柳州市RhD阴性献血者血型抗原分析

2016-02-17李雄英李聚林许建荣孔庆芳谭庆芬徐阳曦

广西医学 2016年5期

关键词：柳州市献血者血型

李雄英李聚林许建荣孔庆芳谭庆芬杨珊徐阳曦

(广西血液中心输血研究室，柳州市 545005，E-mail：fanqielushui@126.com)

调查分析

柳州市RhD阴性献血者血型抗原分析

李雄英李聚林许建荣孔庆芳谭庆芬杨珊徐阳曦

(广西血液中心输血研究室，柳州市 545005，E-mail：fanqielushui@126.com)

目的了解柳州市RhD阴性献血者Rh血型抗原分布，建立RhD阴性表型数据库。方法对广西血液中心425份初筛RhD阴性标本采用间接抗球蛋白试验进行确认，并分析阴性献血者Rh表型及Rh C、c、E、e抗原阳性频率分布特征。阴性献血者4种Rh抗原阳性频率分布依次为e(99.02%)>c(9.17%)>C(42.26%)>E(6.88%)。结果 425份疑似RhD阴性血标本中，确认为RhD阴性407份，弱D型18份；407份RhD阴性血标本的ABO血型分布依次为：O型158份(38.82%)>A型119份(29.24%)>B型102份(25.06%)>AB型28份(6.88%)；共检出7种表型，依次为 dccee(51.60%)>dCcee(31.94%)>dCCee(9.58%)> dccEe(5.16%)> dccEE(0.98%)>dCcEe(0.49%)>dCCEe(0.25%)，未检出dCcEE及dCCEE表型。Rh阴性献血者C、c、E、e 4种Rh抗原的阳性频率由高到低依次为：e(99.02%)>c(90.17%)>C(42.26%)>E(6.88%)。结论掌握柳州市RhD阴性献血者Rh血型抗原分布特征，建立RhD阴性供血者表型数据库，有利于为RhD阴性患者及时提供配型相合的血液；对科学管理RhD阴性血源和合理应用RhD阴性血液具有重要意义。

RhD阴性；献血者；血型；Rh表型；柳州市

Rh血型系统是目前被国际输血协会(International Society of Blood Transfusion，ISBT)确认的35个红细胞血型系统中最具复杂性和多态性的血型系统，有61种抗原，也是临床输血中仅次于ABO的重要血型系统。在复杂的Rh血型系统中，与临床输血密切相关的主要是5个抗原：D、C、c、E、e，免疫原性强弱顺序依次为D>E>c>C>e[1]，可通过输血、妊娠等免疫途径产生相应抗体而引起溶血性输血反应、新生儿溶血病等。在我国汉族人群中RhD阴性者仅占0.2%～0.5%[2]，血源稀少。为能使RhD阴性患者尤其是产生Rh同种免疫性抗体的患者及时安全地进行血液输注，在无偿献血者中进行RhD抗原阴性的筛选与确认，建立RhD抗原阴性献血者表型档案库，成为采供血机构的一项重要工作。我中心从2002年开始建立RhD 阴性献血者资料库[3]，并从2007年开始增加检测RhD阴性献血者的C、c、E、e 4种Rh抗原，又建立了RhD阴性献血者Rh表型数据库。笔者对我市2007～2015年确认为RhD阴性献血者的ABO血型和Rh表型情况进行回顾性统计分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源标本来源于2007年1月至2015年12月，在柳州市广西血液中心首次进行无偿献血，经初筛疑似为RhD阴性的血标本425份。献血者年龄18～55岁，男性220名，女性205名。

1.2 试剂和仪器 IgM抗-D、IgG抗-D(上海血液生物医药有限责任公司，北京金豪制药有限公司)；IgM+ IgG抗-D(加拿大Dominion Biologicals Limited公司)； IgM抗-C、抗-c、抗-E、抗-e试剂、抗球蛋白试剂(IgG+C3d)(上海血液生物医药有限责任公司)；细胞洗涤离心机(型号Centra W，美国Thermo Scientific公司生产)。

1.3 方法采用IgM抗-D血清对献血者血标本进行初筛。对初筛阴性的标本，用3批以上不同厂家不同批号的IgG型或IgM+IgG型抗-D试剂，做试管法间接抗球蛋白试验(indirect antiglobulin test，IAT)进行确认，如IAT中有一批以上试剂检测结果为阳性则判断为弱D，将其认定为RhD阳性供血者；如IAT中所有批号结果均为阴性则鉴定为 RhD阴性。C、c、E、e 4种Rh抗原检测采用常规盐水试管法，按说明书进行操作，凝集者判为阳性，不凝集者判为阴性。

1.4 Rh血型表型数据库的建立采用计算机管理，对确认为RhD阴性并检测合格的献血者，建立详细档案，将RhD阴性供血者的个人资料(包括姓名、性别、出生年月、年龄、通讯地址、联系电话、献血日期，献血码等)，ABO血型，Rh表型等录入Excel软件，形成RhD阴性献血者Rh血型表型数据库。当临床患者需要输注Rh血型匹配的血液时，可迅速在数据库中检索合适的献血者，及时满足临床输血的需求。

2 结果

初筛疑似为RhD阴性的425份标本中，经IAT确认为弱D型18份，占4.24%(18/425)，阴性407份，占95.76%(407/425)。407份RhD阴性标本中，ABO血型分布排序为：O>A>B>AB；共检出7种表型，检出率由高到低依次为dccee>dCcee>dCCee>dccEe>dccEE>dCcEe>dCCEe，未检出dCcEE及dCCEE表型。见表1。柳州市RhD阴性献血者Rh表型频率与其他地区人群的比较结果见表2。Rh阴性献血者C、c、E、e 4种Rh抗原的阳性频率由高到低依次为：e(99.02%)>c(90.17%)>C(42.26%)>E(6.88%)，由此推断出阴性患者产生Rh系统不规则抗体时随机配血相合概率(100%-阳性频率)，高低顺序为:抗-E(93.12%)>抗-C(57.74%)>抗-c(9.83%)>抗-e(0.98%)，见表3。

表1 407名RhD阴性献血者Rh表型分布(n，%)

表2 柳州市RhD阴性献血者Rh表型频率与其他地区人群比较(%)

表3 阴性献血者4种Rh抗原阳性频率及阴性患者产生Rh抗体时随机配血相合概率(%)

3 讨论

柳州市RhD阴性献血者表型频率特点与国内其他地区报告结果[4-11]相似，同时也有自身的特点。全国各地区表型分布不平衡，均以dccee和dCcee为主，其他表型比例较低，频率排序为dccee>dCcee>dCCee或dccEe>dccEE>dCcEe或dCCEe。不同地区表型频率高低排序差异主要是dCCee和dccEe，柳州、金华、青岛、西安等的dCCee频率高于dccEe频率，而聊城、唐山、安阳、呼和浩特、咸阳等的dccEe频率高于dCCee频率。柳州dCcEe频率(0.49%)低于其他地区(1.42%～3.55%)。dccEE频率和dCCEe频率在各地区的检出率都很低，dccEE频率小于1%，dCCEe只在柳州、安阳和西安有检出。以上分析表明中国南北方各地区RhD阴性献血者Rh表型既有共同的分布特征，又存在一定的地区差异，这些差异可能与样本量、检测试剂、调查方法、民族构成、血型遗传多态性等多种因素有关。

由于不同地区、种族人群Rh血型遗传多态性不同，导致相应抗原频率、免疫概率不同，因此进行不同地区Rh血型抗原分布调查具有重要意义，研究得到的Rh表型分布资料，对估计临床Rh系统不规则抗体的产生概率及指导特殊配血有参考价值[12]，亦有助于判断已产生Rh抗体患者寻找血型匹配血源的难易程度。本调查表明407名阴性献血者的4种Rh抗原阳性频率由高到低依次为：e(99.02%)>c(90.17%)>C(42.26%)>E(6.88%)，由此可推断出Rh阴性患者产生不规则抗体与随机RhD阴性血液配血相合概率的高低顺序为：抗-E(93.12%)> 抗-C(57.74%)> 抗-c(9.83%)> 抗-e(0.98%)。可见产生抗-E、抗-C的阴性患者配血相合概率较高，而产生抗-c、抗-e的阴性患者配血相合概率则很低。据此我们可预测倘若体内存在抗-E、抗-C的阴性患者需要输血，寻找Rh相合血液会相对容易一些；而存在抗-c、抗-e抗体的Rh阴性患者如果在短时间内需要大量输血或长期需要依赖输血治疗，为其寻找多位血型匹配的献血者则会极其困难。在难以获得相合血液情况下，只能冒险给病人输注不能完全相合的血液。因此应特别关注罕见c抗原阴性包括dCCee和dCCEe型及e抗原阴性的dccEE型。

我国Rh阴性血源稀少，而随着医疗和社会保障体系的不断完善，RhD阴性血液的需求量不断增多，经常会出现供不应求的局面。为了保障Rh阴性患者及时、安全输血，在掌握了柳州市阴性献血者Rh表型分布特征的基础上，我们建议做好以下几方面的工作：(1)加大宣传力度，合理管理Rh阴性献血者，继续筛查Rh阴性献血者并检测表型，不断扩大Rh阴性表型库。(2)为患者制定合适的输血策略，指导临床对Rh阴性患者尽量进行自身输血，以减少产生免疫性抗体的概率。(3)对于长期依赖输血治疗及有妊娠史的RhD阴性患者，应常规筛查不规则抗体，并检测C、c、E、e 4个Rh抗原，条件允许的情况下尽量输注Rh血型完全相合的血液，以保证输血安全。(4)要充分考虑到极少部分含有Rh抗体的RhD阴性患者对血液的特殊要求。由于O型dCCee(9.58%)、dCCEe(0.25%)、dccEE(0.98%)所占比例低，不会对日常RhD阴性患者的用血需求造成冲击，再加上O型红细胞无A、B抗原的特点而在急需时具有通用性好的特点，节约有效，因而更具有实际的临床应用意义[13]。目前我中心已开展冰冻红细胞技术，成分血制备部门随时可将合格血液制备成冰冻红细胞进行长达10年的冷冻保存，故可将日常工作发现的O型dCCee、dCCEe、dccEE等特殊血型血液制备成冰冻红细胞并做好标记保存在冷冻库中，发血部门尽量不要将其随机发往医院，而是要有针对性的发放给已产生免疫性Rh抗体的患者。(5)Rh抗原检测部门在检测到罕见表型(dCCee，dCCEe，dccEE)的时候可告知血源招募部门更多与献血者沟通，耐心解释其特殊血型的重要性，鼓励成为固定献血者，在身体允许的条件下定期献血，并及时冻存，以增加稀有血型的库存比例。

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