祛疣方坐浴对尖锐湿疣皮损T细胞亚群影响观察

祛疣方坐浴对尖锐湿疣皮损T细胞亚群影响观察

张艳峰1,樊磊强1,赵江波2,刘智君1

(1.河北省承德市中心医院，河北承德067000

2.承德护理职业学院，河北承德067000)

摘要：目的：通过了解尖锐湿疣患者局部皮损T细胞亚群的变化，以探讨祛疣方对CA患者局部治疗作用。方法：采用免疫组化染色方法，对38例CA患者局部皮损进行CD4+/CD8+淋巴细胞染色，高倍显微镜下观察阳性细胞的数目。结果：CA患者局部皮损治疗前与正常人群相比，CD4+T细胞、CD8+T细胞升高，其差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后皮损处CD4+T细胞、CD8+T细胞较治疗前降低，其差异有统计学意义(P<0.01)。结论：祛疣方外洗对CA对患者局部T淋巴细胞具有抑制作用。

关键词：尖锐湿疣；T细胞亚群；免疫组化

文章编号：1006-6223(2015)12-2059-02

文献标识码：B

尖锐湿疣(condyloma acuminatum, CA)是一种常见的性传播疾病，发病率呈逐年上升趋势，目前临床根据患者不同情况选择不同的治疗手段，但复发率一直比较高，对患者的心身健康造成严重影响。研究发现，机体细胞免疫功能下降可能是HPV的感染和发病的重要因素之一[1~3]，然而，目前罕有中药局部治疗对皮损处皮肤免疫功能的影响的研究。本研究通过检测CA患者治疗前后的皮损T淋巴细胞亚群，以明确CA患者局部皮肤细胞免疫功能的变化，并探索出一种有效的治疗CA的办法。

1资料与方法

1.1临床资料:38例CA患者均为2013年1月至2014年1月我院皮肤科门诊患者，所有患者均符合2000年卫生部防疫司制订的CA诊断标准。18例为初发性CA，其中男性8例，女性10例，年龄在17~52岁，平均为32.16岁，病程1周~8个月，平均1.5个月；20例为复发性CA，其中男性12例，女性8例，年龄20~50岁，平均33.45岁，病程2周~1.5年，平均4.5个月。20名对照来自包皮环切术的正常皮肤，用于皮损T淋巴细胞亚群检测。

1.2免疫组化法检测皮损T淋巴细胞亚群:选取CA患者皮损组织及正常对照包皮组织，用10%甲醛溶液固定，制成蜡块，4tim切片后平铺于经多聚赖氨酸处理过的载玻片上，严格依照S-P免疫组化试剂盒的说明书对CD4和CD8细胞进行染色。以正常人淋巴结组织为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。判定结果以真皮层细胞膜呈现棕黄色着色的淋巴细胞为阳性细胞，于高倍镜下(×400)随机观察5个视野，计数阳性细胞。

1.3操作步骤:治疗组患者局部皮损处皮肤常规消毒，用5%利多卡因注射液进行局部浸润麻醉，切取局部皮损，应用上述免疫组化法检测皮损处T淋巴细胞亚群。用CO2激光治疗仪除去可见疣体后，用自拟祛疣方药液进行坐浴治疗。该方剂由板蓝根、土茯苓、紫草、木贼、香附、萆薢、苦参组成。每种药各30g，加水至600mL，以文火煎20min，倒出药液，再同法煎20min取液，两液合一。药液温度以热感舒适为宜，坐浴，每次30~40min，2次/d，1付/d，每个疗程14d；4~8个疗程后停药，停药6个月后于原皮损处提取皮肤组织再次进行T细胞亚群检测。

2结果

CA患者治疗前后皮损处CD4+T细胞、CD8+T细胞均高于对照组，其差异有统计学意义(P<0.05)；CA患者治疗后皮损处CD4+、CD8+T细胞较治疗前下降，且差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1　CA患者治疗前后皮损T淋巴细胞亚群的检测结果

t▲、P▲、t△、P△：治疗组治疗前后与对照组相比较；t◇、P◇：治疗组治疗前后相比较

3讨论

尖锐湿疣治疗难点在于解决复发的问题。其复发的主要原因没有解决亚临床感染和潜伏感染。当然也与机体的细胞免疫功能低下密切相关。 目前研究表明，HPV的激活和消退以及治疗效果很大程度上取决于患者的免疫功能，尤其是患者的细胞免疫功能，HPV能够逃避机体的免疫监视，而这正是尖锐湿疣高复发率的重要原因。 Coleman等认为，皮肤局部感染HPV后，感染部位皮肤的表皮与真皮中会出现大量细胞浸润，浸润细胞以淋巴细胞为主。Morelli等发现CA皮损组织中有中、重度T细胞为主的单核细胞浸润。本研究通过检测38例患者局部皮损，发现CD4+、CD8+T细胞在表皮及真皮中均有增高，且以CD8+T细胞增高更显著，说明尖锐湿疣患者皮损局部细胞免疫受到抑制。 CA患者皮损的T淋巴细胞亚群数量变化，提示CA的发病和复发与局部细胞免疫功能具有相关性，因此对CA患者进行局部治疗，有可能对其产生积极的作用，其作用甚至强于系统治疗。故而增强患者局部的细胞免疫功能，有可能达到减少复发的目的。 本研究中，祛疣方治则为“清热、解毒、除湿”。该方由板蓝根、土茯苓、紫草、香附、木贼、苦参、萆薢组成。板蓝根能清热解毒，具有抗病毒作用，能抵制尖锐湿疣病毒HPV的复制，与他药协同作用，促进尖锐湿疣赘生物疣体的消散；香附与木贼草具有软坚散结作用。由于CA好发于会阴部，温热潮湿之处。故加苦参、土茯苓、萆薢清热利湿，全方药物相互作用消除疣体，改善局部环境。本研究中，首选应用CO2激光去除疣体，然后进行中药液坐浴，清热解毒中药起到抗菌作用，从而达到去除局部病毒，防止创面感染，加快创口愈合。最重要的可以达到既祛除原有病灶的病毒，又可以将潜伏病毒一并清除[4,5]，提高治愈率，缩短疗程，减少复发，同时达到治疗和预防的目的。本试验对38例尖锐湿疣患者治疗前后皮损局部CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD4+/CD8+比值的变化分别进行相关性分析，结果显示，CD4+T细胞、CD8+T细胞治疗前后与正常对照比较差异性均有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗前后比较差异性统有计学意义(P<0.05)。提示患者经祛疣方局部坐浴后，明显减少了原有皮损处CD4+及CD8+淋巴细胞阳性率。 祛疣方中各中药对细胞毒性小、抗病毒作用强，可以避免在杀伤病毒的同时对正常细胞的损害。且其不良反应轻微，治疗无瘢痕形成及色素沉着，患者易于接受，值得临床推广。

参考文献:

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[2]Coleman N,Birley HD,Renton AM,et al. Immunological events in regressing renital warts[J].AM Clin Pathol,1994,102:768~774.

[3]Morelli AE, Sanaes C, Dipaola G, et al. Relationnship between types of human papillomavirus and langerhans cells in verrial condyloma and introepithetial neoplasia[J].Am Clin Pathol,1993,99:200~206.

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