川射干叶的化学成分研究Δ

罗 森，袁崇均，陈 帅，陈 雏，吴 燕，王 笳（四川省中医药科学院，成都 610041）

川射干叶的化学成分研究Δ

罗 森＊，袁崇均，陈 帅，陈 雏，吴 燕，王 笳（四川省中医药科学院，成都 610041）

目的：研究川射干叶的化学成分。方法：采用70%乙醇提取，硅胶柱层析及Sephadex LH-20色谱、薄层色谱对川射干叶的化学成分进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果：从川射干叶中分离得到12个化合物，分别为5，7，4′-三羟基-6-甲氧基黄酮（1）、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷（2）、5-羟基-4′，7-二甲氧基异黄酮（3）、射干苷（4）、射干苷元（5）、野鸢尾苷（6）、二甲基射干苷元（7）、染料木素（8）、原儿茶酸（9）、异鼠李素-7-O-β-D-葡萄糖苷（10）、胡萝卜苷（11）、十四酸（12）。结论：化合物1、2、3均为首次从该属植物中分离得到，该研究为川射干叶质量评价奠定了一定基础。

川射干叶；化学成分；结构鉴定

川射干为鸢尾科植物鸢尾Iris tectorum Maxim.的干燥根茎，具有清热解毒、祛痰、利咽的功效，用于热毒痰火郁结、咽喉肿痛、痰涎壅盛、咳嗽气喘［1］，主产于四川、重庆、贵州、云南、广西等省市，富含总黄酮成分且提取物有很强的药理作用［2］。我院以川射干研制的五类新药“川射干黄酮胶囊”已获新药证书（批准号：国药证字Z20140006），为充分利用川射干这一植物资源，发现川射干植物新的药用部位，本课题组对川射干叶化学成分进行了系统研究，其70%乙醇提取物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取后，乙酸乙酯部分经硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱等反复分离纯化，得到12个单体化合物，分别是：5，7，4′-三羟基-6-甲氧基黄酮（5-7-4′-Trihydroxyl-6-methoxy isoflavone，1）、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷（Tilianin-7-O-β-D-glucopyranoside，2）、5-羟基-4′，7-二甲氧基异黄酮（5-Hydroxyl-4′，7-dimethoxy-isoflavone，3）、射干苷（Tectoridin，4）、射干苷元（Tectorigenin，5）、野鸢尾苷（Iridin，6）、二甲基射干苷元（Dimethyl tectorigenin，7）、染料木素（Genistein，8）、原儿茶酸（Protocatechuic acid，9）、异鼠李素-7-O-β-D-葡萄糖苷（Isorhamnetin-7-O-β-D-glucoside，10）、胡萝卜苷（Daucosterol，11）、十四酸（Tetradecanoic acid，12）。

1 材料

1.1 仪器

AVⅡ型400 M核磁共振仪（瑞士Burker公司）；TSQ Quantum Ultra型液相色谱-质谱联用（LC-MS）仪（美国Thermo Scientific公司）；UV759S型紫外分光光度计、TG328A型分析天平（上海精密科学仪器有限公司）；FTIR 8300型红外检测仪（日本Shimadzu公司）；RE-5205、RE-52-99型旋转蒸发仪（上海亚荣仪器厂）；SHB-ⅢS型循环真空泵（郑州长城科工贸有限公司）。

1.2 试剂

柱色谱硅胶、薄层色谱硅胶H、薄层色谱硅胶GF254（青岛海洋化工厂）；Sephadex LH-20柱（美国Pharmacia公司）；乙醇、乙酸乙酯、石油醚（60～90℃）、正丁醇均为分析纯，水为超纯水。

1.3 药材

川射干叶由本院中药种植与资源所夏燕莉副研究员提供，采自川射干培育基地（四川省成都市双流县），经鉴定为真品，标本存于本院。

2 方法与结果

2.1 提取与分离

取干燥的川射干叶10 kg，粉碎成粗粉，用6倍70%乙醇回流提取3次，每次1 h，滤过，提取液减压浓缩得浸膏，浸膏依次用石油醚（60～90℃）、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压浓缩得各部位浸膏：石油醚萃取部位（73 g）、乙酸乙酯萃取部位（207 g）、正丁醇萃取部位（92 g）。

对石油醚萃取部位进行系统分离，经硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯（50∶1→10∶1）梯度洗脱，得流分适量，流分经薄层色谱鉴别富集浓缩，再经反复硅胶洗脱、分离纯化，得到化合物9（24 mg）、12（36 mg）。对乙酸乙酯萃取部位系统分离，经硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯（5∶1→0∶1）梯度洗脱，得流分适量，流分经薄层色谱鉴别富集浓缩，再经反复硅胶洗脱、Sephadex LH-20柱分离纯化，得到化合物1（19 mg）、3（23 mg）、5（2.7 g）、7（38 mg）、8（47 mg）。对正丁醇萃取部位进行系统分离，经硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯（50∶1→10∶1）梯度洗脱得流分适量，流分经薄层色谱鉴别富集浓缩，再经反复硅胶洗脱、Sephadex LH-20柱分离纯化，得到化合物2（13 mg）、4（0.8 g）、6（33 mg）、10（23 mg）、11（30 mg）。

2.2 结构鉴定

化合物1：黄色针晶，C16H12O6，mp：290～292℃。ESI-MS m/z 301［M+H］+；1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：13.05（1H，s，5-OH），10.68（1H，brs，7-OH），10.33（1H，brs，4′-OH），7.93（2H，d，J=7.0 Hz，H-2′，6′），6.94（2H，d，J=7.0 Hz，H-3′，5′），6.75（1H，s，H-2），6.60（1H，s，H-8），3.73（3H，s，6-OCH3）。13C-NMR（400 MHz，DMSO）δ：163.6（C-2），102.5（C-3），182.1（C-4），152.6（C-5），131.5（C-6），157.2（C-7），94.3（C-8），152.4（C-9），104.4（C-10），121.1（C-1′），128.4（C-2′，6′），116.1（C-3′，5′），161.3（C-4′）。与文献［3］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为5，7，4′-三羟基-6-甲氧基黄酮（5-7-4′-Trihydroxyl-6-methoxy isoflavone）。

化合物2：淡黄色粉末，C22H22O10，mp：262～264℃。ESI-MS m/z 445［M-H］-，283［M-Glu］-；1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：12.92（1H，s，5-OH），6.72（1H，s，H-3），8.10（2H，d，J= 8.9 Hz，H-3′，5′），7.16（2H，dd，J=8.9 Hz，H-2′，6′），6.82（1H，d，J=2.1 Hz，H-8），6.49（1H，d，J=2.1 Hz，H-6），3.90（3H，s，4′-OCH3），5.05（1H，d，J=7.4 Hz，H-1″）。13C-NMR（400 MHz，DMSO）δ：163.5（C-2），103.9（C-3），182.0（C-4），162.1（C-5），99.6（C-6），163.1（C-7），94.7（C-8），156.6（C-9），105.4（C-10），122.5（C-1′），128.3（C-2′，6′），114.7（C-3′，5′），161.3（C-4′），55.4（4′-OCH3），99.7（Glu-1），73.2（Glu-2），77.4（Glu-3），69.6（Glu-4），76.4（Glu-5），60.7（Glu-6）。与文献［4］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷（Tilianin-7-O-β-D-glucopyranoside）。

化合物3：无色针状结晶，C17H14O5，mp：268～270℃。ESI-MS m/z 297［M-H］-；1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：12.87（1H，s，5-OH），7.88（1H，s，H-2），6.38（1H，d，J=2.2 Hz，H-6），6.46（1H，d，J=2.2 Hz，H-8），7.45（2H，d，J=8.8 Hz，H-2′，6′），6.98（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），3.87（3H，s，7-OCH3），3.84（3H，s，4′-OCH3）。13C-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：151.5（C-2），123.2（C-3），180.1（C-4），162.2（C-5），93.5（C-6），164.6（C-7），94.3（C-8），158.8（C-9），107.6（C-10），124.7（C-1′），130.2（C-2′，6′），114.8（C-3′，5′），158.9（C-4′），56.2（7-OCH3），55.9（4′-OCH3）。与文献［5］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为5-羟基-4′，7-二甲氧基异黄酮（5-Hydroxyl-4′，7-dimethoxy-isoflavone）。

化合物4：白色结晶，C22H22O11，mp：252～254℃，HCl-Mg反应呈玫瑰红色，AlCl3反应呈鲜黄色。ESI-MS m/z 461［M-H］-；1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：12.92（1H，s，5-OH），9.58（1H，s，4′-OH），8.44（1H，s，H-2），7.39（2H，d，J=8.5 Hz，，H-2′，6′），6.82（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），6.85（1H，s，H-8），5.07（1H，d，J=8.0 Hz，H-1″），3.80（3H，s，6-OCH3）。与文献［6］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为射干苷（Tectoridin）。

化合物5：浅黄色针晶，C16H12O6，mp：214～216℃。HCl-Mg反应显樱红色。ESI-MS m/z 299［M-H］-；1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：13.09（1H，s，5-OH），10.77（1H，s，7-OH），9.58（1H，s，4′-OH），8.34（1H，s，H-2），7.37（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.82（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），6.50（1H，s，H-8），3.74（3H，s，6-OCH3）。与文献［6］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为射干苷元（Tectorigenin）。

化合物6：白色粉末，C24H26O13，mp：211～213℃。FeCl3和Molish反应呈阳性。ESI-MS m/z 521［M-H］-；1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：12.91（1H，s，5-OH），9.27（1H，s，3′-OH），8.49（1H，s，H-2），6.90（1H，s，H-8），6.73（1H，d，J= 2.0 Hz，H-2′），6.68（1H，d，J=2.0 Hz，H-6′），5.09（1H，d，J=7.0 Hz，H-1″），3.79（3H，s，5′-OCH3），3.77（3H，s，4′-OCH3），3.70（3H，s，6-OCH3）。与文献［6］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为野鸢尾苷（Iridin）。

化合物7：白色针晶，C18H16O6，mp：189～191℃；ESI-MS m/z 521［M-H］-；1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：12.81（1H，s，5-OH），7.89（1H，s，H-2），7.45（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.98（2H，d，J=8.5 Hz，H-3′，5′），6.46（1H，s，H-8），3.95（3H，s，6-OCH3），3.92（3H，s，7-OCH3），3.84（3H，s，4′-OCH3）。与文献［7］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为5-羟基-6，7，4′-三甲氧基异黄酮（5-Hydroxy-6，7，4′-trimethoxyisoflavone），即二甲基射干苷元（Dimethy tectorigenin）。

化合物8：淡黄色针晶，C15H10O5，mp：265～267℃；ESI-MS m/z 269［M-H］-；1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：12.92（1H，s，5-OH），10.94（1H，s，7-OH），9.60（1H，s，4′-OH），8.30（1H，s，H-2），7.35（2H，d，J=8.5 Hz，H-2′，6′），6.85（2H，d，J= 8.5 Hz，H-3′，5′），6.36（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），6.23（1H，d，J= 2.0 Hz，H-6）。与文献［7］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为5，7，4′-三羟基异黄酮（5，7，4′-Trihydroxyisoflavone），即染料木素（Geristein）。

化合物9：淡黄色粉末，C7H6O4，mp：199～200℃。ESI-MS m/z 153［M-H］-；1H-NMR（CD3COCD3，400 MHz）δ：12.29（1H，s，1-COOH），9.65（1H，s，3-OH），9.26（1H，s，4-OH），7.32（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），7.28（1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6），6.78（1H，d，J=8.5 Hz，H-5）。与文献［8］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为原儿茶酸（Protocatechuic acid）。

化合物10：黄色颗粒状结晶，C22H22O12，mp：251～253℃，ESI-MS m/z 521［M-H］-；1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：7.75（1H，d，J=2.4 Hz，H-6′），7.69（1H，d，H-2′），6.92（1H，d，J= 8.2 Hz，H-5′），6.88（1H，d，J=2.4 Hz，H-8），6.47（1H，d，J=2.4 Hz，H-6），5.03（1H，d，J=7.3 Hz，H-1″），3.84（3H，s，3′-OCH3）。与文献［9］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为异鼠李素-7-O-β-D-葡萄糖苷（Isorhamnetin-7-O-β-D-glucoside）。

化合物11：白色粉末，C35H60O6，mp：288～290℃。Liebermann-Burchard和Molish反应呈阳性。ESI-MS m/z 575［M-H］-；1H-NMR（DMSO，400 MHz）δ：5.32（1H，H-6），4.25（1H，d，J=7.7 Hz，H-1′），3.40（1H，m，H-3），0.95（3H，s，H-19），0.72～0.93（12H，m，H-21，26，27，29），0.68（3H，s，H-18）。与文献［10］对照，其波谱数据基本一致，薄层色谱与胡萝卜苷对照品比移值及颜色一致，与胡萝卜苷对照品混合熔点不下降，可确定该化合物为胡萝卜苷（Daucosterol）。

化合物12：白色粉末，C14H28O2，mp：54～55℃。ESI-MS m/z 227［M-H］-；1H-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：0.88（3H，t，J= 7.0 Hz，14-CH3），1.63（2H，m，β-CH2），2.34（2H，t，J=7.5 Hz，α-CH2）。与文献［10］对照，其波谱数据基本一致，可确定该化合物为十四酸（Tetradecanoic acid）。

3 讨论

2015年版《中国药典》（一部）上规定川射干全年均可采挖，而实际上药农一般均在9～11月份采挖，取其根茎，保留侧芽以留作种苗。此时的川射干叶还未倒苗枯萎，采摘叶也不会影响根茎的生长，这就为综合利用川射干这一药材资源提供了便利。

本研究从川射干叶中分离得到12个化合物，其中化合物1、2、3均为首次从该属植物中分离得到。笔者所在课题组对川射干进行了近20年的研究，有大量的研究基础，在化合物4～12的结构鉴定时，根据以前的波谱研究结果，只对1H谱进行了印证，省略了13C谱。以上的研究工作为川射干叶质量评价奠定了一定基础。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部［S］.2015年版.北京：中国医药科技出版社，2015：41-42.

［2］王笳，袁崇均，游宇光.HPLC法测定川射干中鸢尾黄酮苷的含量［J］.中国药房，2008，19（6）：440.

［3］Liu YL，Mabry TJ.Flavonoids from Artemisia frigida［J］. Phytochemistry，1981，20（6）：1 389.

［4］刘金旗，沈其权，刘劲松.贡菊化学成分的研究［J］.中国中药杂志，2001，26（8）：547.

［5］ Talukdar AC，Jain N，Krishnamurty HG，et al.Anisoflavone from Myristica malabarica［J］.Phytochemistry，2000，53（1）：155.

［6］袁崇均，王笳，陈帅.川射干化学成分研究［J］.天然产物研究与开发，2008，20（3）：444.

［7］吉文亮，秦民坚，王峥涛.射干的化学成分研究（Ⅰ）［J］.中国药科大学学报，2001，32（3）：197.

［8］马雨涵，林彬彬，刘慧.鸢尾叶的化学成分［J］.植物资源与环境学报，2011，20（4）：88.

［9］贾忠建，朱广军，王继和.唐古特白刺黄酮类化合物的研究［J］.植物学报，1989，31（3）：241.

［10］张正付，边宝林，杨健.茉莉根化学成分的研究［J］.中国中药杂志，2004，29（3）：237.

Study on the Chemical Compositions of the Leaves of Iris tectorum

LUO Sen，YUAN Congjun，CHEN Shuai，CHEN Chu，WU Yan，WANG Jia（Sichuan Academy of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 610041，China）

OBJECTIVE：To study the chemical compositions of the leaves of Iris tectorum.METHODS：Using 70%ethanol for extracting，silica gel column chromatography，Sephadex LH-20 chromatography and thin-layer chromatography were used to isolate and purify the chemical compositions of the leaves of I.tectorum，the compound structures were analyzed and identified according to the physicochemical properties and spectral data.RESULTS：12 compounds were isolated from the leaves of I.tectorum，namely 5，7，4′-trihydroxy-6-methoxy isoflavone（1），tiliamin-7-O-β-D-glucopyranoside（2），5-hydroxy-4′，7-dimethoxy-isoflavone（3），tectoridin（4），tectorigenin（5），iridin（6），dimethyl tectorigenin（7），genistein（8），protocatechuic acid（9），isorhamnetin-7-O-β-D-glucoside（10），daucosterol（11），tetradecanoic acid（12）.CONCLUSIONS：Compounds 1，2，3 are isolated from the plants of the genus for the first time，and the study has laid the foundation for the quality evaluation of I.tectorum.

Leaves of Iris tectorum；Chemical composition；Structure identification

R917

A

1001-0408（2016）30-4267-03

2016-01-18

2016-03-08）

（编辑：张 静）

四川省公益性科研院所基本科研项目（No.A-2014N-3）

＊助理研究员。研究方向：中药学。电话：028-85237395。E-mall：mnmls@163.com

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.30.29