ER-β在骨转移为首发的非小细胞肺癌中的表达

罗会芹，何义富，，姚艺玮，闫 滢，吴书胜，胡小秀，柯丽红，牛佳郁，李慧敏，胡 冰，季楚舒

临床医学研究

ER-β在骨转移为首发的非小细胞肺癌中的表达

罗会芹1，何义富1，2，姚艺玮1，闫 滢2，吴书胜2，胡小秀2，柯丽红2，牛佳郁2，李慧敏2，胡 冰1，季楚舒

目的检测分析骨转移为首发的非小细胞肺癌中ER-β的表达，分析其与临床预后相关性。方法应用免疫组织化学方法检测经病理证实骨转移为首发的非小细胞肺癌肿瘤组织标本中ER-β的表达，利用χ2检验检测组间表达差异，生存率单因素采用Kaplan-Meier法及Log-rank方法分析，多因素采用COX回归模型进行分析。结果46例骨转移为首发的非小细胞肺癌中ER-β总阳性78.3%，χ2检验未见性别、年龄、病理类型、骨转移灶数目、有无骨外其他部位转移、ALK及CEA影响ER-β表达，各组阳性率差异无统计学意义。多因素分析显示ER-β为影响该类患者预后的独立影响因素（P＝0.035），单因素分析可见ER-β阳性表达组的生存时间明显长于阴性表达组，差异有统计学意义（P＜0.05）。另外ER-β阳性表达时腺癌、单发骨转移患者能获得较长的生存时间，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论骨转移为首发的非小细胞肺癌ER-β表达阳性率高，ER-β阳性表达的患者预后明显好于阴性患者，且其可能为影响患者预后的独立影响因素，ER-β的阳性表达可能与腺癌及单发骨转移患者的预后相关。

骨转移癌；非小细胞肺癌；ER-β

乳腺癌是激素依赖性肿瘤，有研究者提出非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）也是激素依赖性肿瘤，并发现肺癌组织中存在雌激素受体（estrogen receptor，ER）［1］。ER位于核或胞质内，与雌激素结合即形成二聚体，通过与靶基因中的雌激素反应元件特异性结合刺激靶基因转录，从而促进细胞增殖和分化［2］。进一步文献［3］报道肺癌组织中的ER包括雌激素受体-α（estrogen receptor-alpha，ER-α）和雌激素受体-β（estrogen receptor-beta，ER-β），主要为ER-β。有报道［4－5］显示NSCLC组织中ER-β阳性表达约45%～69%，且其与肺癌患者的预后密切相关。临床发现肿瘤组织雌激素受体阳性表达与骨转移癌之间密切相关［6］。但目前国内外尚未见骨转移为首发的NSCLC中ER-β表达及其与预后的相关性报道。该研究收集以骨转移为首发表现的NSCLC 46例患者资料，就此类患者的ER-β表达及其与患者的预后关系加以分析，以期为临床治疗以及预后提供一定的参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病例资料 收集2010年8月～2012年8月以骨转移为首发表现的NSCLC 57例患者资料，来自安徽医科大学附属省立医院41例，安徽省肿瘤医院16例，资料不完整6例，拒绝治疗5例，不计入分析，故46例患者纳入本组分析，年龄46～66岁，中位年龄58岁，男女比例2∶1（31∶15），腺癌33例，鳞癌13例。患者均经肺穿刺活检、骨活检或其他转移部位活检取病理明确诊断。

1.1.2 骨转移癌的诊断 ①病理诊断：骨转移部位取组织活检经病理学明确诊断，共14例。②影像学诊断：骨扫描提示多发骨转移；骨扫描阳性同时经CT、MRI或X线任一证实；骨扫描阳性同时有临床症状，如局部疼痛或压痛、病理性骨折、截瘫者；PET-CT提示骨转移者。符合以上其中1条即诊断为骨转移癌，共46例。③病理及影像学均支持诊断，共14例。

1.2 治疗 所有患者均接受至少2个疗程的铂类药物为基础化疗，一线化疗方案为：吉西他滨或紫杉醇或长春瑞滨联合铂类，分别为12、17、17例。其中3例患者一线联合使用重组人血管内皮抑素治疗。在化疗基础上所有患者均接受双磷酸盐抗骨破坏治疗至少1次，有疼痛患者，接受镇痛治疗，包括药物及局部姑息性放疗镇痛，部分患者至外科行局部固定术。

1.3 免疫组织化学方法将石蜡包埋的癌组织切片，厚4 μm，常规脱蜡，60℃烤箱2 h修复，利用全自动免疫组化仪进行免疫组织化学染色。ER-β试剂盒购自北京博奥森生物有限公司，以细胞核或胞质出现典型棕黄色颗粒为阳性，每次试验均设立阳性与阴性对照组，ER-β采用阳性的卵巢癌切片作为阳性对照组，PBS代替一抗作为阴性对照组。

1.4 随访方法采用电话、信件及门诊的形式随访，生存期自确诊肺癌骨转移日期开始计算至死亡日期为止。如出现中途失访、死于其他原因、随访截止则定义为截尾数据。生存时间以天表示，中位随访时间为24.0个月（3.0～36.0个月）。

1.5 统计学处理采用SPSS 16.0统计软件进行分析，采用χ2检验检测组间ER-β表达的差异，单因素分析采用Kaplan-Meier及Log-rank方法，多因素分析采用COX回归模型。

2 结果

2.1 免疫组织化学结果ER-β阳性定位于肿瘤细胞质。见图1。ER-β的总阳性率为78.3%，χ2检验未见各组间ER-β阳性率表达差异有统计学意义。见表1。

2.2 ER-β的表达与临床特征及预后的关系多因素分析显示ER-β可能为影响该类患者预后的独立影响因素（P＜0.05），见表2。单因素分析可见ER-β阳性表达组的生存时间明显长于阴性表达组，差异有统计学意义（P＜0.05），见图2。另外ER-β阳性表达可能使腺癌（P＜0.05）、单发骨转移（P＜0.05）患者获得较长的生存时间。见表3。

3 讨论

目前发现的雌激素亚型有3种，分别为ER-α、ER-β、ER-γ，ER-β主要分布于卵巢、雄性生殖器官、中枢神经系统中，以卵巢表达水平最高。目前研究［7］已表明ER-β在乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌及肺癌的发生、发展中起着重要作用。近些年有研究［8］显示肺癌组织的ER-β有较高的阳性表达，且与预后密切相关。

本研究显示ER-β的表达在骨转移为首发的NSCLC阳性率高达78.3%，较既往报道［5］的肺癌ER-β阳性表达45%～69%明显高出。由此推测ER-β高表达的肺癌患者可能更易发生骨转移。该组分析可见ER-β的表达与肺癌患者的年龄、性别、病理类型、骨转移灶数目、有无骨外其他部位转移及血清ALK、CEA升高与否无相关性，差异无统计学意义。这与Navaratnam et al［9］报道基本一致。

ER在乳腺癌组织的表达及其预测预后的积极作用已被临床广泛认可。研究［10］发现ER-β高表达的乳腺癌患者预后较差，然而该组分析发现ER-β阳性表达组的生存时间明显长于阴性表达组，差异有统计学意义，且ER-β与骨转移灶数目及病理类型同为骨转移为首发症状NSCLC患者的独立预后影响因素。究其原因可能是ER-β和表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）的表达呈负相关，而EGFR阳性表达是NSCLC的不良预后因素［11-12］。故猜想在骨转移为首发症状NSCLC中 ER-β抑制了EGFR的表达，从而决定了较好的预后。但具体仍需试验进一步验证。此外ER-β的表达可能与肿瘤分化程度相关，分化程度越高，ER阳性表达率越高，从而决定了较好的预后。更甚者认为ER-β阴性表达NSCLC患者即使处于临床早期仍属于高风险人群［13］。故临床上可利用检测ER-β的表达判断骨转移为首发的NSCLC治疗效果及预后。

目前乳腺癌的雌激素治疗已广泛应用于临床，且取得了较好的效果。骨转移为首发的NSCLC就诊时已处于临床晚期，无手术时机，预后差。该组中位生存时间仅237 d，传统的治疗多是铂类为基础的化疗联合支持治疗，但疗效均欠佳，主要原因是肿瘤细胞对化疗易产生耐药。内分泌治疗可能通过改变激素依赖性肿瘤生长所需的内分泌微环境，促使肿瘤细胞增殖停滞于G0／G1期，从而使疾病得到缓解。同时还可作为化疗的多药耐药调节剂，具有化疗增敏、逆转耐药作用。国际肺癌联盟的一项来自多中心的研究［14］显示口服避孕药或接受雌激素或雌、孕激素联合治疗的肺癌患者风险显著下降。三苯氧胺是ER阳性表达的乳腺癌患者最常见的激素治疗药物，近些年逐渐被应用于NSCLC的治疗。其目前主要是通过与传统化疗药物或靶向药物联合治疗肺癌实现抗肿瘤作用，例如三苯氧胺联合盐酸埃克替尼可明显增加NSCLC的化疗疗效［15］。故可认为雌激素受体联合化疗可显著提高化疗疗效，增加患者耐受性，从而延长生存时间。

综上所述，ER-β在骨转移为首发NSCLC中表达率高，且和患者预后密切相关，ER-β阳性表达患者生存期明显延长，故ER-β可作为预后指标指导临床医师评估患者病情。关于ER-β的表达及肺癌的内分泌治疗疗效值得临床进一步探索分析。因本组样本量较少，故分析存在局限性，仍需扩大样本进一步研究。

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The expression of ER-β in NSCLC with symptoms of bone metastases at time of diagnosis

Luo Huiqin1，He Yifu1，2，Yao Yiwei1，et al
（1Dept of Medical Oncology，The Affiliated Provincial Hospital of Anhui Medical University，Hefei 230001；2
Dept of Medical Oncology，Anhui Provincial Cancer Hospital，Hefei 230001）

ObjectiveTo analyze the relationship between ER-β and clinical prognosis by detecting its expression in NSCLC with symptoms of bone metastases at the time of diagnosis.MethodsThe expression of ER-β in tissues was investigated by immunohistochemistry.The differences between groups were analyzed by chi-square test.The survival rates were calculated using the Kaplan-Meier method.The log-rank method was used for univariate analysis，and the Cox regression model was used for multivariate analysis.ResultsThe positive percentage of ER-β expressed in 46 NSCLC patients with bone metastases at the time of diagnosis was 78.3%.The expression of ER-β had no difference among groups of sex，age，tumor subtype，number of bone metastases，more than one bone metastasis，ALK，CEA.Chi-square test did not find statistical differences of ER-β expression among groups.Multivariate analysis showed that ER-β was an independent predictor of overall survival（OS）（P＝0.035）.Univariate analysis showed that the patients who had ER-β positive expression had longer survival time（P＜0.05）.The patients with lung adenocarcinoma or NSCLC with single bone metastasis who present with ER-β positive expression had a significant superior survival rate to ER-β negative expression patients（P＜0.05）.ConclusionHigher expression of ER-β was found in NSCLC patients with bone metastases at time of diagnosis.The patients with ER-β positive expression have a favorable prognosis，and it may be an independent prognosis predictor of these patients. In addition，ER-β positive expression may be closely related with OS of NSCLC patients who have single bone metastasis or adenocarcinoma.

bone metastasis；NSCLC；ER-β

R 734.2

1000－1492（2015）01－0062－04

2014－09－18接收

安徽省自然科学基金（编号：1408085MH179）；安徽省卫生厅医学科研课题（编号：13zc012）

1安徽医科大学附属省立医院肿瘤科，合肥 2300012安徽省肿瘤医院肿瘤内科，合肥 230001

罗会芹，女，硕士研究生；何义富，男，副教授，副主任医师，硕士生导师，责任作者，E-mail：heyifu＠csco.org.cn