改良加工工艺对建立SD大鼠缺铁性贫血模型影响的研究
2015-12-26赵伟健黎雄才朱叶萌张富发
赵伟健，黎雄才，朱叶萌，张富发
（广东省医学实验动物中心，广东佛山 528248）
改良加工工艺对建立SD大鼠缺铁性贫血模型影响的研究
赵伟健，黎雄才，朱叶萌，张富发
（广东省医学实验动物中心，广东佛山 528248）
目的：本次研究为了改良低铁饲料配置方法，优化加工工艺，改善产品的成型效果，饲喂低铁饲料辅助少量放血法，建立SD大鼠缺铁性贫血模型，观察发展过程中体态和行为变化，对比不同配方的造模效果。方法：结果：实验组对照组比较各项缺铁性贫血指标极显著差异（P＜0.01），配方1和配方2比较各项缺铁性贫血指标下降显著差异（P＜0.05）。结论：配方1和配方2均造模成功，经过改良配置的低铁饲料同样能够达到很好的造模效果，而且效果更显著。
低铁饲料；放血法；缺铁性；贫血
缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）是当今世界上危及人类（尤其是儿童）健康的问题之一，是体内铁的储存不能满足正常红细胞生成的需要而发生的贫血。是由于铁摄入量不足、吸收量减少、需要量增加、铁利用障碍或丢失过多所至。形态学表现为小细胞低色素性贫血。本次研究是通过优化低铁饲料的配置方法，建立SD大鼠IDA模型。
1 材料与方法
1.1 低铁饲料配置（参考AOAC配方和文献）
配方1：EDTA处理酪蛋白15%，大米粉（梗稻）70%，玉米油5%，明胶5%，混合矿物盐（不含铁）3.5%，复合维生素1.2%，DL-蛋氨酸0.3%。EDTA处理酪蛋白的制备：用去离子水配制1%的EDTA-Na2水溶液；将酪蛋白过20目筛，用1%EDTA-Na2溶液浸泡过夜；捞出酪蛋白放入布袋中，置洗衣机中脱水；反复用去离子水冲洗，直至完全洗净酪蛋白中的EDTA-Na2；脱水后，放入烤箱，80℃烘干，研磨成粉，过20目筛后备用。根据此配方加工出来饲料，经过检测含铁量为16.5mg/kg。
配方2：鸡蛋清粉17.3%，大米粉（梗稻）70%，玉米油5%，明胶3%，混合矿物盐（不含铁）3.5%，复合维生素1.2%。本配方用鸡蛋清粉代替EDTA处理酪蛋白，不用添加DL－蛋氨酸，把原配方中5%明胶降低到3%，同时更换制粒机环模，选择压缩比为5的环模，简化了加工步骤，得到比原配方更好的成型效果，根据此配方加工出来饲料，经过检测含铁量为12.7mg/kg。具体配比见表1。
1.2 建立SD大鼠缺铁性贫血模型由广东省医学实验动物中心提供SPF级4周龄SD大鼠30只，雌雄各半,体重90～110g，随机分为对照组、实验组1、实验组2，每组10只，雌雄各半。对照组饲喂正常铁饲料（正常铁饲料由广东省医学实验动物中心提供，铁含量为352.5mg/kg），实验组1饲喂配方1，实验组2饲喂配方2。
1.3 动物饲养在本中心SPF级动物实验室，实验动物生产许可证号为：SCXK（粤）2008—0002，饲养温度与湿度：20～26℃，40%～70%。动物自由采食，自由饮用净化水。
1.4 实验室检测方法测定血红蛋白（Hb）用氰化高铁血红蛋白法，红细胞计数及红细胞MCV（平均红细胞容积）、MCH（平均红细胞血红蛋白量）、MCHC（平均红细胞血红蛋白浓度）的测定按常规进行。第3周起，各组每只每次每周尾静脉放血1～1.5mL，同时检测各项指标，第8周结束。
1.5 统计学处理采用分组资料t检验（方差不齐则用平方根值代换，直至达到方差齐性要求）。
2 结果
实验组第八周检测结果见表2，与对照组比较各项缺铁性贫血指标呈极显著性差异（p＜0.01），实验组2和实验组1比较各项缺铁性贫血指标呈显著性差异（p＜0.05）。说明实验组1和实验组2均造模成功，而且实验组2比实验组1效果更加显著。
3 讨论
本次研究改良低铁饲料配置方法，优化加工工艺，改善产品的成型效果，饲喂低铁饲料辅助少量放血法，实验组1和实验组2的Hb量均逐渐减低，红细胞形态为小细胞低色素性、MCV、MCH、MCHC各项均下降，说明缺铁性贫血模型建立，同时也证明改良后的配方和工艺生产的产品满足低铁饲料的要求。用配方1配置低铁饲料的工艺复杂，加工过程需要消耗大量的去离子水，浪费大量的人力和物力，而且含铁量主要受到酪蛋白用EDTA处理和去离子水冲洗效果的影响，如果EDTA处理后冲洗不彻底，也不能达到良好的效果。用配方2配置的低铁饲料加工工艺简单，选择蛋清粉比多次用EDTA处理后酪蛋白含铁量还低，因此得到含铁量更低的产品，从而能够达到更好的造模效果。配方1明胶含量为5%，用压缩比为7的环模根本不能得到较好成型效果的产品，最后选择压缩比为5的环模得到很硬的产品，配方2减低了明胶的含量，环模压缩比选择5，因此得到更好的成型效果，或许这个和明胶的粘度有关。但本次选用的机器为铁构造，在加工过程难免造成一定的污染，如果能用不锈机器加工，应该会得到更低含铁量的低铁饲料。
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表1 低铁饲料配置
表2 缺铁性贫血大鼠实验测定值（х±s）
10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．09.017
广东省科技计划项目，编号2011B060300017作者简介：赵伟健（1977～），畜牧师，主要研究方向：实验动物饲料
