党参多糖口服液对大鼠的长期毒性研究

侯丽丽，韩立，巩忠福，晏永新

( 1. 山西省兽药监察所，太原 030027；2. 河南省兽药监察所，郑州 450008；3. 中国兽医药品监察所，北京 100081；4. 江西新世纪民星动物保健品有限公司，南昌 330096)

党参多糖口服液对大鼠的长期毒性研究

侯丽丽1，韩立2，巩忠福3，晏永新4

( 1. 山西省兽药监察所，太原 030027；2. 河南省兽药监察所，郑州 450008；3. 中国兽医药品监察所，北京 100081；4. 江西新世纪民星动物保健品有限公司，南昌 330096)

为了解长期使用党参多糖口服液对机体的毒性反应，以便指导临床长期用药的安全性。大鼠灌胃给药党参多糖口服液，在给药4周和停药2周内，观察大鼠一般行为活动等情况，进行血液学、血液生化学和主要脏器病理学检查，考察党参多糖口服液给药的长期毒性。结果显示，各组大鼠在给药期间和恢复期内,一般情况和行为活动、粪便等均无异常变化，血液学、血液生化学和主要脏器病理学检查，均无明显变化。因此，连续大鼠灌胃给药党参多糖口服液未见明显毒性反应，说明党参多糖口服液具有较高的临床用药安全性。

党参多糖口服液；大鼠；长期毒性

党参为临床常用的传统补益中药，在我国产地众多，主要分布于山西、陕西、宁夏等地，资源丰富。党参味甘性平，具有补中益气，健脾益肺之功效，用于畜禽脾胃虚弱，少食腹泻，肺虚咳喘，体倦无力，气虚垂脱等症[1]。党参的主要成分包括多糖、党参苷、三萜类成分等，现代药理研究表明，党参具有调节血糖、促进造血机能、降压、抗缺氧、耐疲劳、增强机体免疫力、调节胃收缩及抗溃疡等多种作用[2]。其主要活性成分之一党参多糖具有免疫调节、消除自由基、造血、抗疲劳及提高动物生产性能等作用[3-4]。党参多糖口服液对动物的长期用药毒性目前未见报道。本试验拟研究党参多糖口服液对大鼠的长期毒性，以了解长期使用党参多糖口服液对机体的毒性反应，指导临床长期用药的安全性。

1 材料与方法

1.1 试验动物 清洁级SD种大鼠80只，体重80～100 g, 雌雄各半，由江西中医学院实验动物中心提供。1.2 药品、试剂与仪器 党参多糖口服液(100 mL/瓶，2 g生药/mL)，江西新世纪民星动物保健品有限公司，批号：20100501；血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)均由济南希森美康医用电子有限公司提供，批号：ZG6004；十万分之一电子分析天平(AB204-N，METTLER TOLEDO)；全自动生化分析仪(Sysmex chemix-180，日本FURUNO ELECTRIC)；血细胞计数仪(SWELAB AC900+，瑞典Boule Medical AB)。

1.3 方法 将大鼠随机分为高、中、低剂量组及对照组，每组20只。试验组给药剂量为1 mL/100 g体重，每天灌胃给药1次，连续给药4周，对照组给予等体积生理盐水。每天观察动物精神状态、行为、活动、毛色、二便等一般体征，每7 d称重1次，并依体重变化调整药量。给药结束后，每组取14只大鼠，禁食12 h，进行血液学指标检查、血液生化学指标检查，系统尸检和病理组织学检查。各组余下动物停药进行可逆性观察2周后，同前批动物一样进行处理[5-6]。

1.4 观察和检测指标

1.4.1 一般观察 每天观察并记录各组动物一般行为活动、粪便、毛发等情况。

1.4.2 血液学指标检查 大鼠尾静脉取血，用血细胞计数仪测定血红蛋白(HGB)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)及分类。

1.4.3 血液生化学指标检查 大鼠采血，分离血浆，用生化分析仪测定血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)等指标。

1.4.4 系统尸检和病理组织学检查 对心、肝、脾、肺、肾进行称重及肉眼观察有无异常，分别计算每100 g动物体重的脏器比重量( g/l00 g体重)即脏器系数[7]，并对上述脏器用10%福尔马林固定、切片厚5 μm、H·E染色，用200倍显微镜观察进行病理组织学检查。

1.5 统计学方法 采用SPSS 20.0进行统计分析。数据经过方差齐性检验，用均数±标准差表示，组间差异比较用独立样本t检验。

2 结果

2.1 一般观察 给药期间和停药2周内，各组大鼠精神、行为、活动、毛色、二便等一般体征均未见异常，也未出现因药物毒性而致死亡的情况。

2.2 体重 各给药组，给药4周与停药2周后的体重明显增长，经t检验，与对照组比较无显著变化(P>0.05)(表1-表2)。

表1 党参多糖口服液对大鼠给药4周的体重增长的影响±s)

同列数据标注字母不同者差异显著，以下表同。

表2 党参多糖口服液对大鼠停药2周的体重增长的影响±s)

2.3 血常规指标变化 各给药组，给药4周后与停药2周后的红细胞(RBC)计数、白细胞(WBC)计数、白细胞分类(DC)、血红蛋白(HGB)含量的检测结果和凝血时间，经t检验，与对照组比较均无明显变化(P>0.05)(表3)。

表3 党参多糖口服液对大鼠血液学指标的影响±s)

2.4 血清生化指标变化 各给药组，给药4周后与停药2周后AST、ALT、Crea、 BUN的检测结果，经t检验，与正常对照组比较无明显变化(P>0.05)(表4)。

表4 党参多糖口服液对大鼠血液生化学指标的影响±s)

2.5 系统尸检和病理组织学 给药4周后与停药2周后，动物尸体解剖，肉眼逐个观察各脏器，未见异常变化。取大鼠心、肝、脾、肺、肾分别称重，计算出脏器系数，各组之间的脏器系数无明显变化(P>0.05)(表5)。各脏器病理组织学检查未发现异常。

表5 党参多糖口服液对大鼠给药的脏器系数的影响 ±s)

图1 主要脏器组织病理切片(第1～5行分别为心、肝、脾、肺、肾，第1～4列分别为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组)

3 讨论与小结

长期毒性试验可以观察连续反复给药时，实验动物出现的毒性反应、剂量与毒性效应的关系、毒性靶器官、毒性反应的性质和程度、毒性反应是否可逆等；还可观察在连续反复给药时，动物的耐受量、无毒反应剂量、毒性反应剂量及安全范围；并可了解毒性产生时间、达峰时间、持续时间及可能反复产生毒性反应的时间，有无迟发毒性反应、有无蓄积毒性或耐受性等[8]。可见，长期毒性试验在产品的安全性评价中起到非常重要的作用。

何国耀[9]等以党参茎叶为研究对象，考察了党参茎叶的急、慢性毒性，血液学检查。结果表明，红细胞数、血色素、非蛋白氨、麝香草酚浊度、硫酸锌浊度、谷草和谷丙转氨酶等均在正常范围，剖检未见明显的肉眼变化，电镜检查组织细胞正常。表明党参茎叶的毒性甚微，安全范围很大，与本试验结果基本一致。另外，胡丽萍等[10]研究了以党参为主药的温经颗粒对大鼠的长期毒性反应，结果提示该药临床应用是安全的，但应注意使用剂量和疗程。

试验所采集的数据包括健康状况、体重情况，以及血液学、血液生化学等参数,党参多糖口服液大鼠连续给药4周和停药2周后，高、中、低剂量组均未见明显的毒性反应。试验大鼠在健康状况、体重情况，以及可能的急性反应、血液学、血液生化学等参数指标与对照组相比无显著性差异，剖检和组织学观察主要内脏器官的形态、组织结构均未发现异常变化，故未发现党参多糖口服液明显的长期毒性。试验结果表明党参多糖口服液安全范围大，具有较高的临床用药安全性。

[1] 中国兽药典委员会主编.中华人民共和国兽药典(2010年版二部)[S].

[2] 王洁,邓长泉,石磊,等.党参的现代研究进展[J]. 中国医药指南, 2011, 9 (31):279-281.

[3] 陈克克,王喆之.党参多糖的研究进展[J]. 现代生物医学研究进展, 2007, 7 (4):635-637.

[4] 许会军,潘永全.中药添加剂复方党参多糖散在肉仔鸡日粮中的应用效果[J].中国饲料,1997,(4):17-18.

[5] 陈奇主编.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社.2006年:110-113.

[6] 王林丽,李卓恒,吕金胜,等.益精灵口服液大鼠长期毒性实验研究[J].中国药业, 2014(19):34-35.

[7] 王林丽,李卓恒,吕金胜,等.乳宁口服液大鼠长期毒性试验研究[J].中国药业 ,2013, 22(14):14-15.

[8] 许迪,孔利佳,杜佐华,等.大鼠长期毒性试验质量控制探讨[J].中国比较医学杂志,2010, 20(1):61-63.

[9] 何国耀,王建国,郭福存,等.党参茎叶的急、慢性毒性试验[J].中国兽医科学, 1988(1): 51-52.

[10]胡丽萍,张惠颖,马杰.温经颗粒动物长期毒性试验.全国药物毒理学会议,2007:312-312.

(编辑：陈希)

Effects ofCodonopsispilosulaPolysaccharide Oral Liquids on the Long-term Toxicity of Rats

HOU Li-li1, HAN Li2,GONG Zhong-fu3,YAN Yong-xin4

(1.ShanxiInstituteofVeterinaryDrugControl,Taiyuan030027,China;2.HenanInstituteofVeterinaryDrugControl,Zhengzhou450008,China；3.ChinaInstituteofVeterinaryDrugControl,Beijing100081,China；4.Jiangxinewcenturyminxinganimalhealthproductsco.,Ltd,Nanchang330096,China)

In order to understand theCodonopsispilosulapolysaccharide oral liquids’ toxic reaction and degree on organism of rats for the clinical medication safety of long-term use. Rats were givenCodonopsispilosulapolysaccharide oral liquids by intragastrical administration, at the end of 4 weeks and within 2 weeks, observing the general behaviour of rats, using techniques of hematology and biochemical experimental, investigating the long-term toxicity ofCodonopsispilosulapolysaccharide oral liquids. The results showed that the general conditions, activities and faeces of the rats that both in the dosing period and recovery period had no abnormal change, hematology, biochemical experiment and pathological examination of main organs had no obvious abnormal change. Therefore, continuous intragastrical administration had no obvious toxicity, which showed theCodonopsispilosulapolysaccharide oral liquids were safety.

Codonopsispilosulapolysaccharide oral liquids; rats; long-term toxicity

侯丽丽，高级兽医师，从事中兽药检测及方法研究工作。E-mail:kyzp_090@163.com

2016-07-29

A

1002-1280 (2016) 12-0040-05

S853.74