珊瑚姜精油对白纹伊蚊和致倦库蚊的毒杀活性

周长荣 刘磊 温小军

(贵州医科大学生物教研室，贵州 贵阳 550025)

珊瑚姜精油对白纹伊蚊和致倦库蚊的毒杀活性

周长荣 刘磊 温小军△

(贵州医科大学生物教研室，贵州 贵阳 550025)

珊瑚姜； 植物精油； 白纹伊蚊； 致倦库蚊； 毒杀活性

蚊虫骚扰人们的正常生活，传播疟疾、登革热、丝虫病及乙型脑炎等疾病[1]，给人类的健康带来威胁。研究发现，植物精油对蚊幼虫具有良好的毒杀活性[2-4]，并且植物精油具有高效、安全、靶向专一和易于降解等优点。研究植物精油对蚊的毒杀活性具有广阔的应用前景。W.Choochote等[5]的研究表明郁金根状茎的己烷提取物及挥发油对埃及伊蚊的幼虫具有毒杀效果；P.Veenal等[6]发现生姜精油及迷迭香精油对史帝芬塞疟蚊、埃及伊蚊及热带家蚊(的蚊卵都具有显著的杀灭效果；而珊瑚姜精油对蚊虫的活性从未见报道。本实验研究了珊瑚姜精油对白纹伊蚊和致倦库蚊s幼虫和蛹的毒杀作用，为以后植物源杀幼剂的研究提供基础资料。

1 材料与方法

1.1 植物精油 珊瑚姜块茎购自花鸟市场，经贵州医科大学药学院龙庆德教授鉴定，确认为珊瑚姜。并过40目筛，采用水蒸汽蒸馏法提取精油：将150 g的珊瑚姜粉末置于2 000 mL的圆底烧瓶中，加入1 500 mL的蒸馏水，过夜浸泡；蒸馏6 h，精油收集于棕色试剂瓶内，经无水硫酸钠干燥后，保存于4 ℃冰箱中备用。

1.2 供试蚊虫 实验用虫均为贵州医科大学生物教研室蚊房训养的白纹伊蚊和致倦库蚊的IV龄幼虫和蛹。驯养温度：(26±2)℃，湿度：(65±5)%，光照周期14L∶10D。实验挑选大小一致、健壮的IV龄幼虫和蛹进行。

1.3 珊瑚姜精油对白纹伊蚊和致倦库蚊幼虫和蛹的毒杀活性 参照WHO[7]的方法，进行优化测试。以1 g精油∶20 mL的无水乙醇的比例对珊瑚姜精油进行溶解，然后用去氯水制备成1 000 mg/L的精油母液。分别将幼虫及蛹各30头接入200 mL的塑料杯中，再将不同浓度的精油溶液各100 mL分别注入塑料杯中进行毒杀实验。实验过程在幼虫所需的正常生长环境条件下进行，实验过程中不进行喂食。以相同浓度的乙醇溶液作为溶剂对照组，此外，同时做空白对照组。实验进行24 h后观察幼虫情况：用吸管刺激幼虫，幼虫不游动或不能游到水面(没有显著的潜水反应)，即视为个体已经死亡。各个珊瑚姜精油浓度重复3次实验，统计死亡率为3次的平均值，校正死亡率按Abbott公式计算：

校正死亡率=处理组死亡率-对照死亡率/1-对照死亡率×100%

1.4 统计学方法 参照文献[8]通过SPSS 17.0软件对不同精油浓度条件下的致死率进行处理，分别得出两种蚊虫IV龄幼虫和蛹的LC50，回归方程，95%置信区间(95% CI)，卡方值。

2 结 果

毒杀实验中，将幼虫或蛹放入珊瑚姜精油稀释液后，幼虫开始运动加快后渐渐沉入瓶底死亡。两种蚊的幼虫后虫体稍弯，头尾呈灰黑色，两种蚊的蛹身体松弛，尾部直伸，体长增加，而致倦库蚊身色变黄。乙醇对照组和空白对照无个体死亡。珊瑚姜精油对白蚊伊蚊和致倦库蚊幼虫和蛹的毒杀结果表明(表2)：珊瑚姜精油对白纹伊蚊和致倦库蚊IV龄幼虫24 h的LC50分别为77.994和66.574 mg/L;对蛹24 h的LC50分别是299.164和204.857 mg/L。由此可见，珊瑚姜精油对白纹伊蚊和致倦库蚊IV龄幼虫的毒杀效果比其对蛹的毒杀效果显著而且珊瑚姜精油对IV龄幼虫LC50的浓度值远低于对蛹的LC50浓度值；珊瑚姜精油对致倦库蚊的幼虫和蛹的毒杀活性比对白纹伊蚊的强，即珊瑚姜精油的对致倦库蚊的毒杀LC50比白纹伊蚊的毒杀LC50低。

表2 珊瑚姜精油对白纹伊蚊和致倦库蚊IV龄幼虫和蛹的毒杀活性

注：*死亡率与浓度之间的线性关系在0.05水平上有统计意义(P﹤0.05)。

3 讨 论

珊瑚姜精油对两种蚊的幼虫和蛹具有明显毒杀活性，但对两种蚊虫的毒杀活性存在差异，即致倦库蚊幼虫和蛹比白纹伊蚊幼虫和蛹敏感，因此在实验过程中供试蚊虫的种类对毒杀结果有很大的影响，同时也表明植物精油的杀虫活性有一定的特异性。

WHO对植物杀虫剂对蚊幼虫杀虫活性还没有制定相应的标准，根据S.S.Cheng等[9]对杀虫活性分类标准来看，杀虫活性判断标准为：LC50>100 mg/L为无活性，LC50<100 mg/L为有活性，LC50<50 mg/L为具有较高活性。珊瑚姜对白蚊伊蚊和致倦库蚊的IV龄幼虫24 h LC50分别为77.994/66.574 μg/mL，均低于100 mg/L，表明珊瑚姜精油对两种幼虫均有毒杀活性。关于植物精油对蚊幼虫和蛹的毒杀活性一直是蚊虫防治研究中的热点，研究[10-12]发现，岭南花椒果实精油对白纹伊蚊IV龄幼虫24 h的LC50值为163.42 μg/mL；竹叶花椒果实精油对白纹伊蚊和致倦库蚊的24 h的LC50值分别为258.497/121.884 μg/mL；山苍子精油对白蚊伊蚊24h的LC50为82.48 μg/mL；与以上植物精油相比，珊瑚姜精油精油对白纹伊蚊和致倦库蚊幼虫具有更强的毒杀活性，因此该精油在蚊幼虫的生物防治方面具有更好的利用价值，更具开发成高效环保的植物源蚊虫杀幼剂的潜力。

[1] Kiran SR, Devi PS. Evaluation of mosquitocidal activity of essential oil and sesquiterpenes from leaves of Chloroxylon swietenia DC[J]. Parastology Research, 2007, 101: 413-418.

[2] 曾冬琴，彭映辉，陈飞飞，等．小蓬草精油对两种蚊虫的毒杀活性和成分分析[J]．昆虫学报，2014, 57(2): 205-206.

[3] Sharon SV, Diego FZ, Stelia CM, et al. Essential oils with insecticidal activity against larvae of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)[J]. Parasitology Research?2014, 113(7): 2647-2654.

[4] 卢钰铎,彭映辉,扶巧梅,等．福建柏精油对蚊虫的生物活性[J]．农药学学报，2014, 16(3): 294-295.

[5] Choochote W, Chaiyasit D, Kanjanapothi D, et al. Chemical composition and antimosquito potential of rhizome extract and volatile oil derived from Curcuma aromatica against Aedes aegypti(Diptera：Culicidae)[J]．Journal of vector ecology, 2005, 30(2): 302.

[6] Veena P, Tripathi, AK, Aggarwal KK, et al. Insecticial, repellent and oviposition-deterrent activity of selected essential oils against Anopheles stephensi, Aedes aegypti and Culex quinquefasciatus[J]. Bioresource Technol, 2005, 96(16): 1749-1757.

[7] World Health Organization:Guidelines For Laboratory and field Testing Of Mosquito larvicides: WHO/CDS/WHOPES/GCDPP/2005: 13.

[8] 武怀横，万鹏，黄民松.毒力回归方程计算方法及相应软件使用介绍[J].安徽农业科学，2014，42(27):9335-9338.

[9] Cheng SS, Cheng HT, Cheng ST, et al. Bioactivity of selected plant essential oils against the yellow fever mosquito Aedes aegypti larvae[J]. Bioresour Technol, 2003, 89: 99-102.

[10] 彭映辉，张云，陈飞飞，等．岭南花椒果实精油成分的分析以及对两种蚊虫的毒杀活性[J]．中南林业科技大学学报，2010, 30(2): 60-63.

[11] 张云，彭映辉，曾冬琴，等．竹叶花椒果实精油对两种蚊虫的毒杀活性研究[J]．广西植物，2010, 30(2): 274-279.

[12] 陈飞飞，彭映辉，晏许超，等．山苍子精油对白纹伊蚊的生物活性及其成分分析[J]．中国生物防治学报，2012, 28(4): 521-527.

贵州省科技厅与贵阳医学院联合基金(黔科合LG字[2012]15号)

R931

B

1000-744X(2016)01-0038-02

2015-10-09)

△通信作者,E-mail: 2547285543@qq.com