引发毒性反应，严重危害患者的生命安全，因此国内外对 β-内酰胺类抗生素的高分子杂质的控制非常重视[1]。此次实验采用聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物填充柱来分离高分子聚合物，并采用高效液相色谱法进行检测，相关结果报道如下。

1 材 料

1.1 仪器与试药

岛津 LC-20A 型高效液相色谱仪；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃、无水溴化锂均由国药集团化学试剂有限公司提供，均为色谱醇； 头孢呋辛酯对照品(中国食品药品检定研究院)；头孢呋辛酯胶囊(海南日中天制药有限公司，批号为：140513、140621、140918)。

2 方法与结果

2.1 方法学验证

2.1.1 色谱条件 色谱柱为：聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物的填充色谱柱，检测波长：280 nm，进样量：20 μL；流动相：0.032 mol/L LiBr溶液(称取2.77 g LiBr加DMF溶解并稀释至1 000 mL即得)；流量为0.30 mL·min-1，25 ℃下进行检测。

2.1.2 溶液的制备

(1)供试品溶液的制备。 精密称取适量混匀的头孢呋辛酯胶囊内容物，加入流动相溶解并稀释为含头孢呋辛约1.0 mg·mL-1的样品溶液。

(2)对照溶液的制备。 精密量取1 mL供试品溶液，置于100 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀即得。

(3)对照品溶液的制备。 精密称取头孢呋辛酯对照品适量，用流动相溶解并稀释成0.01 mg·mL-1溶液。

2.1.3 系统适用性试验

(1)空白溶剂的筛选。 选取流动相时，不会出现任何杂质峰，对测定不会造成影响，因此在制作供试品时选择的空白溶剂为流动相。

(2)塔板数、拖尾因子、分离度。经图谱分析显示，理论塔板数为7 821，拖尾因子为1.01，且各峰间的分离度良好。

(3)方法学考察。参考药典行重复性、精密度考察，RSD分别为1.1%、0.8%，符合标准规定。

(4)线性关系考察。参考药典行线性关系考察，得线性方程为:y=64 217x-41 214(r=0.999 6)。结果表明，头孢呋辛酯质量浓度在0.005 4～1.532 2 mg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好。

(5)稳定性试验。 参考药典于0、0.5、1、2、3、4 h进行精密度考察，对照品溶液峰面积的RSD为1.8%(小于2.0%)，符合标准规定。供试品溶液在常温下2 h后各个时间点其高分子聚合物杂质的含量都在明显地增加，说明供试品溶液在常温下不稳定，须临用新制，最好是低温放置。

2.1.4 供试品溶液的质量浓度与聚合物测定结果的相关性考察 参考药典不同质量浓度供试品稀释后的溶液，以质量浓度x(mg/mL)为横坐标，以峰面积y为纵坐标，进行线性回归。得到回归方程为：y=619 277x-5 129.3，相关性r=0.999 6。结果表明，溶液质量浓度和聚合物峰面积间的相关性较好。

2.2 样品中头孢呋辛聚合物的检查

在同一色谱条件下分别对头孢呋辛酯对照品溶液与3批头孢呋辛酯胶囊供试品溶液及其相应的对照溶液，采用峰面积归一化法和自身对照法(不加校正因子)，对供试品内含有的聚合物总量进行测定。

3 结 果

见表1。

表1 头孢呋辛酯胶囊样品中高分子聚合物含量测定结果 单位:%

4 讨 论

头孢呋辛酯(C16H16N4O8S)属于脂溶性化合物，在水性溶剂中溶解度极低，经前期文献调研，本文考虑用DMF及LiBr，并发现流动相做溶剂时，不产生干扰；色谱柱选择时，我们结合文献[2]，考虑选择聚苯乙烯-二乙烯苯共聚物填充柱，经方法学考察可知，本次实验所选方法准确性高、精密度好、重现性和相关性均符合相关要求，且比较自身对照法和面积归一化法，发现两组结果基本一致，提示二者均可用于其含量计算中。需要注意的是高分子聚合物，会随着时间延长而含量增加，故实验过程最好现配现测，以保证结果准确。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：二部[M].北京:化学工业出版社,2010：191.

[2]王玲, 胡朝新, 陆红彬,等. 高效液相色谱法测定头孢呋辛酯中高分子聚合物[J]. 药学与临床研究, 2012, 20(5):467-469.

Determination of Cefuroxime Ester Polymer by HPLC

CHEN Hui

(Shangrao Hospital,Jiangxi Province，Jiangxi Shangrao 334000，China)

Objective To investigate the feasibility of HPLC assay for the cefuroxime ester polymer. Methods Column: styrene-divinylbenzene copolymer packed columns, the detection wavelength: 280 nm, injection volume: 20 μL; mobile phase: 0.032 mol/L LiBr solution; flow rate of 0.30 mL·min-1. Results Cefuroxime ester chromatographic conditions through methodological study are in line with the requirements in the 0.005 4～1.532 2 mg·mL-1range, the concentration of the polymer peak area was linear correlation, regression equation:y=64 217x-41 214(r=0.999 6). Conclusion Cefuroxime ester polymer concentration can be measured using the HPLC method, the measuring method method is reliable and can be considered for the determination of cefuroxime ester polymer and the like.

cefuroxime ester; polymers; HPLC

1006-446X(2016)03-0022-03

2015 - 10 - 19

R 917

A