白英正丁醇萃取部位的化学成分研究Δ

李瑞玲，孙俊馥，杨 森，王林江，徐 顺#（1.黄淮学院化学化工系，河南驻马店 463000；.郑州大学化学与分子工程学院，郑州 450001）

·药物分析与检定·

白英正丁醇萃取部位的化学成分研究Δ

李瑞玲1，2＊，孙俊馥2，杨 森2，王林江2，徐 顺2#（1.黄淮学院化学化工系，河南驻马店 463000；2.郑州大学化学与分子工程学院，郑州 450001）

目的：研究白英正丁醇萃取部位的化学成分。方法：采用葡聚糖LH-20柱层析、硅胶柱层析、薄层色谱对白英正丁醇萃取部位的化学成分进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果：从白英正丁醇萃取部位分离得到10个化合物，分别为芹菜素-7-O-β-D-芹糖（1→2）-β-D-葡萄糖（1）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖（2）、腺苷（3）、E-苯丙烯醇-3-甲氧基-5-［（8′S）-3′-甲氧基-4′-羟基-苯丙醇］-4-O-β-D-葡萄糖苷（4）、N-（4-氨基正丁基）-3-（3-羟基-4-甲氧基-苯基）-E-丙烯酰胺（5）、N-（4-氨基正丁基）-3-（3-羟基-4-甲氧基-苯基）-Z-丙烯酰胺（6）、白藜芦醇（7）、柚皮素（8）、槲皮素（9）、薯蓣皂苷元（10）。结论：化合物1～8均为首次从白英中分离得到，该研究为白英质量评价奠定了一定基础。

白英；黄酮类化合物；结构鉴定

白英Solanum lyratum Thunb.为茄科植物，俗称白毛藤、毛骨风等，始载于《本经》，在我国分布较广，江苏、江西、广东和四川等地均有分布。其全草具有清热解毒、抗癌等作用，可用于治疗肿瘤、癌症等疾病［1-2］。为了进一步了解白英所含的化学成分，以期为探讨其药理作用提供物质基础，笔者对白英的化学成分进行了系统的分离鉴定。

1 材料

1.1 仪器

DPX-400型超导核磁共振谱仪（德国Bruker公司）；PE-1710型红外光谱仪（德国PE公司）；Q-TOF Micro型质谱仪（美国Waters公司）；XT4A型显微镜熔点测定仪（北京市科仪电光仪器厂）。

1.2 试剂

葡聚糖LH-20凝胶（上海医药工业研究院）；薄层色谱硅胶（青岛海洋化工厂）；柱层析硅胶（上海五四化学材料有限公司）；其余试剂均为分析纯，水为纯化水。

1.3 药材

白英药材采自浙江宁波，采集时间为2009年，经河南中医学院李志安副教授鉴定为真品，标本存放于郑州大学化学与分子工程学院。

2 方法与结果

2.1 提取与分离

取白英全草7.5 kg，粉碎，乙醇浸泡，水浴加热，浸泡2 d，得浸提液，将残渣在上述条件下重复操作2次，将3次浸提液浓缩成浸膏。将上述浸膏加入适量水使其为悬浮液，然后以氯仿萃取，除去浸提液中的色素和部分脂溶性物质，然后将水相依次以乙酸乙酯和正丁醇萃取。将所得的白英正丁醇萃取部位浓缩为浸膏，以葡聚糖LH-20凝胶为填料，甲醇为洗脱剂，根据薄层色谱检测合并得到A、B、C、D、E 5个组分，均浓缩为浸膏状。再用硅胶柱层析、薄层色谱等分离纯化方法，得到组分A～E浸膏。

取组分E浸膏20 g，经过硅胶柱（100～200目），依次用氯仿-乙醇（6∶1，4∶1，2∶1，1∶1，V/V）梯度洗脱和甲醇洗脱，每50 ml为一份。根据薄层色谱检测合并得到E1、E2、E3、E4，经薄层色谱纯化［展开剂为氯仿-甲醇-水（6∶4∶0.5，V/V/V）］，得到化合物1、2、3。

取组分D浸膏20 g，经过硅胶柱（100～200目），依次用氯仿-甲醇（20∶1，10∶1，8∶1，6∶1，5∶1，3∶1，2∶1，1∶1，0∶1，V/V）梯度洗脱，每50 ml为一份。根据薄层色谱检测合并成分相同流分，经薄层色谱纯化［展开剂为氯仿-甲醇-水（6∶4∶0.5，V/V/V）］，得到化合物7、8、9、10。

取组分C浸膏20 g，经过硅胶柱（100～200目），依次用氯仿-甲醇（5∶1，4∶1，3∶1，2∶1，1∶1，0∶1，V/V）梯度洗脱，每50 ml为一份。根据薄层色谱检测合并成分相同的流分，经薄层色谱纯化［展开剂为氯仿-甲醇-水（7∶3∶0.5，V/V/V）］，分别得到化合物4、5、6。

2.2 结构鉴定

化合物1：分子式C26H28O14，黄色无定形粉末，mp：213～215℃。IR图谱中，3 420 cm－1为羟基吸收峰，1 658 cm－1为羰基吸收峰，1 178、1 604、1 445和1 075 cm－1为苯环骨架的振动吸收，并且在834 cm－1处也有吸收，提示该化合物有一个取代的苯环。ESI-MS m/z 587［M+Na］+；1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）中给出一个受分子内氢键影响的酚羟基特征信号δH12.97（1H，s），即芹菜素A环5位上的羟基，同时可以看到2个端级质子的信号：δH5.15（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″）和δH5.35（1H，brs，H-1″′），结合碳谱，可推测有2个糖环存在；一对特征双峰δH6.43（1H，d，J=2.0 Hz）和δH6.81（1H，d，J=2.0 Hz）分别归属为H-6和H-8，可推测出该化合物为5、7二羟基黄酮；还有另外一对特征双峰δH7.95（2H，d，J=8.8 Hz）和δH6.94（2H，d，J=8.8 Hz），根据其位移和耦合常数可判断，这4个H为苯环上的AA′BB′系统上的4个H，即该化合物的苯环为二取代，分别为B环上的H-2′，6′和H-3′，5′。从13C-NMR（DMSO-d6，400 MHz）谱图中可以看到，该化合物有26个C，包括3个仲C，14个叔C和9个季C；在这26个C中，δ98.3（C-1）、δ76.2（C-2）、δ77.2（C-3）、δ69.9（C-4）、δ76.9（C-5）和δ60.7（C-6）分别为葡萄糖糖环上的6个C；δ108.9（C-1）、δ75.9（C-2）、δ79.5（C-3）、δ74.2（C-4）和δ64.4（C-5）分别为芹糖糖环上的5个C；其余15个C的信号δ：164.4（C-2），103.3（C-3），182.2（C-4），161.3（C-5），99.5（C-5），162.9（C-6），95.0（C-7），157.1（C-8），105.5（C-9），121.2（C-1′），128.8（C-2′，6′），116.2（C-3′，5′），161.5（C-4′）的位移和芹菜素［2］上面C的位移基本一样。从上述波谱数据可以推测该化合物为芹菜素-7-O-β-D-芹糖（1→2）-β-D-葡萄糖［Apigenin-7-O-β-D-（1→2）-β-D-glucose］，且与文献［3］对照，其波谱数据完全一致。

化合物2：分子式C21H20O10，黄色无定形粉末，mp：178～180℃。ESI-MS m/z 455［M+Na］+和471［M+K］+；1H-NMR（CD3OD，400 MHz）：δH7.91（2H，d，J=8.7 Hz，H-2′，6′），δH6.95（2H，d，J=8.7 Hz，H-3′，5′），δH6.86（1H，s，H-3），δH6.73（1H，s，H-8），δH6.52（1H，s，H-6），δH5.10（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），δH3.68（IH，d，J=8.6 Hz，H-5″）。13C-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：164.8（C-2），103.6（C-3），182.2（C-4），161.5（C-5），99.5（C-6），162.9（C-7），95.0（C-8），157.1（C-9），105.5（C-10），122.1（C-1′），129.7（C-2′，6′），117.1（C-3′，5′），162.1（C-4′），101.2（C-1″），73.7（C-2″），77.8（C-3″），71.3（C-4″），78.3（C-5″），62.4（C-6″）。与文献［4］对照，其波谱数据完全一致，可确定该化合物为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖（Apigenin-7-O-β-D-glycose）。

化合物3：分子式C10H13N5O4，白色粉末，mp：232～234℃。ESI-MS m/z 268［M+H］+；1H-NMR（CD3OD，400 MHz），其中：δH8.31（1H，s，H-8）和δH8.17（1H，s，H-2）推测为芳环上的2个H，5.96（1H，d，J=6.4 Hz，H-1′）推测为糖的端基H信号，δH7.32（2H，brs，-NH2）推测为氨基H信号；其余信号为δH5.43（1H，d，J=6.0 Hz，OH-2′），δH5.40（1H，dd，J=6.0，4.5 Hz，OH-5′），δH5.10（1H，t，J=4.0 Hz，OH-3′），δH4.71（1H，q，J=6.0 Hz，H-2′），δH4.16（1H，m，H-3′），δH4.16（1H，m，H-3′），δH4.00（1H，m，H-4′），δH3.73（1H，m，H-5′a），δH3.57（1H，m，H-5′b）。13C-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：156.5（C-6），152.4（C-2），148.8（C-4），140.8（C-8），122.3（C-5），90.1（C-1′），87.1（C-4′），74.37（C-3′），71.5（C-2′），61.8（C-5′）。与文献［5］对照，其波谱数据完全一致，可确定该化合物为腺苷（Adenosine）。

化合物4：分子式C26H34O11，黄色粉末，mp：117℃。ESI-MS m/z545［M+Na］+；1H-NMR（CD3OD，400 MHz）：δH6.93（1H，d，J=1.5 Hz，H-2），δH6.91（1H，d，J=1.5 Hz，H-6），δH6.57（1H，d，J=8.0 Hz，H-6′），δH6.56（1H，d，J=8.0 Hz，H-5′），δH6.54（1H，s，H-2′），δH6.47（1H，dd，J=8.0 Hz，1.7 Hz，H-6′），δH6.30（1H，m，H-8），δH4.66（1H，d，J=7.2 Hz，H-1″），δH4.67（2H，d，J=5.2 Hz，H-9），δH3.82（3H，s，H-10），δH3.68（1H，s，H-10′）。根据13C-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：135.4（C-1），109.0（C-2），153.4（C-3），144.9（C-4），138.9（C-5），119.1（C-6），131.5（C-7），129.7（C-8），63.7（C-9），56.2（C-10），133.2（C-1′），113.7（C-2′），148.4（C-3′），145.3（C-4′），115.6（C-5′），122.6（C-6′），39.1（C-7′），42.8（C-8′），66.8（C-9′），56.3（C-10′），105.3（C-1″），75.9（C-2″），77.8（C-2″），71.5（C-2″），78.5（C-2″），62.4（C-2″），可知在位移100到160之间有15个C，除了1个糖环上的端级C之外，有12个为苯环上的C，即2个苯环，有2个C为双键。这样加上1个糖环，正好达到该分子的不饱和度。另外，从dept-135（13C谱的一种）可推测出该分子有2个伯C、4个仲C、13个叔C、7个季C。根据上述波谱数据可判断该化合物为E-苯丙烯醇-3-甲氧基-5-［（8′S）-3′-甲氧基-4′-羟基-苯丙醇］-4-O-β-D-葡萄糖苷｛3-methoxy-4-hydroxy-5-［（8′S）-3′-methoxy-4′-hydroxyl-phenyl-alcohol］-E-cinnamic-phenylpropyl alcohol-4-O-β-D-glucoside｝，且与文献［6］对照，其光谱数据完全一致。

化合物5：分子式C14H20N2O3，黄色块状，mp：126～128℃。ESI-MS m/z 265［M+H］+；1H-NMR（CD3OD，400 MHz）：δH7.03（1H，dd，J=8.1 Hz，1.7 Hz，H-2），δH6.79（1H，d，J=8.1 Hz，H-3），δH7.12（1H，d，J=1.7 Hz，H-6），δH7.44（1H，d，J=16.0 Hz，H-8），δH6.45（1H，d，J=16.0 Hz，H-9）。13C-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：126.8（C-1），121.9（C-2），115.1（C-3），148.5（C-4），147.9（C-5），110.1（C-6），55.0（C-7），140.8（C-8），117.2（C-9），167.8（C-10），39.0（C-11），24.6（C-12），26.1（C-13），38.2（C-14），根据其位移可知该化合物包含1个苯环和1个烯键（J=16.0 Hz，由此可判断该烯键为反式），还有1个羰基。根据上述波谱数据可判断该化合物为N-（4-氨基正丁基）-3-（3-羟基-4-甲氧基-苯基）-E-丙烯酰胺［N-（4-Amino-butyl）-3-（3-hydroxy-4-methoxy-phenyl）-E-acrylamide］，且H-HCOSY、HSQC、HMBC也与这一归属相一致。

化合物6：分子式C14H20N2O3，黄色块状，mp：126～128℃。ESI-MS m/z 265［M+H］+；结合1H-NMR（CD3OD，400 MHz）：δH6.96（1H，dd，J=8.2Hz，1.7 Hz，H-2），δH6.74（1H，d，J=8.2 Hz，H-3），δH7.12（1H，d，J=1.7 Hz，H-6），δH6.63（1H，d，J=12.4 Hz，H-8），δH5.83（1H，d，J=12.4 Hz，H-9）。13C-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：127.0（C-1），123.4（C-2），115.0（C-3），147.0（C-4），147.1（C-5），112.7（C-6），54.9（C-7），137.2（C-8），120.0（C-9），169.0（C-10），38.8（C-11），25.7（C-12），26.0（C-13），38.0（C-14），根据其位移可知该化合物包含1个苯环和1个烯键（J=12.4 Hz，由此可判断该烯键为顺式），还有1个羰基。根据上述波谱数据可判断该化合物为N-（4-氨基正丁基）-3-（3-羟基-4-甲氧基-苯基）-Z-丙烯酰胺［N-（4-Amino-butyl）-3-（3-hydroxy-4-methoxy-phenyl）-Z-acrylamide］，且H-HCOSY、HSQC和HMBC也与这一归属相一致。

化合物7：分子式C14H12O3，无色针状，mp：261～263℃。ESI-MS m/z 227［M-H］-；1HNMR（CD3OD，400 MHz）：δH7.02（1H，d，J=16 Hz，H-a）和δH6.85（1H，d，J=17.6 Hz，H-b）为反式烯烃上的2个氢；δH7.39（2H，dd，J=9.2 Hz，2.4 Hz，H-2′，H-6′），δH6.79（2H，dd，J=8.8 Hz，2 Hz，H-3′，H-5′），δH6.48（2H，d，J=2.0 Hz，H-2，H-6），δH6.20（1H，t，J=2.0 Hz，H-4）。13CNMR（CD3OD，400 MHz）δ：141.3（C-1），105.7（C-2），159.6（C-3），102.6（C-4），159.6（C-5），105.7（C-6），130.4（C-1′），128.8（C-2′，6′），116.5（C-3′，5′），158.4（C-4′），129.4（C-a），127.0（C-b）。与文献［7］对照，其波谱数据完全一致，可确定该化合物为白藜芦醇（Resveratrol）。

化合物8：分子式C15H12O5，无色针状，mp：242～245℃。ESI-MS m/z 295［M+Na］+；IR图谱中1 629 cm－1为C=O的伸缩振动吸收。1H-NMR（CD3COCD3，400 MHz）显示有3个羟基：δH12.6（5-OH）、δH9.6（7-OH）、δH8.6（4′-OH）和典型的AA′BB′型的信号；δH7.40（2H，d，J=9.2 Hz、H-2′、6′），δH6.89（2H，d，J=9.2 Hz，H-3′，5′），δH5.95（1H，brs，H-8），δH5.93（1H，brs，H-6），δH5.45（1H，dd，J=12.8 Hz，2.9 Hz，H-2），δH3.16（1H，dd，J=17.1 Hz，12.8 Hz，H-3a），δH2.69（1H，dd，J=17.1 Hz，2.9 Hz，H-3b）。与文献［8］对照，其波谱数据完全一致，可确定该化合物为柚皮素（Naringenin）。

化合物9：分子式C15H10O7，黄色粉末，mp：＞300℃。ESIMS m/z 303［M+H］+；H-NMR（CD3OD，400 MHz）：δH7.77（1H，d，J=2.0 Hz，H-2′），δH7.67（1H，dd，J=8.4，2.0 Hz，H-6′），δH6.92（1H，d，J=8.8 Hz，H-5′），δH6.42（1H，d，J=2.0 Hz，H-8），δH6.22（1H，d，J=2.4 Hz，H-6），δH12.33（1H，5-OH），δH10.84（1H，brs，7-OH），δH9.63（1H，brs，3-OH），δH9.38（2H，brs，3′，4′-OH）。13C-NMR（CD3OD，400 MHz）δ：147.9（C-2），137.2（C-3），177.3（C-4），158.2（C-5），99.2（C-6），165.5（C-7），94.4（C-8），162.5（C-9），104.5（C-10），124.1（C-1′），116.0（C-2′），146.2（C-3′），148.7（C-4′），116.2（C-5′），121.6（C-6′）。与文献［9］对照，其波谱数据完全一致，可确定该化合物为槲皮素（Quercetin）。

化合物10：分子式C27H42O3，无色针状，mp：200～202℃。IR图谱中3 414 cm－1提示有羟基存在，1 066 cm－1为C-C的伸缩振动。1H-NMR（CDCl3，400 MHz）：δH5.35（1H，d，J=5.2 Hz，H-6），δH4.40（1H，H-16），δH3.49（1H，H-3，H-26e），δH3.37（1H，H-26a）；δH1.02（3H，s），δH0.98（3H，d，J=6.8 Hz），δH0.80（3H，d，J=6.4 Hz），δH0.79（3H，s）分别为19、21、27、18位4个甲基的化学位移。13C-NMR（CDCl3，400 MHz）δ：37.2（C-1），31.3（C-2），71.6（C-3），42.2（C-4），140.7（C-5），121.4（C-6），32.0（C-7），31.5（C-8），50.0（C-9），36.6（C-10），20.8（C-11），39.7（C-12），40.2（C-13），56.4（C-14），31.4（C-15），80.8（C-16），62.0（C-17），16.2（C-18），19.4（C-19），41.5（C-20），14.5（C-21），109.3（C-22），31.4（C-23），28.7（C-24），30.2（C-25），66.8（C-26），17.1（C-27）。与文献［10］对照，其波谱数据完全一致，可确定该化合物为薯蓣皂苷元（Dioscin）。

3 讨论

本课题组分离得到10个化合物，其结构分别鉴定为芹菜素-7-O-β-D-芹糖（1→2）-β-D-葡萄糖（1）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖（2）、腺苷（3）、E-苯丙烯醇-3-甲氧基-5-［（8′S）-3′-甲氧基-4′-羟基-苯丙醇］-4-O-β-D-葡萄糖苷（4）、N-（4-氨基正丁基）-3-（3-羟基-4-甲氧基-苯基）-E-丙烯酰胺（5）、N-（4-氨基正丁基）-3-（3-羟基-4-甲氧基-苯基）-Z-丙烯酰胺（6）、白藜芦醇（7）、柚皮素（8）、槲皮素（9）、薯蓣皂苷元（10）。其中有4个为黄酮类化合物，化合物1～8为首次从该植物中分离得到。该研究为白英的质量评价奠定了一定基础。

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Study on the Chemical Compositions of N-butanol Extract from Solanum lyratum

LI Ruiling1，2，SUN Junfu2，YANG Sen2，WANG Linjiang2，XU Shun（21.Dept.of Chemistry and Chemical Engineering，Huanghuai University，Henan Zhumadian 463000，China；2.College of Chemistry and Molecular Engineering，Zhengzhou University，Zhengzhou 450001，China）

OBJECTIVE：To study the chemical compositions of n-butabol extract from Solanum lyratum.METHODS：Glucan LH-20 column chromatography，silica gel column chromatography and TLC were adopted to separate and purity the chemical compositions，physicochemical property and spectral evidence to identify their structures.RESULTS：Totally 10 chemical compositions were separated from n-butabol extract，namely apigenin-7-O-β-D-apiofuanosyl（1→2）-β-D-glucose（1），apigenin-7-O-β-D-glucose（2），adenosine（3），3-methoxy-4-hydroxy-5-［（8′S）-3′-methoxy-4′-hydroxyl-phenyl-alcohol］-E-cinnamic-phenylpropyl alcohol-4-O-β-D-glucoside（4），N-（4-amino-butyl）-3-（3-hydroxy-4-methoxy-phenyl）-E-acrylamide（5），N-（4-amino-butyl）-3-（3-hydroxy-4-methoxy-phenyl）-Z-acrylamide（6），resveratrol（7），naringenin（8），quercetin（9）and dioscin（10）.CONCLUSIONS：Compound 1-8 are first separated from S.lyratum，the study can lay a foundation for quality evaluation of S.Lyratum.

Solanum lyratum；Flavonoid glycoside；Structural identification

R284.1

A

1001-0408（2016）30-4252-03

2015-10-30

2015-11-29）

（编辑：张 静）

国家自然科学基金资助项目（No.J1210060）

＊讲师。研究方向：分析化学及天然产物分析。E-mail：liruiling123@aliyun.com

#通信作者：教授，博士。研究方向：天然药物化学和药物分子设计。E-mail：shxuzz@zzu.edu.cn

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.30.24