基于HPLC指纹图谱的中药破壁饮片质量评价

彭丽华，赖智填，成金乐*，王慧玲

(1.国家中医药管理局 中药破壁饮片技术与应用重点研究室，广东 中山 528437；2.广东省破壁粉粒工程技术研究开发中心，广东 中山 528437；3.中山市中智药业集团有限公司，广东 中山 528437)

基于HPLC指纹图谱的中药破壁饮片质量评价

彭丽华1，2，3，赖智填1，2，3，成金乐1，2，3*，王慧玲1，2，3

(1.国家中医药管理局 中药破壁饮片技术与应用重点研究室，广东 中山528437；2.广东省破壁粉粒工程技术研究开发中心，广东 中山528437；3.中山市中智药业集团有限公司，广东 中山528437)

通过建立金钗石斛、红参、黄芪等多味中药破壁饮片-中间体-原料的HPLC指纹图谱，对破壁饮片的制备过程进行化学成分追踪，分析破壁工艺对中药物质基础的影响，为中药破壁饮片的质量评价提供重要参数。

中药破壁饮片；指纹图谱；质量评价

中药破壁饮片是通过现代超微粉碎技术将传统中药饮片粉碎成破细胞壁粉体(中间体)后，再通过专利制粒技术制备而成的可直接冲泡口服的中药饮片。与传统中药饮片相比，中药破壁饮片具有药材利用率高、质量均一和应用便捷等特点[1]。作为一种新型中药饮片，其质量的有效控制是该类产品被市场认可的亟待解决的关键问题。但由于破壁工艺技术的引入已破坏了传统中药饮片的外观性状及显微特征，所以传统饮片的质量评价方法已不能有效地评价破壁饮片的质量。而基于整体化学表征基础上的中药HPLC指纹图谱技术被认为是能解决该关键问题的有效手段之一。中药HPLC指纹图谱能基本反映中药化学物质基础的全貌，使中药质控指标由原有的单一成分含量测定上升为对整个中药内在品质的检测，实现对中药内在质量的综合评价和整体物质的全面控制。至目前为止，中智药业集团已对多个品种的中药破壁饮片—破壁粉体(中间体)—传统饮片开展了HPLC指纹图谱研究及相关性研究，以期明确破壁技术对中药饮片质量(化学物质基础层面)的影响，为中药破壁饮片的质量评价提供重要参数。本文对部分示范研究作一简单综述。

1 中药破壁饮片—破壁粉体(中间体)—传统饮片HPLC指纹图谱研究

1.1金钗石斛破壁饮片—破壁粉体—传统饮片HPLC指纹图谱研究 欧焕娇[2]对14批不同产地金钗石斛破壁饮片—破壁粉体—传统饮片进行HPLC指纹图谱分析，采用中南大学与中智药业集团联合开发的“中智药业集团中药指纹图谱数据库”软件(软件著作权登记号：2012SR031430，版本号：V1.0)进行数据分析和色谱相似度评价。14批金钗石斛破壁饮片的全谱相似度达0.90以上，14批金钗石斛破壁粉体的全谱相似度达0.98以上，14批金钗石斛传统饮片的全谱相似度达0.90以上。同一批次内的破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片的图谱基本一致，破壁饮片共有模式、破壁粉体共有模式和传统饮片共有模式之间的全谱相似度均大于0.99，均含有相同的10个共有特征峰(共有峰峰面积占总峰面积的90%以上)[2]。

1.2红参破壁饮片—破壁粉体—传统饮片HPLC指纹图谱研究 刘敏等[3]对10批不同产地红参破壁饮片—破壁粉体—传统饮片进行HPLC指纹图谱分析，采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件进行数据分析和色谱相似度评价。10批红参破壁饮片的全谱相似度达0.96以上，10批红参破壁粉体的全谱相似度达0.92以上，10批红参传统饮片的全谱相似度达0.98以上。同一批次内的破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片的图谱基本一致，均含有相同的11个共有特征峰(共有峰峰面积占总峰面积的90%以上)。

1.3黄芪破壁饮片—破壁粉体—传统饮片HPLC指纹图谱研究 刘敏等[3]对10批不同产地黄芪破壁饮片—破壁粉体—传统饮片进行HPLC指纹图谱分析，采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件进行数据分析和色谱相似度评价。10批黄芪破壁饮片的全谱相似度达0.94以上，10批黄芪破壁粉体的全谱相似度达0.91以上，除2批样品偏差大外，其余8批黄芪传统饮片的全谱相似度达0.97以上。同一批次内的破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片的图谱基本一致，破壁饮片共有模式、破壁粉体共有模式和传统饮片共有模式之间的全谱相似度均大于0.88，均含有相同的8个共有特征峰(共有峰峰面积占总峰面积的90%以上)。

1.4三七破壁饮片—破壁粉体—传统饮片HPLC指纹图谱研究 陈伟璇等[4]对11批不同产地三七破壁饮片—破壁粉体—传统饮片进行HPLC指纹图谱分析，采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件进行数据分析和色谱相似度评价。11批三七破壁饮片的全谱相似度达0.92以上，11批三七破壁粉体的全谱相似度达0.95以上，11批三七传统饮片的全谱相似度达0.97以上。同一批次内的破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片的图谱基本一致，破壁饮片共有模式、破壁粉体共有模式和传统饮片共有模式之间的全谱相似度均大于0.99，均含有相同的8个共有特征峰(共有峰峰面积占总峰面积的90%以上)。

1.5丹参破壁饮片—破壁粉体—传统饮片HPLC指纹图谱研究 何昱[5]对10批不同产地丹参破壁饮片—破壁粉体—传统饮片进行HPLC指纹图谱分析，采用“中智药业集团中药指纹图谱数据库”软件进行数据分析和色谱相似度评价。10批丹参破壁饮片的全谱相似度达0.93以上，10批丹参破壁粉体的全谱相似度达0.84以上，10批丹参传统饮片的全谱相似度达0.86以上。同一批次内的破壁饮片、破壁粉体及传统饮片的图谱基本一致，30批样品的全谱相似度均大于0.91。

1.6玄参破壁饮片—破壁粉体—传统饮片HPLC指纹图谱研究 焦豪妍等[6]对10批不同产地玄参破壁饮片—破壁粉体—传统饮片进行HPLC指纹图谱分析，采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件进行数据分析和色谱相似度评价。10批玄参破壁饮片的全谱相似度达0.93以上，10批玄参破壁粉体的全谱相似度达0.90以上，10批玄参传统饮片的全谱相似度达0.94以上。同一批次内的破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片的图谱基本一致，各批样品全谱相似度均大于0.90，均含有相同的14个共有特征峰(共有峰峰面积占总峰面积的90%以上)。

1.7党参破壁饮片—破壁粉体—传统饮片HPLC指纹图谱研究 朱蓉等[7]对10批不同产地党参破壁饮片—破壁粉体—传统饮片进行HPLC指纹图谱分析，采用“中智药业集团中药指纹图谱数据库”软件进行数据分析和色谱相似度评价。10批党参破壁饮片的全谱相似度达0.90以上，10批党参破壁粉体的全谱相似度达0.90以上，10批党参传统饮片的全谱相似度达0.85以上。同一批次内的破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片的图谱基本一致，破壁饮片共有模式、破壁粉体共有模式和传统饮片共有模式之间的全谱相似度均大于0.98，均含有相同的15个共有特征峰(共有峰峰面积占总峰面积的90%以上)。

1.8决明子破壁饮片—破壁粉体—传统饮片HPLC指纹图谱研究 唐玉莲等[8]对12批不同产地决明子破壁饮片—破壁粉体—传统饮片进行HPLC指纹图谱分析，采用“中智药业集团中药指纹图谱数据库”软件进行数据分析和色谱相似度评价。除1个批次外的11批决明子破壁饮片的全谱相似度达0.95以上，12批决明子破壁粉体的全谱相似度达0.95以上，12批决明子传统饮片的全谱相似度达0.90以上。同一批次内的破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片的图谱基本一致，破壁饮片共有模式、破壁粉体共有模式和传统饮片共有模式之间的全谱相似度均大于0.98，均含有相同的27个共有特征峰(共有峰峰面积占总峰面积的90%以上)。

2 讨论及展望

2.1中药破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片物质基础种类一致 中药破壁饮片可认为是在传统饮片基础上以粉末形态应用的新型中药饮片，其物质基础应与传统饮片保持稳定一致。笔者通过对金钗石斛、红参和黄芪等品种的破壁饮片—破壁粉体(中间体)—传统饮片指纹图谱数据的阐述，发现3类样品图谱中主要峰群的整体图貌基本一致，虽然各组分相对含量存在一定的差别，但同一批次中药传统饮片在制备成破壁饮片后的全谱谱图相似度可达90%以上，表明上述产品的破壁工艺未引起该传统饮片大量化学成分的损失和新化学成分的转化或生成。同时表明HPLC指纹图谱可以作为破壁饮片质量评价的一个重要手段。

2.2中药破壁饮片、破壁粉体及其传统饮片中成分含量存在一定差异 从指纹图谱的峰面积分析可了解到：虽然中药破壁饮片制备前后，各破壁饮片—破壁粉体(中间体)—传统饮片指纹图谱的全谱相似度极高，化学成分种类无明显变化，但各组分的相对含量存在一定的差异。为更科学、全面地评价中药破壁饮片的质量，后续还需在HPLC指纹图谱研究的基础上结合多项指标成分(主成分)的含量测定进行综合分析，也为破壁饮片和传统饮片之间的剂量换算提供参考。

2.3中药破壁饮片有必要建立专属于其自身的HPLC指纹图谱 除中药破壁饮片外，目前市场上还有配方颗粒、超微饮片等颗粒型中药饮片或饮片提取物。据文献分析，与中药破壁饮片产品相似性较高的中药超微饮片已开展了大量HPLC指纹图谱研究。但由于两者在破细胞壁(超微粉碎)和制粒工艺环节都存在技术的差异，可能对被加工药材成分的影响也存在差异，所以中药破壁饮片有必要建立专属于其自身的HPLC指纹图谱。通过不同产地中药传统饮片—破壁粉体—破壁饮片的HPLC指纹图谱研究，可为破壁饮片质量控制标准的制定、品质评价、合理选购原料药材、指导GAP及制备工艺问题追踪等提供依据和指导，从而实现破壁饮片产品的质量稳定、可控。

[1] 成金乐，赖智填，彭丽华.中药破壁饮片研究[J].世界科学技术—中医药现代化，2014，16(2)：254-262.

[2] 欧焕娇.金钗石斛破壁粉粒质量控制方法与药效学研究[D].广州：广州中医药大学，2010.

[3] 刘敏.红参、黄芪、三七三味中药的饮片、破壁粉体、破壁粉粒的质量评价研究[D].广州：广州中医药大学，2011.

[4] 陈伟璇，刘敏，严萍，等.三七破壁饮片指纹图谱研究[J].中药材，2012，35(7)：1056-1061.

[5] 何昱.药对干姜-高良姜挥发油化学成分及中药丹参指纹图谱研究[D].长沙：中南大学，2011.

[6] 焦豪妍，杨燕军，徐吉银，等.玄参饮片-破壁粉体-破壁饮片的HPLC指纹图谱研究[J].中国药房，2012，23(3)：243-245.

[7] 朱蓉，张泰铭，梁逸曾，等.党参炮制品的高效液相色谱指纹图谱研究[J].时珍国医国药，2011，22(4)：794-796.

[8] 唐玉莲，梁逸曾，张华秀，等.决明子药材、超微粉体和破壁粉粒指纹图谱研究[J].中药材，2011，34(12)：1861-1866.

QualityEvaluationofUltrafineGranularPowderofHerbalMedicinebyHPLCFingerprints

PENGLihua1，2，3，LAIZhitian1，2，3，CHENGJinle1，2，3*，WANGHuiling1，2，3

(1.KeyLaboratoryofUltrafineGranularPowderofHerbalMedicinetechnologyandApplicationofstateAdministration，Zhongshan528437，China；2.TheEngineeringTechnologyResearchandDevelopmentCenterofUltrafineGranularPowderofHerbalMedicineofGuangdongProvince，Zhongshan528437，China；3.ZEUSPharmaceuticalgroup，Zhongshan528437，China)

The study is aimed to establish HPLC fingerprint of Ultrafine Granular Powder—Ultrafine Powder—Decoction Pieces of Herbal Medicine to track the chemical composition during Ultrafine Granular Powder preparation，and the effect of the technology on chemical composition was analyzed.The results provide the important parameters for quality evaluation of Ultrafine Granular Powder.

Ultrafine Granular Powder；fingerprint；quality evaluation

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.9.032

2015-09-25)

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成金乐，教授，博士生导师，研究方向：创新中药；Tel：(0760)85312928,E-mail：gdcjl9@126.com