猪伪狂犬病的诊断与净化方法

刘 鸽 张培生 于会举 张 倩 杨慧敏 屈勇刚*(石河子大学动物科技学院，新疆石河子 832003）

猪伪狂犬病的诊断与净化方法

刘 鸽 张培生 于会举 张 倩 杨慧敏 屈勇刚*
(石河子大学动物科技学院，新疆石河子 832003）

猪伪狂犬病具有急性、热性和高度接触性的特点，且可引起多种动物共患，猪是自然界中PRV的唯一宿主。该病对养猪业危害极大，严重制约养猪业的发展。西方发达国家，主要用基因缺失标记苗配合对应的血清学鉴别方法对猪场内PRV进行根除。本文从猪伪狂犬病的诊断方法和净化方法着手，对PR进行阐述，希望本文能给养猪业提供一定的参考与帮助。

PRV；诊断；症状；净化方法

伪狂犬病毒（Pseudorabies virus, PRV）是引起伪狂犬病（Pseudorabies, PR）的病原。PR具有急性、热性和高度接触性的特点，且可引起多种动物共患，猪是自然界中PRV的唯一宿主[1,2]。PRV可引起母猪流产，仔猪神经症状、高死亡率，育肥猪发热、呼吸道症状、神经症状、采食量下降，还可引起公猪睾丸炎[3]，并且可使感染猪产生免疫抑制，给猪群造成多种传染病的原发和继发感染。PR的流行具有全球性，将其根除的难度非常大，给养猪事业造成巨大的经济损失[4]，仅次于口蹄疫和猪瘟[5]。国际兽医局〈OIE〉将PR列为B类动物传染病，我国将之列为二类动物传染病[6,7]。20 世纪90 年代，根除PR的计划已经在西方发达国家启动，并取得了较好的效果，其中猪伪狂犬病病毒gE蛋白抗体ELISA（酶联免疫吸附试验）的检测方法、基因缺失苗和经人工筛选的自然弱毒苗的应用发挥了十分明显的作用[8,9]。

我国已将PR列为《国家中长期动物疫病防治规划》（2012-2020年）重点优先防治的动物疫病，预计目标为：在2020年之前将全国种猪场达到净化PR的标准。近年，一些现代规模猪场已经出现PRV阴性的情况，PRV的净化取到积极效果[10,11]。西方发达国家，主要用基因缺失标记苗配合对应的血清学鉴别方法对猪场内PRV进行根除[12]。开启PRV根除计划的国家多采用gG、gE和gC三种糖蛋白鉴别诊断方法，其中的gE-ELISA鉴别方法是最常用方法。本文从猪伪狂犬病的诊断方法和净化方法着手，对PR进行阐述，希望本文能给养猪业提供一定的参考与帮助。

1　猪伪狂犬病的诊断

1.1临床诊断方法

1.1.1流行病学方面

感染PRV发病的猪、隐性感染者、感染PRV的其他动物都是PR的传染源。PR没有明显季节性的特点，四季均可发生，但低温季节更易发。PRV可感染包括猪、牛、绵羊、狗、鼠在内的35 种常见动物。感染PRV后的动物会伴有发热、奇痒（猪除外）和脊髓炎。各阶段的猪都易感，仔猪高发，有同窝继发感染的现象，且感染仔猪有极高死亡率。母猪感染PRV后，易流产、早产、产木乃伊胎或死胎。有接触传染的途径方式，PRV存在于猪的分泌物中（如唾液、尿液、乳汁、鼻液等），健康猪接触了感染PRV猪的分泌物污染的环境，就会易感。PRV可水平传播，通过呼吸道、破损的皮肤、消化道、黏膜等途径造成感染；也可经过公猪的精液和母猪的血液进行垂直传播。

1.1.2临床症状

一般情况下，潜伏期为3～6 天。

新生仔猪发病较突然，体质较弱，体温可高达41℃～42℃，伴有拉稀、呕吐、流涎、精神沉郁，身体发抖，共济失调，加速呼吸。有的还伴有转圈、肢体痉挛、抽搐、角弓反张等神经症状。发病仔猪昏倒后，衰竭死亡，病程1～2 天，死亡率100%。初生仔猪极高的死亡率严重影响了规模猪场的健康快速发展，应引起养殖企业的高度重视。

断奶前后的仔猪有咳嗽、流鼻涕、呼吸障碍等症状，发病率较新生仔猪有下降趋势，但也应高度重视。

经产母猪比初产母猪更易感，感染PRV后易出现流产、早产、产木乃伊胎或死胎（居多)、受胎率下降、返情率升高的现象，也会伴有厌食、精神沉郁、呼吸症状和产前7天左右发热。感染PRV后的母猪多可自愈。公猪易出现睾丸炎，表现出睾丸“一侧大、一侧小”（这一特点与布病类似，应进一步进行更为准确的鉴别诊断）或两侧都肿胀的现象，明显降低了种公猪的种用价值。

1.1.3病例解剖特点

流产胎儿、死胎、新生弱仔和发病猪的共同特点是肺、脑水肿，脑膜表面充血、水肿、有轻度炎症，脑颅腔、脊髓腔内积液，肠系膜淋巴结有不同程度的水肿。肾脏有不同程度的土黄色，表面有较小出血点。感染的新生仔猪的扁桃体坏死、出血，肝脏有白色的坏死灶。断奶仔猪有的发生脑膜出血，肺轻度水肿，肠系膜淋巴结发生轻度水肿，是平常的4 倍左右大小。感染PRV的猪有明显呼吸道炎症，喉头会发生点状出血，脾脏水肿变大、背面边缘有类似锯齿状的血梗坏死灶，心内膜伴有点状出血，眼睑发生明显水肿、潮红、眼球突出的现象，膀胱的黏膜发生充血或点状出血，小肠和胃有炎症发生。

1.1.4鉴别诊断方法

相似的呼吸道症状可见于猪肺疫、猪链球菌病、传染性胸膜肺炎，且应与猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病等进行区分；相似度较大的神经症状，要特别注意与猪瘟、仔猪水肿病、链球菌性脑膜炎等区分开来；流产、木乃伊胎、产死胎症状，应与猪细小病毒病、蓝耳病、布病、乙型脑炎等进行区分。现在猪病有混合感染的特点，平时应多观察、多总结，及时采取更为有效的鉴别方法。

1.2实验室诊断

实验室常用于PR诊断的方法有病毒分离鉴定、血清学试验、分子生物学方法和动物接种实验等[13]。动物接种实验常为兔体接种实验，而酶联免疫吸附试验（ELISA）、乳胶凝集试验（LAT）是多数猪场常选用的方式。PCR检测方法快速、准确、特异性强，也被广泛应用。实验室诊断，一般需要精密仪器或试剂，但有准确的特点，是传染病研究中不可缺少的重要环节。

2　猪伪狂犬病的净化措施

PRV是高度潜伏感染的病毒，在应激环境下易在猪群中暴发。猪伪狂犬病是危害养猪业最为严重的猪病之一，使养猪业遭受很大的经济损失。因此，根除、净化猪伪狂犬病是一项非常有意义的工作，但也有一定的难度，需要国家层面和养殖单位共同努力，才能将猪伪狂犬病控制好，甚至接近或达到根除净化的目标。

2.1建立健全行之有效的生物安全体系

生物安全体系对猪场疾病的防控意义重大。

外出和外来人员、车辆做好严格消毒后才可进去本场，禁止将非本猪场的猪肉带入，禁止在猪场饲养其他动物。严格管理好出猪台，分脏区和净区操作。对猪场人、畜饮用水都要严格定期消毒，每年对水质至少检测4 次，主要检测细菌数。坚持自繁自养和全进全出的原则。自繁自养对控制猪伪狂犬病的效果十分明显，也是预防多种动物传染病的最为有效的措施之一。严禁从疫区引用新猪或精液，必须来自阴性猪场，且及时有效的进行检疫和适当时间的隔离，并严格做好消毒工作，在引进前、后两周分别做好血清学检查，确定无PRV 后才可在猪场使用。及时有效的控制猪场内诸如老鼠、蚊子、苍蝇等有害生物，且应采取有效措施禁止鸟类进入猪场。制定科学严格的消毒程序，并严格执行。及时有效处理病死猪，采用无害化处理的方法，如深埋。

2.2净化原则和方法

用基因缺失苗对猪群进行免疫，定期检测gE抗体，及时发现被野毒感染的猪，并将其淘汰。逐渐用无PRV感染的猪群进行扩群。控制和净化猪伪狂犬病可用以下“三段法”。

准备阶段：先对待净化的猪群进行抗体检测和鉴别诊断，彻底了解该猪群的免疫情况和疾病流行特点。采用猪伪狂犬gE基因缺失苗进行全免。

控制阶段：至少每半年对猪群进行抽样检查，确定并淘汰感染PRV的猪。

强化措施：对检出的阴性健康猪群再次进行抽样检查，淘汰不合格的猪。及时淘汰阳性个体。

也可采取以下“四法净化措施”。

“淘汰扩群法”：在温暖季节（PR发病率较低）或猪价较低的阶段，对猪场的设备、猪舍、道路进行彻底消毒，空一段时间后再进行二次消毒。最后再引进无PRV感染的猪群。该方法简便，成功率高，但付出的成本很高。

“隔离后代法”：对早期断奶的仔猪进行血清学检测，将无PRV感染的仔猪隔离到确定无PRV的清洁区进行饲养。此种方法，对净化多种疾病都是比较有效的。使用此法的前提是，产仔母猪没有感染PRV，所以应及时对母猪进行检测。

“检测淘汰法”：多次对猪场的所有猪进行PRV野毒抗体检测，及时淘汰阳性个体，再引用PRV野毒阴性的种猪进行扩群。该种方法简便，但不适合于PRV野毒阳性率高的猪场，检测费用较高。

“管理检测法”：加强饲养管理，改善环境卫生，减少饲养过程中的应激（如可根据各猪场的具体情况降低饲养密度），科学合理地应用生物安全措施，及时开展基因缺失弱毒苗的接种工作。还可根据猪场具体情况，采用改良模式，对留用的后备猪注射1头份伪狂静。对引种的猪在3周后进行加强免疫。此种方法简单、成本低，更适合中国的实际情况，且效果较好。

2.3种猪和种猪场根除PRV的措施

（1）对没有进行免疫接种猪场的猪群进行血清学检查，及时发现PRV抗体阳性的个体，并与阴性个体分群饲养。然后使用基因缺失苗对各猪群进行免疫接种，间隔5周后，再免疫一次。以后，阴性个体半年免疫一次，阳性个体每4个月免疫一次，每半年进行一次血清学鉴别检查。逐渐减少PRV野毒感染的猪群，最后彻底根除PR。

（2）对已经免疫过的猪场，强调要使用基因缺失苗。每4个月免疫一次，每半年进行一次血清学检测，一步步地淘汰PRV野毒感染的猪群。

（3）经免疫的种猪产下的欲留作种用的仔猪，在100 天时做一次血清学检测，抗体阴性个体留作种用。

（4）对正在暴发PR的猪场来说，应对种猪进行两次间隔4～6个月的基础免疫外，配种前、产前1个月各应使用单基因缺失苗进行加强免疫一次。其中，对仔猪使用基因缺失苗进行免疫的效果显著。

（5）对新引入的种猪必须进行科学合理的检疫，且应引进PRV抗体阴性的个体。进入本场前，应进行2 个月左右的隔离，最后经检查安全后，方可合群。

（6）应对猪场进行严格的消毒，如使用2%左右的氢氧化钠溶液对猪场进行消毒。消毒时间，最好选择天气较好、日照较好的时候进行。

3　小结

猪伪狂犬病是制约养猪业发展的一个重要因素，及时对猪群进行免疫并采取及时有效的综合防治措施是预防该病的重要手段。对检出的PRV野毒感染的猪群进行隔离、淘汰，可起到净化PR的作用。猪伪狂犬病的净化需要国家和各养殖企业共同努力，才能起到较好效果，获得令人可喜的成绩。

[1] 白文彬, 于康震. 动物传染病诊断学[M]. 北京: 中国农业出版社, 2002:70-95.

[2] B·E·斯特劳, S·D·阿莱尔, W·L·蒙加林, 等. 猪病学[M]. 第8版. 北京: 中国农业大学出版社, 2000:239-253.

[3] 殷震, 刘景华. 动物病毒学[M]. 第2版. 北京: 科学出版社, 1997:329-340. 998-1002.

[4] 陈溥言. 兽医传染病学[M]. 第5版. 中国农业出版社,1980:218-220.

[5] 彭志领, 时庆华. 猪伪狂犬病的诊断及防治研究进展[J].中国动物检疫, 1997, 14(5):34-35.

[6] 于大海, 崔砚林. 中国进出境动物检疫规范[M]. 北京: 中国农业出版社, 1997:103-115.

[7] 世界动物卫生组织. 陆生动物诊断实验和疫苗手册[M]. 第5版. 北京: 中国农业出版社, 2004:45-50.

[8] Van N A. Mathematical modelling of pseudorabies virus (syn. Aujeszky's disease virus) outbreaks aids eradication programmes: a review.[J]. Veterinary Quarterly, 2001, 23(1):21-26.

[9] Pensaert M, Labarque G, Favoreel H, et al. Aujeszky's disease vaccination and differentiation of vaccinated from infected pigs.[J]. Dev Biol(Basel), 2004, 119:243-254.

[10] 周绪斌, 雷健良. 2008年中国11省市规模化猪场伪狂犬病野毒血清流行病学系统监测与分析[J]． 养猪, 2009 （4）: 57-62．

[11] Wang K, Yang H, Zhang L, et al. Studies of pseudorabies seroprevalence in China swine farms[C] ．Wuhan:3rd APVS Congress,2007:143-144．

[12] Oirschot J T V, Gielkens A L J, Moormann R J M, et al. Marker vaccines, virus protein-specific antibody assays and the control of Aujeszky's disease[J]. Veterinary Microbiology, 1990, 23(1-4):85-101.

[13] Linné T. Diagnosis of pseudorabies virus infection in pigs with specific DNA probes.[J]. Research in Veterinary Science, 1987, 43(2):150-156.

S858.28

A

1673-4645（2016）08-0024-04

2016-06-21

刘鸽（1986-），男，山东淄博人，硕士研究生，主要从事动物传染病诊断与防治工作，E-mail:1539881644@qq.com

屈勇刚（1971-），男，陕西渭南人，副教授，主要从事动物传染病诊断与防治工作，E-mail:quyonggang@shzu.edu.cn