三溴乙醇对小鼠麻醉效果的研究

李莉　华再东　任红艳　毕延震　刘西梅　肖红卫　张立苹　郑新民

摘要：为研究三溴乙醇对小鼠的麻醉效果，使用5组不同剂量三溴乙醇（200、350、500、800和1 000 mg/kg）分别腹腔注射小鼠，进行小鼠麻醉。结果表明，200 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，麻醉效果很差，小鼠未达到麻醉状态而持续动弹，350～800 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠能达到很好的麻醉效果。

关键词：三溴乙醇；麻醉；小鼠；效果

中图分类号：Q95-33 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）24-6328-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.24.060

Abstract： To study anesthetic effects of tribromoethanol on mice， the tribromoethanol were processed intraperitoncal injection with five groups of different dose gradients（200、350、500、800 and 1 000 mg/kg） respectively， and then the anesthesia onset time and duration time were compared. Results showed that the tribromoethanon at dosage of 200 mg/kg showed the worst anesthesia effect， the mice were unanesthetized and kept moving； intraperitoncal injection of tribromoethanol at dosage of 350～800 mg/kg had moderate anesthesia duration and adequate anesthesia depth， which were suitable anesthesia for mice.

Key words：tribromoethanol；anesthetic；mice；effect

由于小鼠繁殖力强、体小、饲养管理方便，具有很好的一致性和可比性，因此被广泛用于动物试验研究。“超级小鼠”的问世，将外源基因导入小鼠胚胎并建立转基因小鼠技术，已成为探索生物发育、细胞分化、遗传疾病基因表达调控等重要生命现象的主要分子生物学技术，并使转基因技术成为研究热点[1]。

随着科学家们测序人类基因组和绘制小鼠基因图，发现99%的小鼠基因都能在人体基因组中找到相对应的基因。小鼠和人类基因组的高度同源，生理、生化及发育过程基本相同，对环境和药物的反应也极其相似，所以小鼠已经成为构建人类疾病相关模型及研究发病机制的最重要的试验动物。笔者从20世纪80年代开始就致力于转基因技术研究，先后制备了一系列转基因小鼠和猪模型[2]。在转基因试验过程中，麻醉效果是决定移植成功的关键。因此，本研究旨在摸索不同剂量三溴乙醇对昆明小白鼠的麻醉效果，建立适宜、安全、有效的麻醉方案。

1 材料与方法

1.1 试验动物及分组

SPF级昆明小白鼠100只，雌性，体重25～35 g，随机分为5组，每组20只。剂量：第1组：200 mg/kg，第2组：350 mg/kg；第3组：500 mg/kg；第4组：800 mg/kg；第5组：1 000 mg/kg。试验小鼠由湖北省疾病控制中心提供，动物合格证号SCXK（鄂）2015-0018。

1.2 药品

三溴乙醇（SIGMA股份有限公司，批号T48402-25 g），与15.5 mL叔戊醇混合，常温溶解2 h，配成1 600 mg/mL浓储液，使用前用生理盐水稀释成20 mg/mL工作液，适度避光保存。

1.3 注射方式及剂量

麻醉时，左手抓住小鼠，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下使针头向前推0.5 cm左右，再以45°角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤及内脏，可使小鼠处于头低位，使内脏移向上腹。给药时，称取小鼠体重量，按5组不同剂量的三溴乙醇分别通过腹腔注射方式小鼠进行麻醉。给药后使小鼠保持仰卧状态以利于观察心跳、呼吸及复苏反应。

1.4 观测指标

麻醉起效时间：注射麻醉药物至小鼠自然倒下，头、四肢、尾巴、胡须无触碰反应，仰卧时心跳及呼吸均匀，肌肉松弛视为达到完全麻醉状态时间。

麻醉维持时间：从达到完全麻醉状态到有复苏反应的时间，小鼠的前肢或头开始抖动即判定为开始复苏。

2 结果与分析

不同剂量三溴乙醇麻醉效果见表1。除200 mg/kg三溴乙醇麻醉效果很差，小鼠未达到麻醉效果而持续动弹外，其余4组麻醉起效时间大约在3 min左右；350 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，麻醉持续时间（58±7） min，镇痛效果、肌肉松弛度较好；500 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，麻醉持续时间（187±23） min，镇痛效果、肌肉松弛度都很好，麻醉持续时间较长；800 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，麻醉持续时间（507±46） min；以1 000 mg/kg三溴乙醇腹腔注射小鼠，（6±2） min死亡，而350～800 mg/kg三溴乙醇剂量麻醉零死亡。

3 小结与讨论

试验动物麻醉是动物试验中的重要环节之一，选择适宜、安全、有效的麻醉方法是试验安全性及数据可靠性的重要基础[3，4]。近年来，药品来源困难，且静脉注射操作不易掌握，而腹腔注射易致过量抑制呼吸中枢而死亡[5]。本试验所用三溴乙醇曾被推荐作为转基因鼠传代有关的外科手术（如胚胎移植和输精管切除术）的麻醉剂[6]，对昆明小白鼠采取腹腔注射，麻醉起效快，3 min后即可手术，简便易操作。

影响试验动物麻醉的因素很多，同种麻醉药物在不同剂量浓度下会有不同的麻醉效果[7]，如低浓度下生效相对缓慢，对小鼠生理上不会造成太大影响，但剂量过低不能达到持续麻醉的效果，对时间较长的试验还需追加注射，可能造成麻醉药蓄积中毒[8]；高浓度虽然生效快，但同时也增大了麻醉的副作用和死亡率[9]。小鼠在麻醉期间代谢微弱，体温下降明显，在麻醉时做好保暖工作是必须的[10]。手术麻醉后复苏期的妥善观察与护理，可较大幅度减轻动物因体温下降导致的寒颤，减少各种并发症的发生[11]。在手术麻醉中，保温措施可以明显缩短深度麻醉期和麻醉后恢复自主期的时间[12]。动物手术麻醉中采取保温措施，对试验动物顺利安全苏醒有着重要的辅助作用。

参考文献：

[1] PALMITER R D，BRINSTER R L，HAMMER R E，et al. Dramatic growth of mice that developed from eggs microinjected with metallothionein growth hormone fusion genes[J]. Nature，1982，5893（300）：611-615.

[2] 魏庆信，郑新民，李 莉，等.小鼠转基因及传代研究[J].实验动物科学与管理，2005，22（1）：35-39.

[3] 胡玉红，恽时锋，周森妹，等.氯胺胴用于大鼠麻醉的效果观察[J].中国比较医学杂志，2007，17（6）： 348-350.

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[5] 丁运萍，刘旭学.戊巴比妥钠不同注射途径对大鼠麻醉效果的比较[J].四川动物，1999，18（1）：42-43.

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[8] 朱森树，宋淑君.戊巴比妥钠麻醉大鼠时剂量与浓度选择[J].实验动物与比较医学，1998（1）：35.

[9] 詹红微，邱泽文，李慧玲，等.三种麻醉药物对小鼠麻醉效果的比较[J].实验动物科学，2012，29（4）：19-23.

[10] 张 栋，不同麻醉药对大鼠麻醉效果的比较[J].实验动物科学，2007，24（1）：19-20.

[11] 刘瑞莉，蔡树云.保温对全麻下肺癌手术麻醉恢复期患者的影响[J].南方护理学报，2005，12（6）：4-5.

[12] 严国锋，张 健，周 勇，等.保温措施对小鼠麻醉效果的影响[J].实验动物与比较医学，2008，28（5）：341-342.