沙坦类降压药与美托法宗联合用药的成药性评价

王秀华，张婉直

(西安力邦肇新生物科技有限公司，西安　710077)



沙坦类降压药与美托法宗联合用药的成药性评价

王秀华，张婉直

(西安力邦肇新生物科技有限公司，西安710077)

摘要：目的通过单次及多次给药的协同降压作用，探索复方药物组成及用药剂量。方法采用自发性高血压模型大鼠(SHR)作为研究对象，给药后观测血压、心率、尿量和肾功能等水平，检测数据用SPSS 20.0软件进行统计学分析。结果各受试物对SHR均有显著的降压作用，并且合用均较单用的降压作用明显。结论沙坦类降压药与美托法宗合用有一定的协同降压作用，其降压作用与复代文相当，但利尿作用则较复代文弱，提示对电解质紊乱有一定预防作用。

关键词：沙坦类降压药；复代文；美托法宗；阈剂量；协同降压作用

心脑血管疾病已成为人类死亡病因的头号杀手，而降压达标则是减少心脑血管病发生及死亡的关键。由于高血压是多重机制产生的疾病，为增强降压效果而不增加不良反应，低剂量单药治疗疗效不满意的，可以采用2种或多种降压药物联合治疗，低剂量复方制剂也可作为降压治疗的起始药和维持药[1-4]。

噻嗪类利尿剂具有良好的疗效和性价比。美托法宗与氢氯噻嗪都作用于远曲小管，阻断Na+-Cl-共同转运体，减少Na+和C1-重吸收，促进Na+、C1-和水的排出[5]。沙坦类血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂的降压强度和幅度与其他标准降压药基本相同[6]。噻嗪类利尿剂与沙坦类的联合，是目前公认的可优先选择的联合降压治疗方案[7]，临床上复方制剂有复代文、安博诺和美嘉素。虽然氢氯噻嗪是大多数单片复方制剂中的主要成分，但其降压疗效弱于氯噻酮和美托法宗。目前的高血压指南并未具体推荐使用何种噻嗪类利尿剂。本研究主要观察沙坦类降压药替米沙坦、缬沙坦和厄贝沙坦分别与利尿药美托法宗联合使用的协同降压作用，以期寻找最佳组合。

1 仪器与材料

1.1 仪器Softron智能无创血压计(北京软隆生物技术有限公司，BP-98A Series)；日立生化仪(日本日立公司，HITACHI 7080)。

1.2 试药复代文(Novartis Farma S.p.A.(I)，批号T7015)；替米沙坦(浙江天宇药业股份有限公司，批号20121106)；缬沙坦(珠海润都制药股份有限公司，批号64613070201)；厄贝沙坦(珠海润都制药股份有限公司，批号62514020104)；美托法宗(西安力邦肇新生物科技有限公司，批号20130901)；羧甲基纤维素钠(CMC-Na，国药集团化学试剂有限公司，批号F20100925)；水合氯醛(国药集团化学试剂有限公司，批号20140304)

1.3 实验动物自发性高血压模型大鼠SHR，体质量280～350 g，雄性，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号为SCXK(京)2012-0001。

2 方法

2.1 沙坦类与美托法宗单用单次给药阈剂量的筛选取自发性高血压大鼠(SHR)20只，适应性养1周后，分成5组：阴性对照组，美托法宗组，缬沙坦组，替米沙坦和厄贝沙坦组。按照各自药物的临床剂量，折算SHR的给药剂量， 阴性对照组灌胃给予5 g·L-1的CMC-Na；替米沙坦组1，2，4和8 mg·kg-1；缬沙坦组2，4，8和16 mg·kg-1；厄贝沙坦组3.75，7.5，15和30 mg·kg-1；美托法宗组0.025，0.05，0.1和0.2 mg·kg-1。预摸4个药物对SHR降压的阈剂量：灌胃给药，首先给予最低剂量，1 h后测定该大鼠血压，若无降压，重复给予上次剂量，再观察1 h，若无降压作用，再次给药。上述药物均做到有降压作用的剂量为止，该剂量就为药物对SHR的阈剂量。20只SHR分2次实验，洗脱时间为3～4 d，使每组的动物数为8只。观察时间点为0，1，2，3和4 h。观察受试物单次给药对SHR血压和心率的影响。

2.2 沙坦类与美托法宗联合单次给药协同降压作用雄性SHR40只，适应性饲养1周，分为8组，每组5只动物。即阴性对照组(5 g·L-1的CMC-Na)、替米沙坦组、缬沙坦组和厄贝沙坦组、美托法宗组、替米沙坦+美托法宗组、缬沙坦+美托法宗组和厄贝沙坦+美托法宗组。SHR单次灌胃给药，用Softron智能无创血压计检测大鼠血压和心率。观察时间点为0，1 h的血压和心电图。各组大鼠代谢7 d后，重复上述实验，使每组的动物数为10。各组大鼠再代谢7 d后，分为阴性对照组(5 g·L-1的CMC-Na)、美托法宗组、替米沙坦+美托法宗组、缬沙坦+美托法宗组和厄贝沙坦+美托法宗组，单次灌胃给药后，立即放于代谢笼中，接取尿量，统计1～4 h的尿量。

2.3 缬沙坦+美托法宗与复代文降压作用的比较研究取雄性SHR 40只，先测定给药前各SHR的血压和心率，按照收缩压随机分层分组，分成对照组(为5 g·L-1的CMC-Na)；缬沙坦+美托法宗高剂量组 8+0.1 mg·kg-1、低剂量组 4+0.05 mg·kg-1；复代文(缬沙坦+氢氯噻嗪)高剂量组 8+1.25 mg·kg-1、低剂量组 4+0.625 mg·kg-1，每组各8只大鼠。每天按照100 g体质量灌胃1 mL给药。测血压时间点为给药后1，3，7 d，测定上述药物给药2 h后对SHR血压和心率的影响。上述大鼠尿量观察时间点为各受试物给药后第2天和第8天，当天给药后立即放于代谢笼中，用代谢笼接取上述各时间点各大鼠的1，2，3，4 h尿量。大鼠用12 g·L-1的水合氯醛麻醉 0.36 g·kg-1，腹主动脉取血，取血清，用日立生化仪，HITACHI 7080测尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)。

2.4 统计分析试验数据采用SPSS 20.0软件进行统计，以单因素方差分析进行有效性比较，P<0.05为具有显著性差异。

3 结果

3.1 沙坦类降压药与美托法宗单用单次给药阈剂量各受试物对SHR均有一定的降压作用，且具有良好的剂量依赖性。各受试物的第一档剂量降压作用不明显，从第二档剂量开始对SHR的血压下降百分率与对照组相比有显著性差异(P<0.01，P<0.05)。结果见表1～3。各受试物对SHR的心率影响均不明显。

表1 受试物单次给药对SHR收缩压的影响

Tab.1 Effect on systolic blood pressure of SHR after single dose administration

±s，n=8)

组别剂量/mg·kg-1收缩压给药前1次2次3次4次对照组CMC-Na180.2±7.3179.6±5.9183.0±7.5178.3±6.3174.5±2.3--0.3±2.51.6±3.8-1.0±3.8-1.1±2.7缬沙坦2/4/8/16182.3±6.4176.2±7.4145.4±12.0137.5±10.6127.5±14.6--3.2±6.2-20.2±6.0**-24.6±5.0**-30.7±8.4**替米沙坦1/2/4/8181.2±8.8179.2±9.1150.6±12.5134.3±19.4128.3±17.7--0.9±6.2-16.9±6.0**-25.8±10.6**-30.7±7.5**厄贝沙坦3.75/7.5/15/30176.6±6.9176.7±6.2145.1±12.1139.7±18.5133.3±7.8-0.2±5.5-17.7±7.7**-20.8±10.9**-25.2±5.9**美托法宗0.025/0.05/0.1/0.2175.9±6.5175.3±6.5153.5±16.6146.3±17.1136.7±13.7--0.3±2.0-12.7±8.2**-16.6±10.8**-22.2±8.5**

注：*P<0.05，**P<0.01vsCMC-Na。

表2 受试物单次给药对SHR平均压的影响

Tab.2 Effect on mean blood pressure of SHR after single dose administration

±s，n=8)

组别剂量/mg·kg-1平均压给药前1次2次3次4次对照组CMC-Na149.2±11.8145.5±10.5144.8±13.2138.3±13.7139.6±6.8--2.1±8.0-2.6±9.8-6.9±11.5-2.7±6.6缬沙坦2/4/8/16150.9±9.4137.3±6.7118.7±10.9110.3±18.7105.3±16.9--8.7±7.2-21.1±8.8**-27.0±10.5**-31.2±13.7**替米沙坦1/2/4/8145.8±8.6146.6±10.2127.0±18.1108.2±18.6100.7±24.1-1.0±10.7-12.3±15.6-25.3±14.8*-33.6±17.5*厄贝沙坦3.75/7.5/15/30149.2±5.3146.1±12.1119.1±15.2115.8±16.2106.3±14.5--1.8±11.1-19.8±13.0*-22.3±11.8*-28.6±9.9**美托法宗0.025/0.05/0.1/0.2145.3±6.1144.4±12.5123.3±16.4115.0±20.9113.0±12.1--0.6±6.2-15.0±12.0*-20.5±15.8-21.8±10.9**

注：*P<0.05，**P<0.01 vs CMC-Na(SHR)。

表3 受试物单次给药对SHR舒张压的影响

Tab.3 Effect on diastolic blood pressure of SHR after single dose administration

±s，n=8)

组别剂量/mg·kg-1舒张压给药前1次2次3次4次对照组CMC-Na133.6±14.4128.5±13.5125.7±17.4118.2±19.0121.8±9.6--3.1±12.1-5.3±15.2-10.6±18.1-4.0±9.8缬沙坦2/4/8/16135.3±12.2113.7±14.6105.2±11.496.8±23.794.2±18.3--15.4±13.4-21.6±12.2*-28.6±15.6-31.2±18.1*替米沙坦1/2/4/8128.0±10.7130.3±13.5115.3±22.195.2±18.886.8±28.0-2.6±15.1-8.5±23.1-24.7±18.2-35.1±24.9厄贝沙坦3.75/7.5/15/30135.5±8.7130.8±15.5106.2±17.9103.8±15.693.0±18.5--2.9±15.3-20.8±18.1-23.0±14.0-30.7±13.5**美托法宗0.025/0.05/0.1/0.2129.6±6.9129.0±16.5108.0±17.499.3±23.7101.3±13.3--0.6±10.1-16.2±16.4-22.8±20.2-21.3±14.1

注：*P<0.05，**P<0.01 vs CMC-Na(SHR)。

3.2沙坦类降压药与美托法宗联合单次给药协同降压作用

3.2.1 沙坦类降压药与美托法宗联合单次给药对血压和心率的影响与阴性对照组相比，各受试物对SHR均有显著的降压作用，并且合用均较单用的降压作用明显。结果见表4～6。各受试物对SHR的心率影响均不明显。

表4 受试物单次给药对SHR收缩压的影响

Tab.4 Effect on systolic blood pressure of SHR after single compound formulation administration

±s，n=10)

组别剂量/mg·kg-1收缩压给药前给药后对照组CMC-Na182.5±9.2182.4±7.4 -0.1±3.4 美托法宗0.1181.9±8.9153.3±5.7**--15.6±4.7## 缬沙坦8183.2±8.5145.7±10.2**--20.3±7.3##缬沙坦+美托法宗8+0.1183.1±7.3132.6±7.4**--27.5±4.3##替米沙坦8182.0±7.4147.0±7.0** --19.2±4.5## 替米沙坦+美托法宗8+0.1182.7±8.3134.5±15.2**--26.2±9.6##厄贝沙坦15181.7±8.1150.7±7.5** --17.0±3.1## 厄贝沙坦+美托法宗15+0.1182.4±7.4132.6±14.9**--27.1±9.5##

注：**P<0.01 vs CMC-Na血压绝对值；##Pvs CMC-Na变化百分率。

表5 受试物联合单次给药对SHR平均压的影响

Tab.5 Effect on mean blood pressure of SHR after single compound formulation administration

±s，n=10)

组别剂量/mg·kg-1平均压给药前给药后对照组CMC-Na150.8±9.9150.8±14.0 -0.1±8.9 美托法宗0.1146.7±9.7125.3±10.9**--14.2±10.1##缬沙坦8152.5±10.3122.2±11.1**--19.3±11.0##缬沙坦+美托法宗8+0.1152.9±11.2111.9±12.6**--26.6±8.3##替米沙坦8145.6±10.3121.4±10.3**--16.2±9.7##替米沙坦+美托法宗8+0.1145.2±10.4108.2±20.1**--25.2±13.9##厄贝沙坦15153.0±7.7125.9±8.3**--17.5±7.7##厄贝沙坦+美托法宗15+0.1108.9±17.1**153.9±9.1--28.9±12.4##

注：**P<0.01 vs CMC-Na血压绝对值；##Pvs CMC-Na变化百分率。

表6 受试物联合单次给药对SHR舒张压的影响

Tab.6 Effect on diastolic blood pressure of SHR after single compound formulation administration

±s，n=10)

组别剂量/mg·kg-1舒张压给药前给药后对照组CMC-Na135.1±11.8135.0±16.9 -0.4±13.6 美托法宗0.1129.1±12.1111.4±14.4**--12.9±15.6##缬沙坦8137.1±13.2110.4±12.5**--18.4±14.8##缬沙坦+美托法宗8+0.1137.8±14.7102.0±15.3**--25.5±11.1##替米沙坦8127.4±15.3108.5±12.4**--13.5±15.1#替米沙坦+美托法宗8+0.1126.5±14.295.0±22.7**--24.3±18.2##厄贝沙坦15138.6±9.5113.4±9.6** --17.5±11.9## 厄贝沙坦+美托法宗15+0.1139.7±11.597.1±18.3**--30.0±14.9##

注：**P<0.01 vs CMC-Na血压绝对值；##Pvs CMC-Na变化百分率。

3.2.2 沙坦类降压药与美托法宗联合单次给药对尿量的影响与对照组相比，各受试物组排尿量均有所增加，其中3～4 h，各受试物组的尿量与阴性对照组SHR相比均有显著增多。结果见表7。

表7 受试物联合单次给药对SHR尿量的影响

Tab.7 Effect on urine volume of SHR after single compound formulation administration

±s，n=10)

组别剂量/mg·kg-1尿量/mL1h1h3h4h对照组CMC-Na1.1±0.82.1±0.82.5±0.83.2±1.1美托法宗0.11.4±0.93.0±1.1*4.3±1.2**5.0±1.2**缬沙坦+美托法宗8+0.12.0±1.23.4±2.04.4±2.4*5.2±2.5*替米沙坦+美托法宗8+0.11.5±1.12.8±1.44.1±2.3*4.9±2.2*厄贝沙坦+美托法宗15+0.12.4±1.5*4.6±1.8**5.7±2.1**6.4±2.2**

注：*P<0.05，**P<0.01 vs CMC-Na。

3.3 缬沙坦+美托法宗与复代文降压作用

3.3.1 缬沙坦与美托法宗联合多次给药对SHR血压和心率的影响与阴性对照组相比，给药第1天缬沙坦+美托法宗显著降低SHR的血压，给药第3天直至给药第7天，降压作用较单次给药的降压作用更强。与阳性对照药复代文相比，缬沙坦和美托法宗合用对SHR降压作用与复代文相当。结果见表8～10。各受试物对SHR心率影响均不明显。

表8 缬沙坦和美托法宗联合多次给药对SHR收缩压的影响

±s，n=8)

组别剂量/mg·kg-1收缩压给药前第1天第3天第7天对照组CMC-Na185.4±9.2184.9±5.3 186.3±4.5 189.0±8.5 --0.1±4.0 0.6±4.4 2.0±4.3 缬沙坦+美托法宗高8+0.1185.8±13.3142.9±10.6**134.0±14.1**133.9±13.2**--23.0±4.5##-27.8±5.7##-27.9±4.9##缬沙坦+美托法宗低4+0.05185.7±4.2158.9±14.0**143.5±10.5**140.5±15.3**--14.4±7.3##-22.7±5.8##-24.3±7.8##复代文高8+1.25185.5±7.6145.7±10.0**133.6±9.5**132.3±11.5**--21.4±5.1##-27.9±5.1##-28.7±5.0##复代文低4+0.625185.5±11.0156.8±7.1**149.8±10.8**141.2±13.1**--15.3±5.4##-19.3±3.6##-23.9±5.7##

注：**P<0.01 vs CMC-Na；##P<0.01 vs CMC-Na变化百分率。

表9 缬沙坦和美托法宗联合多次给药对平均压的影响

Tab.9 Effect on mean blood pressure of SHR after multiple administrations of valsartan and metolazone

±s，n=8)

组别剂量/mg·kg-1平均压给药前第1天第3天第7天对照组CMC-Na146.0±16.4154.3±10.1 147.9±12.1 150.1±11.2 - 6.5±10.3## 2.4±14.1## 3.5±8.5##缬沙坦+美托法宗高8+0.1151.2±18.6110.8±11.4**103.4±16.7**111.5±11.8**--26.0±11.7##-30.8±13.0##-25.7±8.2##缬沙坦+美托法宗低4+0.05149.6±11.9133.1±8.6* 120.5±11.9**117.0±14.7**--10.5±9.5 -19.2±8.3##-21.9±6.0##复代文高8+1.25152.8±8.8 118.0±10.2**109.8±12.0**108.7±14.6**- -22.7±5.9##-28.0±7.7##-29.0±7.0##复代文低4+0.625148.7±17.6125.0±16.2*123.5±17.8**116.0±13.7**--15.2±12.1#-16.9±7.4#-21.7±6.7##

注：*P<0.05，**P<0.01 vs CMC-Na；#P<0.05，##P<0.01 vs CMC-Na变化百分率。

表10 缬沙坦和美托法宗联合多次给药对舒张压的影响

Tab.10 Effect on diastolic blood pressure of SHR after multiple administrations of valsartan and metolazone

±s，n=8)

组别剂量/mg·kg-1舒张压给药前第1天第3天第7天对照组CMC-Na126.2±21.2138.8±14.1 128.8±17.5 130.7±14.3 -12.4±19.9 6±23.0 5.2±14.0缬沙坦+美托法宗高8+0.1134.3±23.1100.8±9.9**85.1±12.5**100.4±13.2**--22.3±18.3##-34.8±16.0##-23.7±12.7##缬沙坦+美托法宗低4+0.05131.6±16.5117.9±6.1**109.0±13.9* 105.3±15.5**--9.1±13.0# -16.4±11.9# -20.1±5.6## 复代文高8+1.25136.4±13.7104.1±12.5**97.9±14.4**96.9±17.4**--23.5±7.2##-27.9±10.5##-29.1±8.8##复代文低4+0.625130.5±23.1109.1±21.3**110.3±22.0 103.8±15.5**--14.7±20.1#-13.8±20.1 -18.7±15.7##

注：*P<0.05，**P<0.01 vs CMC-Na；#P<0.05，##P<0.01 vs CMC-Na变化百分率。

3.3.2 缬沙坦和美托法宗联合多次给药对肾功能的影响缬沙坦与美托法宗合用对SHR的尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)影响不明显。结果见表11。

表11 缬沙坦和美托法宗联合多次给药对肾功能的影响

Tab.11 Effect on renal function levels of SHR after multiple administrations of valsartan and metolazone

组别剂量/mg·kg-1血清生化水平BUN/mmol·L-1CRE/μmol·L-1对照组CMC-Na11.3±0.636.6±3.6缬沙坦+美托法宗高8+0.110.8±1.041.8±6.2缬沙坦+美托法宗低4+0.0510.3±0.344.0±7.7复代文高8+1.259.7±1.039.6±5.1复代文低4+0.6259.7±0.934.4±4.5

3.3.3 缬沙坦与美托法宗联合多次给药对尿量的影响 各受试物给药第2天和第8天，SHR在1～4 h的尿量均有所增多。结果见表12。

表12 缬沙坦和美托法宗联合多次给药对尿量的影响

Tab.12 Effect on urine volume of SHR after multiple administrations of valsartan and metolazone

组别剂量/mg·kg-1第2天1h1h3h4h第8天1h1h3h4h对照组CMC-Na1.1±0.62.5±0.82.9±0.63.1±0.91.3±0.83.0±0.83.3±0.73.7±0.7缬沙坦+美托法宗高8+0.13.1±1.1**4.9±2.3*5.5±2.3**6.1±2.1**3.2±1.1**4.9±1.3**5.6±1.6**6.0±1.7**缬沙坦+美托法宗低4+0.052.4±1.2*4.1±1.3**4.4±1.1**5.1±0.8**2.4±1.23.3±1.53.9±1.34.1±1.2复代文高8+1.253.4±1.3**5.7±2.0**6.5±1.9**6.6±1.9**3.8±1.2**6.2±1.6**6.7±1.7**7.0±1.8**复代文低4+0.6252.6±0.9**4.3±1.6*5.5±1.9**6.2±1.9**1.6±0.63.1±0.44.1±0.5*4.8±0.9*

注：*P<0.05，**P<0.01 vs CMC-Na(SHR)。

4 讨论

沙坦类能阻断各种途径产生的所有血管紧张素Ⅱ与其特殊受体结合，从而减弱或阻断其升压作用；沙坦类不影响转换酶的作用，因此体内不会蓄积大量的缓激肽，从而避免了普利类的干咳反应；沙坦类药物对心、脑和肾脏都有良好的器官保护作用。

本研究结果表明：缬沙坦、替米沙坦、厄贝沙坦和美托法宗的降压起效剂量分别为4，4，7.5和0.05 mg·kg-1。但考虑到其降压幅度，最终我们选择了比起效剂量高一档的剂量作为其阈剂量，即分别为8，8，15和0.1 mg·kg-1。

沙坦类降压药与美托法宗联合单次给药协同降压作用研究结果表明：与阴性对照组相比，各受试物对SHR均有显著的降压作用，并且合用均较单用的降压作用明显。与对照组相比，各受试物组的SHR排尿量均有所增加。由于缬沙坦与美托法宗的半衰期较接近，均为8～9 h，因此选择缬沙坦和美托法宗联合给药作进一步研究。

实验中虽然复代文和缬沙坦+美托法宗均未表现出对肾功能的影响，但给药仅7 d，可能由于时间较短还未明显影响到肾功能。

参考文献：

[1]中国高血压防治指南修订委员会.中国高血压防治指南2010[J]．中华高血压杂志，2011，19(8):701-743.

[2]Neutel J M，Franklin S S，Oparil S，et a1．Efficacy and safety of irbesartan/HCTZ combination therapy as initial treatment for rapid control of severe hypertension[J]．J Clin Hypertens(Greenwich)，2006，8(12):850-857．

[3]林金秀，吴可贵. 1999年世界卫生组织/国际高血压联盟关于高血压治疗指南[J].高血压杂志，1999，7(2):97.

[4]李欣，杨世民.抗高血压药物的合理使用分析[J].西北药学杂志，2010，25(3):222-223.

[5]中华医学会心血管病学分会高血压学组.利尿剂治疗高血压的中国专家共识[J].中华高血压杂志，2011，19(3): 214-222.

[6]王章亚.氯沙坦治疗老年原发性高血压疗效观察[J]. 西北药学杂志，2006，21(5):225-226.

[7]沈国强，周文君.缬沙坦氢氯噻嗪联合治疗原发性老年人高血压临床疗效观察[J].临床医学，2003，23(12):49.

Druggability review on combination of ARB antihypertensive drugs and metolazone

WANG Xiuhua，ZHANG Wanzhi(Xi′an Libang Zhaoxin Biological Technology Limited Company，Xi′an 710077，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the composition and dosage of compound formulation by synergetic antihypertensive effect of single and multiple doses administration.MethodsSpontaneous hypertensive rats (SHR) were chosen as the objects of the study. Blood pressure， heart rate，urine volume and renal function levels were observed after the administration. The statistical analysis was determined by using SPSS 20.0 software. ResultsThe results of the study showed significant antihypertensive effects on SHR and the effects of compound formulation were more obvious than using single formulation. ConclusionThe compound formulations of ARB and metolazone had obvious synergetic antihypertensive effect and the antihypertensive effects of compound formulation were same to Co-Diovan，however the diuretic effects were less than Co-Diovan，which prompted a certain preventive effect on electrolyte disorder.

Key words:ARB antihypertensive drug； Co-Diovan； metolazone； threshold dose； synergetic antihypertensive effect

收稿日期：(2015-06-23)

中图分类号：R965

文献标志码：A

文章编号：1004-2407(2016)01-0070-06

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.01.022