海南江蓠挥发油化学成分的研究

（海南大学海南优势资源化工材料应用技术教育部重点实验室，海南海口570228）

海藻是海洋生物资源的重要组成部分，主要由蓝藻、绿藻、红藻和褐藻等4大藻类组成。据估计，世界海洋中约有24 000余种海藻。海南江蓠（Gracilaria hainanensis）为红藻门（Rhodophycophyta）、红藻纲（Florideophyceae）、杉藻目（Gigartinales）、江蓠科（Gracilariaceae）、江蓠属（Gracilaria）海藻。海南江蓠的主要产地是中国海南及越南，属于暖水性藻类，热带生长。

海藻长期生活在高盐、缺氧的特殊环境里，且为了抵抗海洋微生物的感染和摄食生物的吞食，在长期的进化过程中海藻能合成一些有细胞毒性的次级代谢产物，如具有抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤等的生理活性物质［1－4］。

挥发油的提取方法有水蒸气蒸馏法、索氏提取法及快速溶剂萃取法等。海南江蓠含有较多的多糖胶体，提取挥发油过程中会产生大量的泡沫，严重干扰了水蒸气蒸馏的正常进行。索氏提取法萃取时间长，溶剂使用量大。快速溶剂萃取法（accelerated solvent extraction，ASE）具有萃取时间短、溶剂使用量少、萃取效率高等优点，被广泛应用于环境、食品、制药和聚合物领域。

目前，海南江蓠挥发油化学成分活性物质的提取及研究国内还未见报道。为了寻找海南江蓠中有特殊活性的次级代谢产物，作者采用快速溶剂萃取法萃取海南江蓠挥发油，利用气质联用仪对海南江蓠挥发油化学成分进行分析，拟为进一步开发利用海南江蓠奠定基础。

1 实验

1.1 材料与仪器

海南江蓠于2013年12月采自海南文昌，经过鉴定。

海南江蓠除去杂物、洗净，于45 ℃烘干，粉碎过40目筛，保存于干燥瓶中，备用。

快速溶剂萃取仪，赛默飞世尔科技公司；气质联用仪，德国安捷伦科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 样品制备

取全藻粉，经过快速溶剂萃取仪萃取海南江蓠中的挥发油，得到淡黄色澄清液体，具有海藻芳香气味，4℃冰箱保存。

1.2.2 化学成分分析

利用气质联用仪对海南江蓠挥发油化学成分进行分析。

色谱条件：19091N－133型弹性石英毛细管柱（30 m×0.25mm，0.25μm）；柱温为程序升温，初始温度90 ℃，以6 ℃·min－1升到240 ℃，载气为高纯度氦气，载气流量为1.0 mL·min－1，进样口温度为240 ℃，分流比为100∶1。

质谱条件：离子源为EI源，离子源温度230℃，电子能量70eV，扫描范围（m／z）为50～500aum，电离电压1.2kV，进样量1.0μL。

2 结果与讨论

采用快速溶剂萃取法从海南江蓠挥发油中分离出26个组分，海南江蓠挥发油总离子流图谱如图1 所示。

图1 海南江蓠挥发油总离子流图谱Fig.1 Ion chromatogram of Gracilaria hainanensis volatile oil

经Agilent Mass Hunter化学工作站软件检索分析和查找相关质谱文献资料（图2～4）［5－6］，确定了其中的26种化学成分，按峰面积归一化法进行计算，得到挥发油中各化学成分的相对含量，结果见表1。

表1 海南江蓠挥发油化学成分分析Tab.1 Composition analysis of Gracilaria hainanensis volatile oil

由表1可知，海南江蓠挥发油中，2，5－二正丁基吡唑并［5，1－a］异喹啉、2－（2－苯并噻唑基）－5－甲氧基苯酚、1－（六氢吡咯烷嗪－3－亚基）－3，3－二甲基丁烷－2－酮、苯并吗啉、5－氟－4－咪唑羧酸等5种化合物的相对含量较高，分别占24.5%、10.7%、10.5%、10.3、、9.5%。

图2 苯并吗啉的化学结构式及质谱图Fig.2 Chemical structural formula and mass spectrum of 2，3－dihydro－1，4－benzoxazine

图3 1－（六氢吡咯烷嗪－3－亚基）－3，3－二甲基丁烷－2－酮的化学结构式及质谱图Fig.3 Chemical structural formula and mass spectrum of 1－（hexahydropyrrolizin－3－ylidene）－3，3－dimethyl－butan－2－one

3 结论

采用快速溶剂萃取法萃取海南江蓠（Gracilaria hainanensis）挥发油，利用气质联用仪对挥发油化学成分进行分析，并利用质谱图进行计算机检索，共鉴定出海南江蓠挥发油中26种化合物，其中2，5－二正丁基吡唑并［5，1－a］异喹啉、2－（2－苯并噻唑基）－5－甲氧基苯酚、1－（六氢吡咯烷嗪－3－亚基）－3，3－二甲基丁烷－2－酮、苯并吗啉、5－氟－4－咪唑羧酸等5种化合物的相对含量较高，分别占24.5%、10.7%、10.5%、10.3% 和9.5%。

图4 2－（2－苯并噻唑基）－5－甲氧基苯酚的化学结构式及质谱图Fig.4 Chemical structural formula and mass spectrum of 2－（2－benzothiazolyl）－5－methoxyphenol

［1］罗先群，王新广，钱文斌，等.海南沿海二种海藻抗细菌生物活性物质的提取抑菌活性的研究［J］.中国食品添加剂，2008，（5）：111－118.

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