辅酶Q10注射液细菌内毒素检查方法的研究

邓 斌

（重庆市食品药品检验检测研究院，重庆 401120）

辅酶Q10注射液细菌内毒素检查方法的研究

邓 斌

（重庆市食品药品检验检测研究院，重庆 401120）

根据中国药典2010年版二部附录细菌内毒素检查法要求，建立辅酶Q10注射液的细菌内毒素检查方法，并进行方法学验证。结果表明，辅酶Q10注射液原液对细菌内毒素凝集反应无干扰，其细菌内毒素限值符合规定。用本法检查辅酶Q10注射液细菌内毒素是可行的。

辅酶Q10注射液；鲎试剂；细菌内毒素

辅酶Q10是一种良好的生化药物，具有多种生物学功能，能辅助治疗充血性心力衰竭、冠心病、高血压、心律失常、继发性醛固酮增多症、颈部外伤后遗症、脑血管障碍、失血性休克及肝炎等多种疾病[1，2]。鲎试剂法检查辅酶Q10注射液的细菌内毒素尚未见报道，笔者依照中国药典2010年版二部附录细菌内毒素检查法等[3，4]，对辅酶Q10注射液细菌内毒素检查方法进行研究。

1 实验材料

鲎试剂（TAL）：批号20120108，规格0.1 mL/支，标示灵敏度0.25 EU/mL，湛江海洋生物制品厂；批号1201022，规格0.1 mL/支，标示灵敏度0.25 EU/mL，湛江安庆斯生物有限公司。细菌内毒素工作标准品：批号20121206，效价10 EU/支，湛江海洋生物制品厂。细菌内毒素检查用水（BET水）：批号20121004，2 mL/支，湛江海洋生物制品厂。辅酶Q10注射液：批号13080001、13080002和13080006，规格5 mg/瓶，国内某企业提供。

2 方法与结果

2.1 TAL灵敏度复核

按照中国药典2010年版二部附录细菌内毒素检查法要求，将细菌内毒素工作标准品用BET水配成2.0λ、1.0λ、0.5λ和0.25λ 4个浓度的内毒素标准溶液，进行TAL的标示灵敏度复核，结果见表1。复核的灵敏度λC均在0.5λ～2λ范围内，符合要求。

表1 TAL灵敏度复核结果表

2.2 辅酶Q10注射液细菌内毒素限值的确定

细菌内毒素限值L=K/M，K为按规定的给药途径，人用1 kg体重1 h最大可接受的内毒素剂量，注射剂K=5 EU/（kg·h）；M为人用1 kg体重1 h最大剂量（人均体重按60 kg计算），参考本品临床用法用量，M为500 mL/60 kg；可计算出本品L=K/M=5.0/（500/60）=0.6 EU/mL。考虑到用药安全性，确定本品细菌内毒素限值L为0.5 EU/mL。

2.3 辅酶Q10注射液最大有效稀释倍数

根据公式MVD=c·L/λ计算。L为本品的细菌内毒素限值，λ为TAL灵敏度，c为本品浓度。当L=0.5 EU/mL，c=1 mL/mL，λ=0.25 EU/mL时，MVD=1×0.5/0.25=2倍。

2.4 辅酶Q10注射液干扰预试验

选用20120108批TAL进行干扰预试验，λ为0.25 EU/mL。取13080001批样品，用BET水将样品稀释1、2倍，获得1∶1和1∶2样品稀释液，以样品原液和稀释液为样品管，用样品原液和稀释液将细菌内毒素工作标准品制成2.0λ细菌内毒素标准溶液作为样品阳性管，同时以不加细菌内毒素的BET水为阴性对照管，以2.0λBET水为阳性对照管，进行预干扰试验，结果见表2。

表2 辅酶Q10注射液干扰预试验表

表2结果表明，用0.25 EU/mL TAL进行试验，样品原液、1和2倍稀释液均无干扰，即样品原液对细菌内毒素与TAL的反应无干扰作用。

2.5 样品干扰试验

取样品（批号13080001），将样品溶液加到TAL管中，同时进行阴性对照试验和样品阴性试验，以确定样品原液对干扰试验的影响，结果见表3。

表3 辅酶Q10注射液干扰试验表

表3结果表明，2个批号TAL的Es分别为0.125 EU/mL和0.250 EU/mL，均在0.5λ～2λ范围内，且Et均为0.125 EU/mL，在0.5Es～2Es范围内，确认样品原液无干扰。

2.6 样品细菌内毒素检查

按照中国药典2005年版二部附录细菌内毒素检查法要求进行试验，取13080001、13080002和13080006批样品，分别用2个厂家的TAL进行细菌内毒素检查，结果见表4。

表4 样品细菌内毒素检查结果表

表4结果表明，阳性对照管与样品阳性对照管均为阳性，阴性对照管与样品管均为阴性，说明3批样品的细菌内毒素检查结果均符合规定。

3 讨论

试验结果表明，本品原液对标示灵敏度为0.25 EU/mL的2批不同厂家生产的TAL均无干扰作用，说明所选灵敏度TAL可用于样品细菌内毒素的检查。

在干扰试验前进行干扰预试验，其目的在于确定本品对细菌内毒素检测不产生干扰的最小稀释倍数，如果本品的最大有效稀释倍数下均无法排除干扰，则应考虑使用更高灵敏度的TAL进行试验。

[1]杨立军.辅酶Q10的现代研究进展[J].海峡药学，2008，20（12）：135-137.

[2]刘 丽.辅酶Q10治疗心血管疾病的应用[J].中国实用医药，2007，2（25）：71.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].2部.北京：化学工业出版社，2010：附录85-88.

[4]彭 艳，张 菡.注射用盐酸甲氯酚酯的细菌内毒素检查方法.中国药业，2009，18（1）：20-21.

Study on Bacterial Endotoxin Test for Coenzyme Q10Injection

Deng Bin
（Chongqing Institute of Food and Drug Inspection and Testing, Chongqing 401120, China）

Bacterial endotoxin test method of coenzyme Q10injection was established according to the requirement of Bacterial Endotoxin Test in the Appendix of the Chinese Pharmacopoeia 2010, and the method validation was carried out. The results showed that the coenzyme Q10solution had no interference with the bacterial endotoxin agglutination reaction, and the bacterial endotoxin limit was in accordance with the regulation. Using this method to check coenzyme Q10bacterial endotoxin injection is feasible.

Coenzyme Q10injection; Limulus reagent; Bacterial endotoxin

R917

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.22.036

邓 斌（1968-），男，重庆人，高级工程师；专业方向为食品药品检验。