高效液相色谱分析的质量控制策略
2016-02-22戴佩珍刘君超
◎戴佩珍,刘君超
(瑞安市食品检验检测中心,浙江 瑞安 325200)
高效液相色谱分析的质量控制策略
◎戴佩珍,刘君超
(瑞安市食品检验检测中心,浙江 瑞安 325200)
高效液相色谱分析由于其具有的众多优势使得其在许多领域中发挥了非常重要的作用。因此,本文首先对高效液相色谱分析方法的含义、特征以及发展现状进行了详细的探讨,最后对高效液相色谱分析的质量控制有效测量进行了分析,希望能够为同类的实践提供借鉴。
高效液相色谱分析;影响因素;质量控制;策略
高效液相色谱分析法自从20世纪60年代产生之后,便在很多领域内获得了广泛的应用,尤其适合应用在高沸点、大分子、热稳定性差以及强极性的化合物的分离和分析过程中,由于其具有的众多优势使得其在环保、农业、工业、生化、医药等各个学科领域中发挥了重要的作用[1,2]。但在实际的应用中,如果能够进一步提升高效液相色谱分析方法的分析质量,无论对于科研工作还是人们的生产生活都具有非常重要的影响[3,4]。
1 高效液相色谱的相关理论
1.1高效液相色谱分析的含义
所谓液相色谱分析主要是指其流动相为液体的色谱技术,属于色谱法中最为古老的一种,不过通过对填料粒度及柱压进行改进,在经典的液相柱色谱的基础上引入了气相色谱的塔板理论,在技术上采用了高压输液泵,高效固定相和高灵敏度的检测器,实现了分析速度快、分离效率高和操作自动化,这种色谱技术被称为高效液相色谱法,英文简称为HPLC。
1.2高效液相色谱分析方法的特征
高效液相色谱分析方法的特征如下:①高压性,压力一般能够达到150~300 kg/cm2;②高速性,流速为0.1~10.0 mL/min;③高效性,能够对百余种物质进行同步的分离测定;④高灵敏度,紫外检测器的灵敏度能够达到0.01 ng,而且不需要消耗过多的样品。
此外,高效液相色谱分析还具有具体突出的特征:①速度快,一般情况下对样品的分析往往在15~30 min便能够完成,甚至对于一些样品仅需要5 min便可以完成;②分辨率高,能够对差异性很小的物质,比如对手性物质进行分析和分离;③灵敏度高,紫外检测器可达0.01 ng,荧光和电化学检测器可达0.1 pg。同时,采用高效液相色谱法进行分析,还具有柱子可以反复使用的特点,采用同一根色谱柱能够分离出不同的化合物。而且由于不需要消耗太多的样品,也更加有利于对样品的回收。再加上样品经过色谱柱之后,能够收集单一组分或者做制备。
2 加强高效液相色谱分析质量控制的有效策略
2.1检测仪器的科学选择
能够选择科学合理的检测仪器,对于高效液相色谱分析法来说,具有非常重要的意义。尤其在检测操作的实践中,更应该结合实际的情况,选择合适的检测仪器,具体来说,可以根据等待检测的样品以及流动相所体现出来的性质进行具体的评判。同时,还应该保证检测仪器的本身质量,应该具备良好的响应范围以及线性范围,同时针对流动相所体现出来的变化不敏感,需要其具有比较高的灵敏度以及重复性,只有有效保证了以上措施,才能进一步保证高效液相色谱分析的质量。
2.2固定相的科学选择
在高效液相色谱分析中,对固定相的科学选择也是非常重要的。在以往的实践操作中都是尽量选择粒径较小的固体颗粒对色谱柱进行填充,并保证股定向的传质速度以及相应的机械强度。而且如果能够选择表面多孔以及表面积较大的固定相时,还能够降低对色谱柱的填充难度,使其在柱子中的分布显得更加均匀,从而有效缩短出峰的时间,继而有效达到增强柱效的重要作用。不过,最为明显的不足便是该类材料的厚度并不大,在实践应用中会受到最大允许量的厚度制约,其相应的应用范围并不大。目前,很少进行手动填柱,而是在市面上直接购买,这样能够有效避免手动填柱的不足。
2.3流动相的科学选择
在高效液相色谱的分析过程中,如果固定相被确定了下来,那么流动相就是主要的影响因素。因此,还需要对流动相的选择引起足够的重视。一般情况下,在具体的选择过程中,应该将杂质含量少作为主要的选择标准,从而使得杂质对分析结果的影响降低到最小的程度。此外,还应该注重流动相的选择要与检测仪器的选择具有一定的匹配,继而保证流动相在检测波长下不存在吸收或吸收量极小,不会干扰到待测物的分析与测定。如果所选的检测仪器为示差折光检测器,则需要选用折光系数与待测物差距较大的流动相,从而有效提升高效液相色谱分析方法的准确性,使其能够有效地应用到实践过程中。
2.4其他策略
除此之外,为了有效保证高效液相色谱分析的检测质量,还可以采取在检测过程中根据样品的实际分析情况采取添加质控样品的措施。通过大量的实践充分证明,该种做法能够进一步提升高效液相色谱检测结果的准确性。当然,检测过程中检测人员的高度责任心与细致认真的工作态度也是保证检测质量的关键所在。
3 小结
总之,随着高效液相色谱分析法在我国很多领域中应用范围的不断扩大,对其质量控制的有效策略进行研究具有非常重要的现实意义,也希望通过本文的探讨能够起到抛砖引玉的作用,继而促进该种分析技术的不断完善。
[1]张燕青,林雪玉,朱金平,等.高效液相色谱法测定人血清中伏立康唑的质量浓度[J].中国药业,2014,23(23):6-7,8.
[2]张仕华,许 彬. 高效液相色谱法测定奶粉中双氰胺的质量浓度[J].中国乳品工业,2014,42(11):42-43.
[3]孙 麒,王国华.高效液相色谱指纹图谱在中药金银花质量控制中的价值研究[J].四川中医,2015,33(2):95-97.
[4]刘先德.高效液相色谱在食品质量检测中的应用[J].中国高新技术企业,2015(18):50-52.
Quality Control Strategy of High Performance Liquid Chromatographic Analysis
Dai Peizhen, Liu Junchao
(RuianFood Inspection and Testing Center, Ruian 325200, China)
High performance liquid chromatographic analysis has played a very important role in many fields because of its many advantages. Therefore, this paper first analyzes the meaning, characteristics and development status of high performance liquid chromatography analysis method. Finally, the quality control measures of high performance liquid chromatography were analyzed, hoping to provide a reference for similar practices.
High performance liquid chromatographic analysis; Influencing factors; Quality control;Strategy
O657.7+2
10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.06.019