川参胶囊质量标准研究

川参胶囊质量标准研究

窦建卫1，刘伟2，封南华2，任翠翠1 *

(1.西安交通大学药学院，西安710061；2.铜川市人民医院药剂科，铜川727000)

摘要：目的建立川参胶囊的质量标准。方法采用TLC法分别对胶囊中的牡丹皮、丹参和赤芍进行定性鉴别；采用HPLC法对制何首乌中二苯乙烯苷进行了含量测定。结果牡丹皮、丹参和赤芍薄层鉴别具有较好的专属性，阴性对照无干扰；有效成分二苯乙烯苷在0.626 0～3.754 0μg(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.4%，RSD为1.1%(n=6)。结论所建立的标准简便易行、专属性强，可用于该制剂的质量控制。

关键词：川参胶囊；TLC；质量标准；HPLC

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2015.06.012

中图分类号：R284文献标志码：A

作者简介：窦建卫，男，副教授

收稿日期：(2015-03-20)

Study on the quality standard of Chuanshen Capsules

DOU Jianwei1， LIU Wei2，FENG Nanhua2，REN Cuicui1*(1.School of Pharmacy， Xi′an Jiaotong University， Xi′an 710061， China； 2. Department of Pharmacy, People’s Hospital of Tongchuan， Tongchuan 727000， China)

Abstract:ObjectiveTo set up the quality standard for Chuanshen Capsules. MethodsTLC was adopted for carring out research for Cortex Moutan， Radix Salviae Miltiorrhizae and Paeoniae Radix Rubra in the capsules. HPLC was adopted for quantative analysis of stilbene glycoside. ResultsThe TLC of Cortex Moutan， Radix Salviae Miltiorrhizae and Paeoniae Radix Rubra showed good specificity， and no interference was observed. The calibration curve of stilbene glycoside was in good linearity over the range of 0.626 0-3.754 0 μg (r=0.999 9) and the average recovery was 99.4%， RSD=1.1%(n=6). Conclusion The method was simple，sensitive and accurate， and can be used for the quality control of Chuanshen Capsules.

Key words: Chuanshen Capsules； TLC； quality standard； HPLC

*通信作者：任翠翠，女，在读硕士研究生

川参胶囊是铜川市人民医院长期应用的医疗机构制剂，主要由制何首乌、山楂、益母草、牡丹皮、赤芍、川芎和丹参等组成，具有滋阴潜阳、平肝熄风、活血化瘀、通络止痛、宽胸利气的功效，临床上用于治疗高血压、高血脂、冠心病、心脑梗死、动脉硬化等诸症所致的头晕、心悸、四肢麻木及颜面、肢体抽搐等。何首乌中的卵磷脂和铁分别是细胞膜和血红蛋白组分，能促进红细胞生成，故有补血作用[1]；牡丹皮有清热凉血、活血化瘀[2]的功效；丹参和赤芍有抗血栓、抗血脂和动脉粥样硬化等作用[3-4]。为了控制川参胶囊的质量，本文对该制剂的质量标准进行研究，制定了处方中牡丹皮、丹参和赤芍的薄层鉴别，同时建立了处方中君药制何首乌的有效成分二苯乙烯苷的高效液相色谱含量测定方法。

1仪器与试药

1.1仪器高效液相色谱仪(日本岛津LC-20A型)；AB135-S0.01mg分析天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)。

1.2试药牡丹皮对照药材(批号121490-200501)，丹参对照药材(批号120923-200408)，赤芍对照药材(批号121092-200402)，二苯乙烯苷对照品(批号0844-200003)，均购自中国药品生物制品检定所。川参胶囊样品(0.3 g·粒-1，批号20130601，20130602，20130603)。

2薄层色谱鉴别

2.1牡丹皮的薄层鉴别取本品内容物5 g，加乙醚[5]20 mL，超声提取(功率250 W，频率40 kHz )30 min，滤过，先将滤液蒸干，再用1 mL丙酮溶解残渣，即得供试品溶液。另取牡丹皮对照药材(批号121490-200501)1 g，同法制成牡丹皮对照药材溶液。再按处方比例取不含牡丹皮的阴性对照药材，同法制成阴性对照溶液。照《中国药典》(Ch.P 2010)薄层色谱法(附录ⅥB)实验，吸取上述3种溶液各10 μL，用毛细管分别点于同一薄层板(硅胶G)上，以体积比为4∶1∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸的混合溶液为展开剂，展开，取出，晾干。均匀喷洒50 g·L-1香草醛硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰[6]。3批样品在日光下，均显示牡丹皮特征斑点，且阴性对照无干扰。

2.2丹参的薄层鉴别取本品内容物5 g，加乙醚20 mL，超声处理(功率250 W，频率40 kHz )20 min，残渣滤过，先将滤液蒸干，再用1 mL乙酸乙酯溶解残渣，即得供试品溶液[7]。另取丹参对照药材(批号120923-200408)1 g，同法制成丹参对照药材溶液。再按处方比例取不含丹参的阴性对照药材，同法制成阴性对照溶液。照《中国药典》(Ch.P 2010)薄层色谱法(附录Ⅵ B)实验，用毛细管分别吸取上述对照品溶液5 μL、供试品溶液和阴性对照品溶液各10 μL，分别点于同一薄层板(硅胶G)上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(4∶1)的混合溶剂为展开剂，展开，取出，晾干。3批样品在日光下，均显示丹参特征斑点，且阴性对照无干扰。

2.3赤芍的薄层鉴别取本品内容物5 g，加乙醇15 mL，密塞，超声提取(功率250 W，频率40 kHz )20 min，先将残渣滤过，滤液蒸干，再用1 mL乙醇溶解残渣，即得供试品溶液[8]。另取赤芍对照药材(批号121092-200402)1 g，同法制成赤芍对照药材溶液。再按处方比例取不含赤芍的阴性对照药材，同法制成阴性对照溶液。照《中国药典》(Ch.P 2010)薄层色谱法(附录Ⅵ B)实验，用毛细管分别吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一薄层板(硅胶G)上，以体积比为40∶5∶10∶0.2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸的混合溶剂为展开剂，展开，取出，晾干。3批样品在日光下，均显示赤芍特征斑点，且阴性对照无干扰。

3含量测定

3.1色谱条件及系统适用性实验色谱柱Diamosil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)， 乙腈-水(25∶75)为流动相；流速为1.0 mL·min-1；柱温保持在室温；检测波长选择320 nm；进样量：10 μL。

3.2对照品溶液的制备精密称取二苯乙烯苷对照品(批号0844-200003)适量，加乙醇制成质量浓度为0.2 mg·mL-1的溶液，即得二苯乙烯苷对照品溶液。

3.3供试品溶液的制备取本品内容物1 g(过四号筛)，精密称定；置于索氏提取器中，精密加入25 mL稀乙醇，称定质量，加热回流30 min，放冷至室温，再次称定质量，用稀乙醇补足减失的质量，摇匀，静置，滤过上清液后取续滤液，即得供试品溶液。

3.4阴性对照品溶液的制备按照3.3项下供试品的制备方法，取按生产工艺制备的缺制何首乌药材的阴性样品适量，同法制备阴性对照溶液。

3.5专属性实验精密吸取川参胶囊的对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果阴性样品在二苯乙烯苷位置上未检出色谱峰，表明处方中其他成分对二苯乙烯苷的测定不会产生干扰，该方法专属性良好。

图1HPLC图

A.对照品；B.供试品；C.阴性对照品；1.二苯乙烯苷

Fig.1 HPLC chromatograms

A.reference substance； B.sample； C.negative sample； 1. stilbene glycoside

3.6线性范围精密称取二苯乙烯苷对照品，加乙醇制成1 mL含二苯乙烯苷0.625 6 mg的溶液作为二苯乙烯苷储备溶液，精密量取储备溶液适量，加乙醇稀释制成二苯乙烯苷质量浓度分别为0.062 6，0.125 1，0.187 7，0.250 2，0.312 8和0.375 4 mg·mL-1的溶液，将以上溶液分别进样10 μL，测定峰面积。以峰面积(Y)对进样量(X)进行线性回归，得二苯乙烯苷的回归方程：Y= 1.78×105X-68.31，相关系数r=0.999 9。表明二苯乙烯苷在0.626 0～3.754 0 μg之间有良好的线性关系。

3.7稳定性实验精密吸取供试品溶液(批号20130602)10 μL，分别于0，1，2，4，6和8 h进样，测定二苯乙烯苷的峰面积。结果对照品溶液的RSD为0.91%(n=6)，供试品溶液的RSD为1.39%(n=6)。表明对照品溶液和供试品溶液在8 h内稳定性良好。

3.8重复性实验取川参胶囊(批号20130602)的样品，共6份，按照3.3项下的方法制备川参胶囊供试品溶液，先分别精密取供试品溶液和对照品溶液各10 μL进样，测定，然后再按外标两点法对数方程计算样品中二苯乙烯苷的含量。结果，二苯乙烯苷平均含量为2.67 mg·g-1，RSD值为1.24%，表明本文所建立的方法重复性良好。

3.9加样回收率实验取本品内容物0.5 g(批号20130602)，总共取6份，精密称定每份的质量，分别加入前述制得的二苯乙烯苷对照品溶液适量，按3.3项下制成供试品溶液，色谱条件及测定方法同上。测定，计算回收率，结果见表1。

表1 二苯乙烯苷加样回收率实验结果

Tab.1 Results of recovery test of stilbene glycoside(n=6)

编号取样量/g样品中的量/mg加入量/mg测得总量/mg回收率/%平均回收率/%RSD/%10.48931.30141.25122.5634100.8620.49801.32471.25122.570799.5830.50291.33781.25122.580899.3440.49241.30981.25122.557699.7350.50591.34561.25122.590899.5260.50181.33471.25122.554897.5199.41.1

3.10样品的含量测定取3批(批号20130601，20130602，20130603)不同批次的川参胶囊样品，采用上述色谱条件进行测定，结果3批样品中二苯乙烯苷的含量为2.68±0.03 mg·g-1。

4讨论

川参胶囊是铜川市人民医院中医专家、脑病专家结合多年临床经验总结出的复方。在铜川市人民医院长期应用，治疗患者较多，疗效确切，深受患者好评。本文在前期实验研究和查阅大量文献的基础上，选择对川参胶囊中的牡丹皮、丹参和赤芍进行薄层定性鉴别；对制何首乌中的二苯乙烯苷进行定量控制。结果表明，所选的薄层方法操作简单，色谱条件易于控制，具有可重复性，且薄层检出效果好。此外，二苯乙烯苷的高效液相色谱方法成熟稳定，具有可操作性。因此，本文建立的方法可作为川参胶囊质量标准控制的依据。

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