尿核基质蛋白-22测定在膀胱癌中的临床应用*

李辉英 陈彤 刘显辉

（广东省兴宁市中医医院检验科兴宁 514500）

●诊疗经验●

尿核基质蛋白-22测定在膀胱癌中的临床应用*

李辉英 陈彤 刘显辉

（广东省兴宁市中医医院检验科兴宁 514500）

目的：研究分析尿核基质蛋白-22测定在膀胱癌诊断中的应用价值。方法：随机抽取我院2015年9月～2016年3月收治的疑似膀胱癌患者50例作为研究对象，采用酶联免疫法对其尿样中的核基质蛋白-22水平进行测定，并行尿脱落细胞学检查，分别计算两种方法检查时患者的诊断阳性率。以患者的最终组织病理学诊断结果为依据，对核基质蛋白-22水平测定与尿脱落细胞学检查诊断膀胱癌的灵敏度、特异性、准确度进行计算，同时分析核基质蛋白-22水平与膀胱癌患者病理分级之间的相关性。结果：核基质蛋白-22水平测定、尿脱落细胞检查诊断膀胱癌的阳性率分别为66.00%和16.00%，检测灵敏度分别为86.67%、40.00%，特异性分别为42.86%、94.29%，准确度分别为56.00%、78.00%，核基质蛋白-22水平测定在检测阳性率、灵敏度上均显著高于尿脱落细胞检查，而检测特异性和准确度低于尿脱落细胞检查，差异均有统计学意义（P＜0.05）。在组织病理学检查确诊为膀胱癌的患者中，核基质蛋白-22检测水平随病理分级的升高而升高，且各级检测结果的比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：核基质蛋白-22测定应用于膀胱癌的筛查中，具有较高的灵敏度，且其检测水平与膀胱癌患者的病理分级之间存在显著相关性，可以将其作为膀胱癌的首选筛查方法，颇具临床应用价值。

膀胱癌；核基质蛋白-22；尿脱落细胞学；诊断价值

膀胱癌是发生率最高的泌尿系统恶性肿瘤之一，且随着生活工作环境的恶化，其发病率呈不断上升趋势，更有数据研究显示，膀胱癌的术后复发率高达70%～80%[1]。对于膀胱癌的早期诊断、术后复发的预测与评估都是目前研究的重点。临床上筛查、诊断膀胱癌的方法较多，其中，膀胱镜和尿脱落细胞学检查一直被认为是膀胱癌初诊及随访探查的“金标准”[2]，但是前者因检查有创无法用于合并出血倾向的急性膀胱炎患者，而后者则相对而言，敏感性略低，使其使用都受到一定程度的限制；寻找合适的、高敏感性、高特异性、可操作性强、重复性强的无创膀胱肿瘤标志物成为研究的重点。本文就我院2015年9月～2016年3月收治的疑似膀胱癌患者50例作为研究对象，探讨核基质蛋白-22测定在膀胱癌诊断中的应用价值。现报告如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料随机抽取我院2015年9月～2016年3月收治的疑似膀胱癌患者50例作为研究对象，患者均有肉眼血尿病史，且经超声检查提示膀胱位置存在占位性病变。50例患者中男36例，女14例；年龄32～79岁，平均（57.2±2.5）岁。

1.2 方法所有患者均行尿样核基质蛋白-22水平测定和尿脱落细胞学检查。尿样的采集：选择在上午8～12点完成尿液标本的一次性收集，将获得的标本避光保存，并迅速转入含有防腐剂的尿样收集瓶中。尿样核基质蛋白-22水平测定：抽取5 ml尿样，在室温下进行低速离心（离心速度为500 r/min，离心15 min），使用上海酶联生物有限公司生产的双抗体夹心ELISA试剂盒对尿样中的核基质蛋白-22进行测定，具体方法：抽取9个孔条，将5个标准品、3个参考品以及经离心处理后的尿样标本依次吸入到已包被单抗的小孔板内，在18～25℃的室温下孵育，孵育时间为2 h，使其与含异羟基洋地黄毒甙元的单抗、酶联羊抗异羟基洋地黄毒甙元相继发生反应，并以显色剂进行显色处理，使用伯乐生命医学产品（上海）有限公司生产的酶标仪进行比色（波长设定为490 nm）。所有操作均严格遵照试剂盒及检测仪器的操作说明进行。以测定的标准品吸光度建立标准曲线，经参考品浓度对其线性可行性验证之后，通过该标准曲线对尿样中核基质蛋白-22的含量进行计算。当核基质蛋白-22的检测结果在10 IU/ml以上时，可以判断为检测阳性[3]。尿脱落细胞学检查：取20 ml尿样，室温下在1 500 r/min的离心速度下离心15 min，将获得的尿沉渣依次进行涂片和HE染色处理，并于显微镜下观察并寻找癌细胞，所有患者均进行为期3 d的连续检查，只要有一次发现有癌细胞存在则可判断为检测阳性[3]。

1.3 评价指标分别计算核基质蛋白-22水平测定、尿脱落细胞检查两种方法诊断膀胱癌的阳性率。以患者的最终组织病理学诊断结果为依据，对核基质蛋白-22水平测定与尿脱落细胞学检查诊断膀胱癌的灵敏度、特异性、准确度进行计算，同时分析核基质蛋白-22水平与膀胱癌患者病理分级之间的相关性。

1.4 统计学方法数据采用SPSS12.0软件进行统计学分析，计量资料用（±s）表示，采用t检验，计数资料采用卡方检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 核基质蛋白-22水平测定、尿脱落细胞检查两种方法诊断膀胱癌的结果分别对核基质蛋白-22水平测定、尿脱落细胞检查诊断膀胱癌的结果进行观察，可见其检测阳性率分别为66.00%（33/50）和16.00%（8/50），以组织病理学诊断结果为依据，则其检测灵敏度分别为86.67%（13/15）、40.00%（6/15），特异性分别为42.86%（15/35）、94.29%（33/35），准确度分别为56.00%（28/50）、78.00%（39/50），可见核基质蛋白-22水平测定在检测阳性率、灵敏度上均显著高于尿脱落细胞检查，而检测特异性和准确度低于尿脱落细胞检查，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1、表2。

表1 核基质蛋白-22水平测定结果与组织病理学诊断结果的比较（例）

表2 尿脱落细胞检查结果与组织病理学诊断结果的比较（例）

2.2 核基质蛋白-22水平与膀胱癌患者病理分级之间的相关性按照患者的组织病理学诊断结果，15例确诊为膀胱癌的患者中，病理分级为G1、G2、G3的患者分别有5例、7例、3例，其核基质蛋白-22检测水平随病理分级的升高而升高，且各级检测结果的比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 膀胱癌不同病理分级患者的核基质蛋白-22水平比较（±s）

表3 膀胱癌不同病理分级患者的核基质蛋白-22水平比较（±s）

3 讨论

核基质是细胞核的骨架结构，可以在维持细胞核正常形态、大小等过程中发挥重要作用，并能参与DNA复制、转录、RNA合成以及基因表达的调控[4]。由于细胞大小、形态的异常改变被认为是细胞癌变的重要病理学特征，则核基质的改变也与癌细胞的出现息息相关。其中，核基质蛋白-22是核基质蛋白（与基质中的RNA结合的一种蛋白质）的一种，属于中央核基质[5]。正常情况下，协调核有丝分裂期间的染色体正确并使其均等地分配到子代细胞中核有丝分裂装置蛋白的主要功能，但当细胞发生癌变的时候，由于恶变细胞核中的遗传物质无法在有丝分裂末期完成正常分配，核有丝分裂装置蛋白的合成量急剧升高，作为核有丝分裂装置蛋白的亚单位的核基质蛋白-22水平也会相应升高，并于细胞凋亡后经细胞核释放，以可溶性复合物或片段的形式存在于尿液中。有调查数据显示，与正常人尿路上皮细胞相比，膀胱癌患者的上皮细胞中核基质蛋白-22的含量可高出25倍，因而通过对尿液中核基质蛋白-22水平的测定可以对膀胱癌患者进行早期诊断[6]。

本文分别采用了核基质蛋白-22测定、尿脱落细胞检查两种方法对50例疑似膀胱癌的患者进行了检查，结果发现核基质蛋白-22测定在检测阳性率和灵敏度上均相对较高，且可随癌症患者病理分级的升高的升高，这与肿瘤细胞恶变程度升高导致的增殖分裂活跃度增加、组织细胞溃解数量增多有关，提示核基质蛋白-22是检测膀胱癌的敏感指标[7]。但是其在检测特异性上则比较低，仅为42.86%，这可能与尿管的留置、尿道异物的存在、泌尿系感染、肠代膀胱等有关。李盛宽等[8]的研究还对比了初发性膀胱癌和继发性膀胱癌患者的术前术后的核基质蛋白-22水平，可见，初发性膀胱癌术前的核基质蛋白-22水平显著更高，但经手术治疗后，则核基质蛋白-22水平均显著降低，提示核基质蛋白-22测定对于患者的术后评估与预测也有一定价值。总的来说，核基质蛋白-22测定应用于膀胱癌的筛查中，具有较高的灵敏度，且其检测水平与膀胱癌患者的病理分级之间存在显著相关性，可以将其作为膀胱癌的首选筛查方法，颇具临床应用价值。

[1]李辉英.尿核基质蛋白-22和液基细胞学在血尿患者膀胱癌筛查中的应用[J].广东微量元素科学,2016,23(7):42-44

[2]梁安坡,张玉香,张金庄.尿NMP22及Cox-2蛋白含量检测对浅表性膀胱癌电切术后复发的预判价值研究[J].海南医学院学报, 2015,21(12):1716-1718

[3]吴静,方克伟.尿液中核基质蛋白22联合端粒酶活性检测诊断膀胱癌的实验研究[J].现代肿瘤医学,2013,21(3):595-598

[4]毕长富,张克荣,董浩,等.尿核基质蛋白22测定在膀胱癌诊断中的应用价值[J].河北医药,2010,32(14):1847-1848

[5]杨青,李俊,梁朝朝,等.核基质蛋白22联合尿脱落细胞学检查对膀胱癌诊断的价值[J].安徽医科大学学报,2012,47(2):220-222

[6]崔国兴.尿端粒酶、NMP22和ImmunoCyt联合检测在膀胱癌诊断中的应用[J].现代泌尿外科杂志,2013,18(2):145-148

[7]刘民,刘胜,赵万里,等.尿肿瘤标志物联合检测在膀胱癌早期诊断中的应用价值[J].河北医药,2011,33(2):179-180

[8]李盛宽,邓耀良,刘德云,等.尿核基质蛋白在膀胱癌中的临床意义[J].广西医科大学学报,2013,30(5):682-685

The Clinical Application of Urinary Nuclear Matrix Protein-22 determination in Bladder Cancer

LI Hui-ying,CHEN Tong,LIU Xian-hui
(The Department of Clinical Laboratory,Xingning Chinese Medicine Hospital,Guangdong,Xingning514500)

Objective:To study the value of urinary nuclear matrix protein-22 determination in the diagnosis of bladder cancer. Methods:From September 2015 to March 2017,50 suspected bladder cancer patients were randomly selected as the research subjects,by using the method of enzyme-linked immune,the level of nuclear matrix protein-22 in the urine samples were determined,exfoliative urine cytology was also used,the patient's diagnosis positive rates were calculated for two methods respectively.On the basis of the final histopathologic diagnosis,the sensitivity,specificity and accuracy for diagnosis of bladder cancer by the nuclear matrix protein-22 level determination and exfoliative urine cytology examination were compared,at the same time the correlation between the nuclear matrix protein-22 level and pathology classification of patients with bladder cancer was analyzed.Results:The positive rate for the diagnosis of bladder cancer was 66.00%and 16.00%,respectively by the nuclear matrix protein-22 determination and exfoliated urine cytology and the sensitivity were 86.67%,40.00%,the specificity of 42.86%,94.29%and the accuracy of 56.00%,78.00%respectively,the positive rate and the sensitivity of the nuclear matrix protein-22 determination were significantly higher than those of exfoliated urine cytology,but the specificity and the total accuracy were lower than those of exfoliated urine cytology,the differences were statistically significant(P＜0.05).In the patients diagnosed by histopathological examination the level of nuclear matrix protein-22 increased when the pathological grade rose,and the differences of test results were statistically significant among different grades(P＜0.05).Conclusion:The nuclear matrix protein-22 determination has high sensitivity in bladder cancer screening,there is a significant correlation between the test level and the pathological grading of bladder cancer.It can be as the preferred method for screening of bladder cancer,and has clinical value.

Bladder cancer;Nuclear matrix protein-22;Exfoliative urine cytology;Diagnosis value

R737.14

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2016.11.030

2016-10-11）

广东省梅州市医药卫生科研立项课题（编号：2015-B-81）