黏液物质染色的检测操作分析

于立伟



黏液物质染色的检测操作分析

于立伟

【摘要】探讨黏液物质染色的病理检测操作，黏液染色方法众多，爱先蓝（AB）和高碘酸的结合可能是最好的“广谱黏液”染色，因为它可显示中性、弱酸性和强酸性黏液物质。专门显示强酸性黏液的染色方法有多种，包括胶体铁、高铁二胺以及经典的黏液卡红染色。酸性黏液物质由于所含酸根不同，方法各不相同，实践中宜作多种染色比较鉴别方能取得满意结果。

【关键词】黏液物质染色；病理

The pathology testing operation medicine of the mucinous material stain，mucus stain have many method． May be the alcian blue（AB）and periodic acid are the best combination for dye "the broad spectrum of mucus"，because of it can show the neutral，weak acid and strong acid mucus material． There are many ways to show the staining of strong acid mucus． Including colloidal iron，high iron diamine and mucus stuck red stain． Because of different acid radical in the acidic slime substance，take test methods are not same． A variety of comparison of the practice should be identified in order to obtain satisfactory results．

【Key words】 Mucus substance dyeing，Pathology

黏液是人体许多组织细胞都能分泌的一类物质，形态相同但其化学结构和物理性质并不尽相同。黏液染色方法众多，爱先蓝（AB）和高碘酸的结合可能是最好的“广谱黏液”染色，因为它可显示中性、弱酸性和强酸性黏液物质［1］。专门显示强酸性黏液的染色方法有多种，包括胶体铁、高铁二胺以及经典的黏液卡红染色。当癌的黏液分泌异常时（常常因为碳水化合物合成不完全），可以通过黏液染色加以推测。以上染色法的原理不尽相同。

1 材料与方法

1.1 材料

收集本院收治的胃、肠黏膜相关淋巴组织淋巴瘤标本，患者年龄22～68岁，平均（47±2）岁。

1.2 方法

1.2.1 爱先蓝-高碘酸-无色品红法（AB/PAS法） （1）试剂：①爱先蓝染液（pH 2.5）：爱先蓝8 GX（或8 GS）1 g，冰醋酸3 ml，蒸馏水97 ml，麝香草酚50 mg。②0.5%高碘酸水溶液。③无色品红液。④0.5%偏重亚硫酸钠水溶液。（2）操作：①常规切片脱蜡至水。②用爱先蓝液（pH 2.5）染10～20 min，稍水洗。③0.5%高碘酸水溶液氧化5～10 min。④流水冲洗数分钟，再用蒸馏水洗。⑤入无色品红液于暗处并加盖作用10～20 min。⑥用0.5%偏重亚硫酸钠水溶液洗3次，每次l min。⑦流水冲洗5～10 min。⑧苏木素复染。⑨水洗后常规脱水、透明、封固［2］。

1.2.2 高铁二胺-爱先蓝-高碘酸无色品红法 （1）试剂：①高铁二胺液N.Ⅳ-二甲基-间-苯二胺二盐酸盐120 mg，Ⅳ.Ⅳ-二甲基-对-苯二胺二盐酸盐20 mg，蒸馏水50 ml，60%三氯化铁水溶液1.5 ml。将两种二胺盐同时溶于蒸馏水，彻底溶解后，加入60%三氯化铁水溶液，用玻棒轻轻搅匀。此时溶液pH值应为1.4～1.5。（2）操作：①常规切片脱蜡至水。②蒸馏水洗2～3次。③室温下入高铁二胺液反应18～24 h。④流水冲洗，蒸馏水洗2～3次。⑤以下步骤同AB/PAS法。

1.2.3 Mayer黏液卡红法 （1）试剂：①Weigert铁苏木素，②Mayer卡红贮备液配方：卡红（或称胭脂红）1 g，氢氧化铝1 g，无水氯化铝0.5 g，50%乙醇100 ml。先将卡红、氢氧化铝溶解于50%乙醇混合后，再加入无水氯化铝于水浴中煮沸3～5 min（煮沸时间不足将影响着色力）［3］；冷却至室温后过滤，补足50%乙醇水溶液至总量100 ml。用小口砂瓶盛装，4℃冰箱保存，使用时恢复至室温。③Mayer卡红工作液配方：Mayer卡红贮备液1份，蒸馏水4份，临用前配制。（2）操作：①常规切片脱蜡至蒸馏水。②Weigert铁苏木素染5～10 min。③稍水洗，1%盐酸乙醇分化。④流水冲洗10 min后，入Mayer卡红工作液染30 min。⑤稍水洗。⑥常规脱水、透明、封固。

2 结果

2.1 爱先蓝-高碘酸-无色品红法（AB/PAS法）

酸性黏液物质呈蓝色，中性黏液物质呈红色，混合黏液物质呈紫红色，细胞核呈蓝色［4］。

2.2 高铁二胺-爱先蓝-高碘酸无色品红法

硫酸化酸性黏液物质呈紫棕色至棕黑色，羧基化酸性黏液物质呈蓝色，中性黏液物质呈红色，混合黏液物质呈紫红色，细胞核呈蓝色［4］。

2.3 Mayer黏液卡红法

上皮性酸性黏液物质、新型隐球菌荚膜呈红至深玫瑰红色，细胞核呈蓝色。

3 讨论

而胃的肠腺化生或肠型胃癌的癌细胞则往往分泌酸性黏液。黏液物质一般具有以下特性：对异染性染料具有异染性或称变色反应，对碱性染料具有很强的亲和力，遇醋酸可发生沉淀（胃黏膜除外）；可溶于弱碱性溶液［5］。黏液染色方法众多，爱先蓝（AB）和高碘酸的结合可能是最好的“广谱黏液”染色，因为它可显示中性、弱酸性和强酸性黏液物质。专门显示强酸性黏液的染色方法有多种，包括胶体铁、高铁二胺以及经典的黏液卡红染色。当癌的黏液分泌异常时（常常因为碳水化合物合成不完全），可以通过黏液染色加以推测。以上染色法的原理不尽相同［6］。铜酞花青染料爱先蓝与酸性黏液物质含有的羧基或硫酸根结合形成蓝色的不溶性复合物；高铁二胺染色则由二胺盐与硫酸化黏液物质结合形成紫棕色至棕黑色的复合物，反应中的催化剂三氯化铁可加快染色，并使染液pH降至1.4，从而抑制了羧基化唾液酸黏液与二胺盐的反应；黏液卡红染色以铝作媒染剂，卡红与铝形成复合物，再与黏液中的酸性基团结合而呈玫瑰红色。总之，酸性黏液物质由于所含酸根不同，方法各不相同，实践中宜作多种染色比较鉴别方能取得满意结果。在实际工作中由于HE切片时所见疑有黏液的部分难以确定是酸性或中性，故通常同时作AB、PAS、黏液卡红等几类染色，其具体应用范围主要有下述几方面：（1）一般黏液病变的观察，如结缔组织、心肌、肾脏等脏器常出现黏液性水肿、黏液变性和黏蛋白增多等。（2）肿瘤的诊断与研究，主要用于鉴别消化道疾病中的黏液变性，尤其是用于胃黏膜肠上皮化生的分型已成为临床病理的常规技术、鉴别印戒细胞与泡沫状巨噬细胞等。（3）某些肿瘤的鉴别诊断，如黏液瘤、黏液表皮样癌、滑膜肉瘤等。

参考文献

［1］ 陈琼霞，陈莹，高友晶，等． 快速黏液染色技术在胃镜活检组织中的应用［J］． 医学理论与实践，2013，26（1）: 74-75．

［2］ 李晶莹，于秀文． 免疫组化与黏液组化染色结合的双重染色技术的应用［J］． 临床与实验病理学杂志，2013，29（8）: 925-926．

［3］ 林蓁． 黏液特殊染色与免疫组化双重染色技术［J］． 诊断病理学杂志，2006，13（6）: 470，116．

［4］ 赵天如，江昌新． 免疫组化与特染双重染色同时显示瘤细胞的粘液分化和神经内分泌表达［J］． 中华综合医学，2002（3）: 264．

［5］ 翁艳，刘晋红，于桥医，等． 皮肤原发性血管纤维黏液性T细胞淋巴瘤一例［J］． 中华皮肤科杂志，2005，38（12）: 729-731．

［6］ 杨辉，刘国卓，张卓，等． 内镜下美蓝染色对早期胃癌及癌前病变的诊断价值［J］． 中国中西医结合消化杂志，2006，14（6）: 397-398．

Detection and Analysis of Mucous Substance Dyeing

YU Liwei Department of Pathology，Hegang People's Hospital，Hegang 154101，China

【Abstract】

【中图分类号】R361

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9316（2016）05-0177-02

doi:10．3969/j．issn．1674-9316．2016．05．129

作者单位：154101 黑龙江省鹤岗市人民医院病理科