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三碘氧化合物消毒剂杀菌测试

2016-01-27吴春滨山东省莱州市朱桥畜牧兽医站261400

中国畜禽种业 2016年3期
关键词:消毒剂杀菌芽孢

吴春滨 (山东省莱州市朱桥畜牧兽医站 261400)

三碘氧化合物消毒剂杀菌测试

吴春滨 (山东省莱州市朱桥畜牧兽医站 261400)

含三碘氧化合物的消毒剂,在有机物干扰下对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、枯草杆菌等杀灭率均可达99.90%以上,50%小牛血清对消毒杀菌能力无影响,可用于环境消毒和带鸡喷雾消毒。而常规碘伏类消毒剂则在有机物干扰下严重影响效果,不能用于环境消毒和喷雾消毒。为了筛选出合适养殖场使用的消毒剂,对不同结构的碘伏进行消毒学测试,表明三碘氧化合物消毒剂效果较好,属高效消毒剂。

三碘氧化合物;碘伏;杀菌效果;抗有机物;环境消毒;测试;实验

为了筛选出合适养殖场使用的消毒剂,特以不同结构的碘伏进行消毒学测试,以期通过正确筛选方法来为养殖场提供参考,现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 消毒剂

三碘氧化合物消毒剂:有效成份为三碘氧化合物,有效碘含量为3.04%。普通碘伏:有效成份为聚维酮碘,有效碘含量为3.02%。

1.1.2 实验菌

金黄色葡萄球菌 (ATCC 6538),白色念珠菌 (ATCC 10231),大肠杆菌 (8099),枯草杆菌黑色变种芽孢 (ATCC 9372),均用含1%蛋白胨的稀释液配成107cfu/m l的菌悬液备用,实验菌株为保存菌株。

1.2 方法

1.2.1 中和剂选择实验

实验菌选金黄色葡萄球菌和白色念珠菌,实验分8组。实验结果,以第6、7、8组不长菌,第3、4、5组组间菌数相差≤10%,第1组不长菌或细菌数远低于第2组,第2组菌数≥100cfu/ml,为所用中和剂及其浓度适宜。

1.2.2 悬液定量杀菌实验

用无菌蒸馏水将拜净稀释成不同浓度,取5ml于试管中,与0.1ml菌液混匀,作用至规定时间;取菌药混合液0.5m l加入含4.5ml中和剂的试管中,混匀;作用10min后,取0.5ml接种平皿;倾注营养琼脂并混匀,枯草杆菌黑色变种芽孢37℃培养72h,其余菌则培养48h,计数菌落数,根据消毒技术规范要求,杀灭率达99.9%则判为合格,实验重复3次。

1.2.3 抗有机物实验

用无菌蒸馏水将拜净稀释成有效碘2.5mg/L浓度,各取5m l于3只试管中,分别加入小牛血清含量为0%、25%和50%的金黄色葡萄球菌菌悬液0.1m l,混匀;按悬液定量杀菌实验方法进行杀菌实验,观察有机物对消毒能力的影响,实验重复3次。

1.2.4 现场实验

对照组用无菌水喷地面;实验组用含碘20mg/L的三碘氧化合物消毒剂喷地,5min后,用浸过中和剂的无菌棉签在地面涂擦两次采样,将样本放入原中和剂试管内作消毒前样本;用同样方法采得实验样本。10min后取0.5m l接种平皿,倾注营养琼脂,37℃培养48h,计数菌落数。按下式计算杀灭率:地面细菌菌落总数 (cfu/地面)=平皿上平均菌落数×检测时样本洗液稀释倍数。

1.2.5 养殖实验

选3组相同来源相同数量的肉鸡,分别为三碘氧化合物消毒剂A组、普通碘伏B组和空白对照C组。从第1日龄开始到70日龄结束,A组每天用三碘氧化合物消毒剂带鸡喷雾消毒一次,B组每天用普通碘伏消毒液带鸡消毒一次,均按1:600比例兑水稀释喷洒。记录各组死淘数,死淘重,用料量,用药情况,实验初重,小鸡重量,中鸡重量,大鸡重量,全程料肉比,上市率,经济效益分析。

1.3 数据统计分析

实验结果数据采用平均数,应用SPSS软件进行差异显著分析。

2 实验结果

2.1 中和剂实验结果

实验表明,中和剂 (1%硫代硫酸钠+1%吐温-80+0.03mol/L pH7.2PBS)能有效中和有效碘40mg/L浓度及以下的三碘氧化合物消毒剂溶液,且中和剂与中和产物对各实验菌均无不良影响。

2.2 杀菌效果

实验表明,三碘氧化合物消毒剂305ppm(6000倍稀释)杀灭细菌繁殖体只需1min,1.25ppm(240002倍稀释)低剂量也只需要20min。杀真菌所需浓度约为杀细菌的8倍。能杀枯草杆菌黑色变种芽孢,符合高效消毒剂的要求,可以推测其杀病毒能力也强。

2.3 抗有机物

实验表明,25%、50%的小牛血清对三碘氧化合物消毒剂杀灭作用均无影响;在对照组中,25%、50%小牛血清对含聚维酮碘的普通碘伏杀灭作用则有轻度影响;而目前含有机物25~50%的小血清对含聚维酮碘的普通碘伏消毒能力的报道均为较严重影响;实验结果表明,三碘氧化合物消毒剂是抗有机物影响能力最强的碘伏类消毒剂,因此适宜于养殖场的环境消毒。

2.4 现场实验

实验表明,三碘氧化合物消毒剂有效碘25mg/L(1200倍稀释)喷于地面,作用5min对地面自然菌的平均杀灭率为99.68%,达到90.00%以上,符合消毒现场应用实验合格要求。而普通碘伏基本无效。

2.5 养殖实验

三碘氧化合物消毒剂组在3个组别中上市率最高,中鸡均重最大。料肉比方面三碘氧化合物消毒剂组与普通碘伏和空白对照组差异显著 (P<0.05),大鸡均重三碘氧化合物消毒剂组与普通碘伏组差异极显著 (P<0.01)。从生产成绩方面看,三碘氧化合物消毒剂组上市率最高,料肉比最低,中鸡与大鸡均重最大,普通碘伏组与空白对照组差异不显著。

3 讨论分析与结论

(1)实验表明,三碘氧化合物消毒剂在低浓度下可以快速杀死细菌繁殖体、真菌、细菌芽孢,而且在高浓度有机物50%小牛血清存在上,对消毒效果也无影响,按1:1200倍稀释现场消毒,5min内对环境中的自然菌可达99.9%杀灭率。根据三碘氧化合物消毒剂对芽孢有良好的杀灭作用来推测,三碘氧化合物消毒剂是可以杀病毒的,属高效消毒剂。

(2)含聚维酮碘的普通碘伏在有机物干扰下快速失效,不适合养殖场环境消毒,根本原因可能是聚维酮碘、非离子表面活性剂碘和季铵盐碘抗有机物能力差。三碘氧化合物消毒剂之所以能突破碘伏抗有机物能力差的缺陷,可能与三碘氧化合物的杀菌方式和十二烷基氧化胺载体也具有杀菌功能有关,而第一、二代碘伏 (聚维酮碘和季铵盐络合碘)均以游离碘杀菌,而且载体几乎无杀菌功能。同时三碘氧化合物消毒剂中的非离子胶束微囊可直接解离有机物,表面活性剂又对病原及环境中的有机物进行清洗,因而在实验条件下高浓度的有机物也不影响三碘氧化合物消毒剂的消毒杀菌能力。所以三碘氧化合物消毒剂适宜于对污染环境的消毒,可推荐用于养殖场环境消毒、器械消毒等。

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