气相色谱法测定1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮*

周淑晶，李长胜，关文碧，武晓丽，刘雪，马永强

(1.佳木斯大学药学院，黑龙江佳木斯 154007；2.中国农业大学理学院，北京 100193)

作为吲哚的生物电子等排体，吲唑类衍生物具有与吲哚类似的结构和性质，在抗炎、抗肿瘤、多巴胺拮抗、解热镇痛、抗艾滋病毒、调节蛋白酶活性、蛋白激酶和避孕等方面都有很好的药物活性，在农药如除草剂等方面也有广泛的应用［1–2］，一些缓蚀剂、染料及甜味剂的分子中也存在着吲唑环［3］。由于吲唑类衍生物良好的生物活性和潜在的药用价值，吲唑类衍生物的合成与分析倍受关注。

笔者在进行5-溴-1H-吲唑硝化反应实验时得到一种副产物，经1H NMR，IR及GC–MS确认为1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮。目前有关吲唑类衍生物的分析方法的文献报道较少［4–8］，笔者以实验室自制的1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮为试验对象，以气相色谱法对其进行定量分析，为吲唑类衍生物的分析提供参考。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

气相色谱仪：Aglient 6890型，FPD检测器，美国安捷伦科技有限公司；

乙腈：色谱纯，国药集团化学试剂有限公司；

1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮标准品：纯度为99.5%，中国农业大学应用化学系合成实验室；

1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮样品：3批，中国农业大学应用化学系合成实验室；

实验所用其它试剂均为分析纯。

1.2 色谱条件

色谱柱：DB–5型（30 m×0.25 mm，0.25μm）；进样口温度：220℃；检测器温度：250℃；程序升温：色谱柱初温为150℃，保持1 min，以10℃／min升温至240℃，保留2 min；载气：高纯氮，流量为1 mL／min；进样体积：1.0 μL。

1.3 样品预处理

称取约含1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮0.02 g(准确至0.000 1 g)的试样，置于25 mL容量瓶中，加适量乙腈，用超声波振荡器振荡脱气5 min，冷却至室温后，以乙腈定容至标线，摇匀，用0.22 μm的有机相滤膜过滤后进样。

2 结果与讨论

2.1 溶剂的选择

分别选用乙酸乙酯、乙腈以及二氯甲烷溶解样品进行检测，结果发现样品在乙酸乙酯中的溶解度较在乙腈及二氯甲烷中小；二氯甲烷作溶剂时样品不出峰，原因可能是FPD检测器对二氯甲烷的响应值较小；选用乙腈作溶剂时，样品溶解好且色谱峰形较好。故选用乙腈作溶剂。

2.2 标准色谱图

在1.2色谱条件下，1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮标准品的色谱图如图1。由图1可知，1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮色谱峰峰形尖锐、对称，与溶剂峰分离良好。

图1 1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮标准品色谱图

2.3 标准工作曲线和检出限

称取约含1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮0.01 g(准确至0.000 1 g)的标准品，置于10 mL容量瓶中，加适量乙腈，用超声波振荡器振荡脱气5 min，冷却至室温后，以乙腈定容至标线，然后用乙腈分别 稀 释 成100，150，200，250，300，500 mg／L的 标准系列溶液，摇匀，用0.22 μm的有机相滤膜过滤，按照1.2色谱条件进样分析，将色谱峰面积与对应溶液的质量浓度绘制标准工作曲线，结果表明1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮的质量浓度在100～1 000 mg／L范围内与色谱峰面积线性关系良好，线性方程为y=0.786 6x-16.811，相关系数为0.997 6。以3倍噪比定义检出限，检出限为0.01 mg／L。

2.4 方法精密度和准确度

准确称取同一批次1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮样品3份，分别加入一定量3种不同浓度的标准品溶液，每份添加设5个水平，充分混匀后按1.3方法处理后测定，同一添加样品重复进样5次，测定结果见表1。由表1可知，1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮平均回收率为98.1%～107.9%，测定结果的相对标准偏差为1.67%～1.89%，表明本法测量精密度良好，准确度较高。

表1 1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮加标回收试验结果

2.5 重复性试验

取200 mg／L 1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮标准溶液，按照1.3处理后，在1.2色谱条件下重复测定5次，测定结果见表2。由表2可知，5次测定结果的标准偏差为±0.74，表明试验方法具有较好的重现性，测定数据可靠。

表2 200 mg／L 1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮溶液重复测定结果

3 结语

采用气相色谱法测定1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮，方法准确可靠，精密度良好且分析速度快。本法可适用于1-(5-溴-1H-吲唑-1-基)乙酮的质量控制，并为吲唑类衍生物的分析提供借鉴。

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