银杏达莫注射液对急性心肌梗死再灌注后无复流的作用*

沈长银，陈攀科，盛 瑾，刘德斌，何尤夫，赵然尊

(遵义医学院附属医院心内科，贵州遵义 563099)

临床医学研究

银杏达莫注射液对急性心肌梗死再灌注后无复流的作用*

沈长银，陈攀科，盛 瑾，刘德斌，何尤夫，赵然尊

(遵义医学院附属医院心内科，贵州遵义 563099)

目的探讨分析银杏达莫注射液对兔急性心肌梗死再灌注后无复流的作用。方法以新西兰大白兔为研究对象，建立急性心肌梗死再灌注模型后随机分为对照组(n=14)和治疗组(n=15)，模型建立后分别给予生理盐水或银杏达莫注射液干预。通过采集外周血分析血小板参数;计算两组动物治疗前后心电图ST段抬高指数，并使用Evans Blue染色和硫黄素S染剂行心肌染色后测定心肌缺血面积和无复流程度。结果对照组和治疗组血小板计数比较无差异，但治疗组的平均血小板容积、血小板-大细胞比率和血小板分布密度明显低于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。冠状动脉结扎90min后，两组动物均见ST段显著抬高，ST段抬高指数比较亦无明显差异;而应用银杏达莫注射液或生理盐水注射后于再灌注120min时再次心电图检测显示，两组ST段抬高发生显著变化，与对照组比较，治疗组心电图ST段抬高指数显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。同时治疗组的缺血面积和无复流程度显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论在急性心肌梗死再灌注动物模型中应用银杏达莫注射液能改善血小板参数，减轻心电图ST段抬高指数，降低心肌缺血面积和无复流程度，对防治临床再灌注治疗后无复流现象具有一定应用价值。

无复流;银杏达莫;急性心肌梗死;兔

冠状动脉无复流现象是急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction，AMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(Percutaneous Coronary Intervention，PCI)或溶栓开通梗死相关动脉后，冠状动脉前向TIMI血流减少，导致梗死相关动脉所供应的心肌部位出现的无动脉血流灌注或灌注不良现象。无复流现象常诱发恶性心律失常和心力衰竭发生，导致患者围术期猝死风险增加［1］。临床对无复流现象处理，目前无明确的指南可循，且处理效果不甚理想，常用药物有腺昔、钙离子拮抗剂、硝酸醋类剂、抗血小板药物和他汀类药物等，且常使用多种药物联合应用。本研究通过建立兔的急性心肌梗死再灌注模型，观察应用银杏达莫注射液对于梗死相关罪犯血管无复流现象的影响，以期望为临床防治无复流防治寻找新的治疗方法。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康新西兰大白兔30只，雌雄不限，体质量2.5～3.0 kg，由遵义医学院动物实验中心提供。

1.2 仪器与试剂 小动物呼吸机，心电图机，Evans Blue染剂，2%硫黄素S染剂，戊巴比妥，银杏达莫注射液(贵州益佰制药有限公司，5 mL/支，批准文号:国药准字H52020032)等。

1.3 急性心肌梗死再灌注模型制与分组 取3%戊巴比妥按1～2 mL/kg耳缘静脉注射麻醉后，将动物固定于工作台，连接心电图，并记录正常情况下心电图;剪掉皮毛，于甲状软骨附近切开气管行气管插管，连接小动物呼吸机，调节呼吸频率30～40次/min，呼吸比1∶3，潮气量200～300 mL;于胸骨左缘靠近胸骨处第3～5肋间剪开胸腔，分离心脏，于左心耳和动脉圆锥中间寻找左前降支并结扎，见心尖部逐渐变苍白，同时心电图显示ST段明显抬高;90min后解除结扎，并记录心电图，此即完成心肌梗死再灌注模型。将模型分为两组，即治疗组(n=15)和对照组(n=14)，前者给予银杏达莫(按0.3 mL/kg计算总量，以生理盐水稀释至20 mL)于耳缘静脉注射，后者给予等量(20mL)生理盐水注射。应用银杏达莫或生理盐水后120 min时再次记录心电图。

1.4 血小板参数测定 应用银杏达莫注射液或生理盐水注射后60 min检测财经两组动物的静脉血，行血常规分析，记录血小板参数，包括血小板计数、平均血小板容积、血小板-大细胞比率和血小板分布密度。

1.5 心电图ST段抬高幅度测定 采用ST段抬高指数表示ST段的抬高程度，其计算方法为:ST段抬高指数=各个导联ST段抬高数值总和/ST段抬高的导联数(AVR导联除外)。

1.6 心肌梗死面积与再灌注后无复流面积计算方法 参照刘玲梅等［2］实验方法进行。银杏达莫或生理盐水注射120 min并记录心电图后，自动物耳缘静脉注射2%硫黄素S染剂(1mL/kg)，约2min后原位结扎心脏前降支，再经耳缘静脉快速推注2%Evans Blue染色剂5 mL，见巩膜蓝染后立即夹闭心脏各出入动静脉，心脏在体染色20 min后游离心脏，生理盐水冲洗3次后置于-80℃冰箱速冻20 min，继之按心脏长轴均匀切片(厚度2mm)然后将薄皮相继行Evans Blue染色拍照和紫外灯下硫黄素S拍照。最后将各断面图像输入计算机图像分析系统，分析计算标本缺血区(即结扎区，无蓝色区域)和无复流区(即荧光缺损区域)。心肌无复流程度(%)=［(无复流区/缺血区)×%］;心肌梗死程度(%)=［(梗死区/缺血区)×%］。

2 结果

2.1 血小板参数比较 常规检测动物外周静脉血常规。结果(见表1)，对照组和治疗组血小板计数比较无差异。但在平均血小板容积、血小板-大细胞比率和血小板分布密度方面，与对照组比较，治疗组三个指标明显降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。

表1 两组血小板参数差异比较(x±s)

表1 两组血小板参数差异比较(x±s)

aP＜0.05，与对照组比较。

组别例数血小板计数(×109/L)平均血小板容积(fl)血小板-大细胞比率(%)血小板分布密度(%) 14 2.13±0.34 12.12±1.06 18.47±2.19 36.32±5.41治疗组15 2.27±0.15 8.31±0.96a13.07±1.94a19.84±3.72对照组a

2.2 心电图ST段抬高指数对比 两组动物心肌梗死后及应用药物干预后心电图ST段抬高指数比较(见表2)，结果显示，两组动物心肌梗死前基础心电图比较无差异性;冠状动脉结扎90min后，两组动物均见ST段显著抬高，ST段抬高指数比较亦无明显差异;而应用银杏达莫注射液或生理盐水注射后于再灌注120min时再次心电图检测显示，两组ST段抬高发生显著变化，与对照组比较，治疗组心电图ST段抬高指数显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。

表2 两组动物心电图ST段拾高指数变化比较(x±s)

表2 两组动物心电图ST段拾高指数变化比较(x±s)

aP＜0.05，与对照组比较。

组别 例数结扎前(基线水平)结扎90 min再灌注120 min对照组14 0.01±0.005 0.79±0.25 0.58±0.06治疗组15 0.01±0.004 0.76±0.37a0.28±0.05a

2.3 缺血面积及无复流程度比较 两组动物心肌梗死并以银杏达莫或生理盐水干预处理后检测缺血面积及无复流程度比较(见表3)，结果显示与对照组比较，治疗组的缺血面积和无复流程度显著降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。

表3 两组动物干预治疗后缺血面积及无复流程度比较(±s)

表3 两组动物干预治疗后缺血面积及无复流程度比较(±s)

aP＜0.05，与对照组比较。

组别 例数缺血区面积(%)无复流程度(%) 14 0.61±0.12 61.31±2.84治疗组15 0.43±0.17a43.63±2.42对照组a

3 讨论

无复流现象的本质是心肌微循环障碍，其发生机制尚不完全清楚，目前公认的观点是［1，3］:心肌缺血后再灌注损伤、心肌梗死后心肌细胞及内皮细胞水肿、白细胞及血小板聚集、毛细血管远端栓塞以及介入治疗和溶栓后血管内斑块碎片堵塞心肌远端微血管等。最新观点提出，无复流现象主要是缺血引起的组织和微血管损伤，而不仅仅是微血栓栓塞［4］。目前临床常用的抗无复流现象的药物包括硝酸甘油、维拉帕米、硝普钠和替罗非班等，其作用可能是通过扩张微血管、改善内皮功能以及抗血小板血栓和新生微血栓等机制实现的。然而效果不甚理想，因此，临床介入医师仍在寻找一些更有效的抗无复流药物，尤其是中成药制剂［5-6］。

中药银杏达莫注射液是银杏叶提取物银杏总黄酮并加入抗血小板药物双嘧达莫的复合注射针剂，两药组合具有加强和协同作用。银杏达莫注射液的药理学作用包括:①改善血流动力学，通过改善内皮功能而扩张动脉血管、降低血管壁通透性和改善血管壁水肿［7］;②通过阻断血小板活化因子受体和稳定细胞膜而抑制血小板、红细胞聚集性，增加红细胞变形能力，降低血液粘稠度，调节血液流变学和改善微循环。国内有观察研究显示，银杏达莫可以明显降低冠心病患者血清细胞间粘附分子-1和肿瘤坏死因子-α的水平，从而发挥抗炎症作用和促进动脉粥样硬化斑块稳定［8］。较多的研究显示，银杏达莫通过上述多种机制对于急性脑梗死［9-10］和脑血管痉挛性疾病［11］具有较好的疗效。新近研究显示，银杏达莫注射液显著改善慢血流患者临床心绞痛症状和血流TIMI分级，降低心血管事件发生率［12］。本实验结果发现，在兔的心肌梗死再灌注模型中与对照组比较，治疗组应用银杏达莫注射液显著降低与凝血相关的血小板参数，降低心电图ST段抬高指数，减轻心肌缺血面积和无复流程度，从而降低无复流的发生率。血小板参数包括血小板计数、血小板-大细胞比率、平均血小板容积和血小板分布密度等。研究显示［13］，在急性ST段抬高型心肌梗死患者的梗死相关罪犯血管中，无复流组患者的多项血小板参数如平均血小板容积、血小板分布密度、血小板-大细胞比率显著高于血管复流组;其中血小板-大细胞比率对无复流现象具有预测价值，敏感性和特异性分布为67.0%和62%;且这三种血小板参数在直接PCI患者中对无复流现象具有相似的预测价值［13］。此外，银杏达莫对缓解老年冠心病心绞痛症状亦具有较好的疗效［14］。

无复流现象是临床急性冠脉综合征尤其是急性ST段抬高型心肌梗死患者直接PCI时常见的并发症，增加围术期心血管事件的发生率和死亡率。临床实践中，常用一些简单的临床风险评分指标预测无复流现象，这些指标包括高血糖、胸痛症状出现与冠脉球囊扩张时间延长和低的淋巴细胞计数、支架置入时TIMI血流分级、斑块面积大小、斑块特征(软斑块、偏心性斑块和斑块破裂)和血栓负荷等［15-16］。罪犯血管的血栓负荷常导致持续的冠状动脉慢血流或无复流，而应用冠状动脉内血栓抽吸或血栓切除装置可以有效清除血栓，减轻或降低慢血流和无复流发生，然而这可能并未改善直接PCI患者的5年生存率［17］，这可能与血栓抽吸后冠脉内残留的血栓增加无复流现象有关［18］。

总之，本研究结果显示在兔急性心肌梗反再灌注模型中应用银杏达莫注射液可以降低再灌注后无复流程度，这为临床上急性冠脉综合征患者直接PCI围术期的慢血流或无复流现象防治提供了一种有效的策略。

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［收稿2015-06-23;修回2015-07-10］

(编辑:王福军)

Effect of Ginkgo Dipyidamolum on the no-reflow phenomenon in a rabbit model of acutem yocardial infarction and reperfusion

Shen Changyin，Chen Panke，Sheng Jing，Liu Debin，He Youfu，Zhao Ranzun
(Department of Cardiology，The Affiliated Hospital of Zunyi Medical University，Zunyi Guizhou 563099，China)

Objective To investigate the effect of Ginkgo Dipyidamolum on the no-reflow phenomenon in a rabbitmodel of acutemyocardial infarction and reperfusion.M ethods 29 New-Zealand white rabbits were induced with acutemyocardial infarction and reperfusion and then randomly divided into control group(n=14)or Ginkgo Dipyidamolum Group(n=15)，which received physiological saline or Ginkgo Dipyidamolum，respectively.Platelet indices and the index of ST-segment elevation before and after Ginkgo Dipyidamolum treatment were analyzed.Also，the area of infarctedmyocardium and the extent of no-reflow were detected by Evans Blue staining and Thioflavin S dye staining.Results There was no difference in platelet count between control and treatment group;butmean platelet volume，platelet-large cell ratio and platelet distribution width were significantly lower in treatment group than those in control group(P＜0.05).Both groups had the significant ST segment elevation at90min after coronary artery ligation and ST segment elevation index had no significant difference.However，ST-segmentelevation index were lower in treatmentgroup than in control group at120min after reperfusion and the application of Ginkgo Dipyidamolum and saline(P＜0.05).At the same time，ischemic area and no-flow degrees have a significant reduction in treatment group compared with that in control group(P＜0.05).Conclusion Ginkgo Dipyidamolum has the effect of the improvement of platelet indices and the reduce of ST segment elevation index，aswell as the decrease ofmyocardial ischemic areas and no-flow degrees，in a rabbitmodel of acutemyocardial infarction and reperfusion，indicating itmay become a valuable way for the prevention of no-reflow among the clinical reperfusion therapy.

no-reflow;Ginkgo Dipyidamolum;acutemyocardial infarction;rabbits

R542.2

A

1000-2715(2015)04-0405-03

贵州省中医药管理局中医药、民族医药科学技术研究项目(NO:QZYY2011-72)。

赵然尊，男，博士，主任医师，冠心病介入治疗，研究方向:E-mail:kouke80@126.com。