泄热一号颗粒质量研究

泄热一号颗粒质量研究

刘恬佳1，李志宝2，于秀华1*

(1.长春中医药大学，长春 130021；2.通药制药集团股份有限公司，吉林 通化，134000)

摘要：目的制定制剂泄热一号颗粒的质量控制指标。方法对制剂中胆南星、瓜蒌、枳实3味药材采用TLC法进行定性鉴别，大黄药材中的大黄素和大黄酚总量采用RP-HPLC法测定。结果TLC斑点分离好、清晰、阴性无干扰；大黄素、大黄酚分别在0.031 68～0.316 8 μg、0.032 896～0.328 96 μg范围内线性关系良好，r均为0.999 9，平均回收率分别为98.17%、99.34%，RSD分别为1.53%、2.88%。结论本实验所用方法对制剂的质量能够达到有效控制。

关键词：泄热一号颗粒；质量研究；RP-HPLC

DOI:10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.08.027

中图分类号：R743.33文献标志码： A

文章编号：1003-5699(2015)08-0844-03

基金项目:吉林省中医药管理局资助项目(2012-060)。

作者简介:刘恬佳(1991-)，女，硕士研究生，主要从事中药学研究。

收稿日期:(责任编辑：王丹2014-04-27)

*通信作者:于秀华，电子信箱-zyh1955@163.com

Quality Research of Xiereyihao Particles

LIU Tianjia1,LI Zhibao2,YU Xiuhua1*

(1.Changchun University of Chinese Medicine, Changchun 130021,China;

2.Tongyao Pharmaceutical Group Limited Ltd, Tonghua,134000,Jilin Province China)

Abstract:ObjectiveStudy on the quality research of hospital preparations xiereyihao particles.MethodsBy thin layer chromatography bile arisaema,trichosanthis fructus,fructus aurantii immaturus were differentiated,and to develop a HPLC method for determination of emodin,chrysophanol in rhubarb.ResultsThe TLC spots developed were quite clear；emodin and chrysophanol were in good linearity over the ranges of 0.031 68～0.316 8 μg、0.032 896～0.328 96 μg respectively,r were 0.999 9,the average recoveries were 98.17%、99.34%,with RSD of1.53%、2.88% respectively.ConclusionThis method can be used for quality control of hospital preparations xiereyihao particles.

Keywords:xiereyihao particles;quality research;RP-HPLC

泄热一号颗粒是由枳实、大黄等药组成，经过提取分离后制成的制剂。具有通腑，化痰，泄热的作用，主治中风病痰热腑实证。证见：急性起病，突然半身不遂，口舌歪斜，言语謇涩或不语，偏身麻木，甚则神昏，伴有各种其他临床症状等。为了进一步提高制剂质量控制水平，本实验增加了胆南星、瓜蒌、枳实的薄层色谱鉴别方法，采用高效液相色谱法建立了大黄中大黄素和大黄酚含量测定方法。为泄热一号颗粒的质量控制提供了依据，使制剂质量得到更好控制。

1仪器与材料

LC-2010A高效液相色谱仪(日本岛津)，SPD-10AvP检测器。标准品:辛弗林、猪去氧胆酸、大黄素、大黄酚对照品，大黄对照药材、胆南星对照药材均购自中国药品生物制品检定所。试剂中TLC所用均为分析纯，HPLC测定均为色谱纯，水为超纯水。

2实验方法与结果

2.1薄层鉴别

注：Ⅰ.辛弗林对照品；Ⅱ.样品1；Ⅲ.样品2；Ⅳ.样品3；Ⅴ.阴性 图1　枳实TLC图

2.1.2瓜蒌取本品5 g，研细，加甲醇30 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次20 mL，合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。取瓜蒌对照药材2 g ，按照上述方法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水(12∶1∶0.1∶0.1)为展开剂，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。分别置日光和紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光主斑点。见图2。

注：Ⅰ.瓜蒌对照药材；Ⅱ.样品1；Ⅲ.样品2；Ⅳ.样品3；Ⅴ.阴性 图2　瓜蒌TLC图

2.1.3胆南星取本品5 g，研细，加甲醇25 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干,残渣加入甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液[3]。另取胆南星对照药材2 g，加甲醇20 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解,作为对照药材溶液。再取猪去氧胆酸对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液[4]。吸取供试品溶液4 μL、对照品溶液和对照药材溶液各2 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙醚-三氯甲烷-冰醋酸(2∶2∶1)为展开剂，以10%磷钼酸乙醇溶液为显色剂[5],喷雾均匀，在105 ℃加热至斑点显色清晰。结果表明，供试品色谱在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上分别有暗绿色斑点。见图3。

注：Ⅰ.猪去氧胆酸对照品；Ⅱ.胆南星对照药材；Ⅲ.样品1；Ⅳ.样品2；Ⅴ.样品3；Ⅵ.阴性 图3　胆南星TLC图

2.2大黄素和大黄酚总量含量测定

2.2.1色谱条件与系统适用性试验用WondaSil C18Suoerb柱；以甲醇-0.1%磷酸溶液(20∶80)为流动相；检测波长为254 nm。

2.2.2对照品溶液的制备 分别精密称取大黄素、大黄酚对照品适量，分别用甲醇制成每1 mL含16 μg的溶液，即得[6]。

2.2.3供试品溶液的制备取装量差异项下的本品适量，研细，取约1 g，分析天平精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，加盖密闭，称定重量，置水浴中加热回流50 min，置冰浴中冷却，取出，擦干，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密吸取续滤液2 mL，置圆底烧瓶中，水浴上挥去溶剂，加10%盐酸溶液20 mL，超声使溶解，再加三氯甲烷20 mL，水浴中加热回流90 min，置冰浴中冷却，转移置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取下层溶液，上层液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次10 mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得[7]。

2.2.4线性关系的考察设定对照品溶液进样体积分别为2、5、10、15、20 μL,注入液相色谱仪，测定。大黄素回归方程为Y=4 369 600.97X-1 857.585 34，r=0.999 9；线性范围：0.031 68～0.316 8 μg。大黄酚回归方程为Y=5 478 754.239X-1 134.317 2，r=0.999 9；线性范围：0.032 896～0.328 96 μg。

2.2.5稳定性试验依上述色谱条件，分别在0、4、8、12、24、48 h测供试品溶液吸收峰峰面积，大黄素和大黄酚的RSD为1.06%和0.76%。

2.2.6中间精密度试验将供试品溶液分别用不同仪器、不同人员、不同时间重复测定,大黄素和大黄酚的 RSD分别为0.61%和0.46%。

2.2.7重现性试验将同一批号的样品6份，按照2.2.3项下操作制得供试品溶液I～Ⅵ，依法进行测定，大黄素和大黄酚的RSD为1.03%和1.15%。

假定PDM运行时,输出电流为Iout,在输出电流的给定量上,叠加扰动电流Iinj,并且定义扰动系数为k,扰动系数满足式(5):

2.2.8加样回收率试验取含量经过测定后的样品，研细，取约0.5 g(大黄素和大黄酚含量分别为0.337 mg/g和0.590 mg/g)，共6份，精密称定，再分别精密加入大黄素对照品溶液、大黄酚对照品溶液各1 mL(对照品溶液浓度：大黄素0.168 5 mg/mL，大黄酚0.286 5 mg/mL)，按2.2.3方法制备供试品溶液，测定，结果表明大黄素的平均回收率为98.17%，大黄酚的为99.34%，RSD分别为1.53%、2.88%。

2.2.9样品含量测定按2.2.3方法制备供试品溶液，取供试品溶液和对照品溶液各10 μL，分别进样，测定大黄素与大黄酚总量平均为1.21 mg/g。

3讨论

3.1薄层鉴别方法学考察按照中国药典质量标准方法学考察有关规定，分别对制剂中专属性强、重现性好的枳实、胆南星、大黄的薄层鉴别进行耐用性考察，重点考察了高温、高湿、低温、不同厂家薄层板、不同点样方式等项目，结果表明，展开条件稳定，可以用于制剂质量的控制。

3.2供试品溶液制备方法的选择分别用回流法和超声法提取大黄中的有效成分，通过测定后显示，回流法对制剂中有效成分提取更充分，同时中国药典现行版也采用回流法测定大黄药材中的含量，因此，大黄中含量测定时供试品溶液制备采用回流法。

3.3测定波长及流动相的选择按供试品溶液制备时取样量，折算成处方中除大黄外其他药材的取样量，按上述方法制成空白溶液。取一定量的对照品溶液、供试品溶液及空白溶液，以甲醇和0.1%磷酸溶液的不同比例为流动相进行测定，试验结果确定波长为254 nm,流动相比例为甲醇占80%，0.1%磷酸占20%。同时HPLC图显示对照品色谱峰相对保留时间处供试品溶液也有相同的吸收峰，阴性溶液没有，表明此方法可行。

参考文献：

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